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可结合纤维素的五聚体化单链抗体的异源表达与纯化

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第1章 绪论第10-16页
    1.1 抗原抗体的亲和层析第10-12页
        1.1.1 多聚体化可以提高抗原抗体亲和力第10-11页
        1.1.2 亲和层析的固相载体对亲和力也起重要作用第11-12页
        1.1.3 纤维素是较好的亲和层析固相第12页
    1.2 蛋白酶抑制剂第12-14页
        1.2.1 蛋白酶抑制剂有重要的生物功能活性第12-13页
        1.2.2 BBI是一种大豆蛋白酶抑制剂,在医药上具有抗癌等作用第13-14页
    1.3 研究目的及意义第14-16页
        1.3.1 研究目的及意义第14-15页
        1.3.2 研究技术路线第15-16页
第2章 大豆蛋白酶抑制剂(BBI)单链抗体(ScFv)与其含五聚体结构域的载体构建第16-32页
    2.1 实验材料第16页
    2.2 实验仪器与主要试剂第16-21页
        2.2.1 实验仪器第16-17页
        2.2.2 软件工具第17-18页
        2.2.3 主要试剂第18-21页
    2.3 实验方法第21-26页
        2.3.1 感受态的制备第22-23页
        2.3.2 PCR第23-24页
        2.3.3 酶切第24-25页
        2.3.4 核酸电泳胶第25页
        2.3.5 连接第25页
        2.3.6 转化第25页
        2.3.7 筛单克隆抗体第25-26页
        2.3.8 中提质粒第26页
    2.4 实验结果与分析第26-32页
        2.4.1 大豆蛋白酶抑制剂(BBI)与其含五聚体结构域的载体构建第26-28页
        2.4.2 大豆胰蛋白酶抑制剂(BBI)与其含五聚体结构域的PCR扩增和酶切验证第28-32页
第3章 可结合纤维素的五聚体化单链抗体的表达与纯化第32-41页
    3.1 实验材料第32页
    3.2 实验仪器与主要试剂第32-36页
        3.2.1 实验仪器第32页
        3.2.2 主要试剂第32-36页
    3.3 实验方法第36-37页
        3.3.1 诱导原核表达第36页
        3.3.2 超声第36页
        3.3.3 Ni-NTA纯化第36页
        3.3.4 透析复性第36页
        3.3.5 与微晶纤维素(MCC)亲和能力检测第36-37页
        3.3.6 SDS-PAGE考马斯亮蓝染色法(coomassie blue staining)检测第37页
    3.4 实验结果与分析第37-41页
        3.4.1 可结合纤维素的五聚体化单链抗体的表达第37-38页
        3.4.2 pET-22b-1X与pET-22b-260不可结合纤维素的五聚体化单链抗体的表达第38页
        3.4.3 可结合纤维素的五聚体化单链抗体的纯化与复性第38-39页
        3.4.4 pET-22b-1X与pET-22b-260不可结合纤维素的五聚体化单链抗体的纯化第39-40页
        3.4.5 可结合纤维素的五聚体化单链抗体的亲和力检测第40-41页
第4章 结论与展望第41-43页
    4.1 结论第41页
    4.2 展望第41-43页
致谢第43-44页
参考文献第44-47页
综述 Bowman-Birk型大豆胰蛋白酶抑制剂研究进展第47-56页
    1. 大豆胰蛋白酶抑制剂(BBI)第47页
    2.大豆胰蛋白酶抑制剂(BBI)的结构第47-48页
    3.大豆胰蛋白酶抑制剂(BBI)的分离提纯第48-49页
    4.大豆胰蛋白酶抑制剂(BBI)的功能第49-52页
    5.研究的目的与意义第52-54页
    参考文献第54-56页
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文第56-57页
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目第57页

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