| 个人简历 | 第3-6页 |
| 摘要 | 第6-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 前言 | 第15-17页 |
| 1 实验材料和实验主要器材 | 第17-20页 |
| 1.1 实验材料 | 第17-19页 |
| 1.2 实验主要器材 | 第19-20页 |
| 2 实验方法 | 第20-27页 |
| 2.1 细胞的悬浮球培养及传代 | 第20-21页 |
| 2.2 糖原染色 | 第21页 |
| 2.3 流式分选肝癌干细胞标志物CD90的表达量 | 第21-22页 |
| 2.4 流式细胞仪分选加入LY294002后CD90~+的表达量变化 | 第22页 |
| 2.5 MTT法检测CD90~+亚群细胞和CD90~-亚群细胞加入LY294002后的增值率 | 第22-23页 |
| 2.6 qRT-PCR检测CD90~+亚群细胞和CD90~-亚群细胞经LY294002处理前与处理后肝癌干细胞相关干细胞基因CD90、SHP2的mRNA的表达 | 第23-24页 |
| 2.7 CD90~+亚群细胞和CD90~-亚群细胞中CD90、SHP2、P-AKT、AKT蛋白的免疫印迹表达 | 第24页 |
| 2.8 平板克隆实验 | 第24-25页 |
| 2.9 裸鼠体内成瘤实验 | 第25页 |
| 2.10 裸鼠移植瘤免疫组化 | 第25-26页 |
| 2.11 统计学分析 | 第26-27页 |
| 3 结果 | 第27-39页 |
| 3.1 肝癌细胞系MHCC97L贴壁培养第3d和第7d的细胞形态 | 第27-28页 |
| 3.2 肝癌细胞系MHCC97L无血清成球培养第3d和第8d的细胞球形态 | 第28-29页 |
| 3.3 糖原染色结果 | 第29-30页 |
| 3.4 流式细胞仪检测CD90标志物在贴壁培养细胞和成球培养细胞中的表达量 | 第30-31页 |
| 3.5 流式细胞仪分选加入LY294002后CD90~+的表达量变化 | 第31-32页 |
| 3.6 加入LY294004对CD90~+亚群细胞和CD90~-群细胞增殖率的影响 | 第32页 |
| 3.7 CD90~+亚群细胞和CD90-亚群细胞中肝癌干细胞相关基因CD90、SHP2表达量,以及经LY294002处理后表达量的变化 | 第32-34页 |
| 3.8 CD90~+亚群细胞和CD90~-亚群细胞中CD90、SHP2、P-AKT、AKT蛋白表达量 | 第34-35页 |
| 3.9 平板克隆形成能力分析 | 第35-36页 |
| 3.10 加入LY294004前后CD90~+亚群细胞和CD90~-亚群细胞裸鼠体内成瘤情况变化 | 第36-37页 |
| 3.11 加入LY294002前后CD90~+亚群细胞和CD90~-亚群细胞裸鼠移植瘤CD90、SHP2、P-AKT、AKT的蛋白表达量 | 第37-39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 参考文献 | 第41-43页 |
| 综述 | 第43-53页 |
| 参考文献 | 第50-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第54页 |
