摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第1章 前言 | 第9-15页 |
1.1 植物抗逆机制研究 | 第9-10页 |
1.2 非生物胁迫影响水稻生产 | 第10页 |
1.3 逆境胁迫诱导ROS积累与DNA损伤 | 第10-11页 |
1.4 OGG1参与碱基切除修复途径 | 第11-12页 |
1.5 OGG1概述及研究现状 | 第12-13页 |
1.6 OGG1介导抗逆及相关应用 | 第13-14页 |
1.7 研究背景、目的和意义 | 第14-15页 |
第2章 材料与方法 | 第15-32页 |
2.1 实验材料、试剂及实验仪器 | 第15-20页 |
2.1.1 实验材料 | 第15页 |
2.1.2 试剂和药品 | 第15-16页 |
2.1.3 试剂配制 | 第16-20页 |
2.1.4 仪器及设备 | 第20页 |
2.2 实验方法 | 第20-32页 |
2.2.1 生物信息学分析应用 | 第20页 |
2.2.2 OsOGG1及其启动子克隆 | 第20-21页 |
2.2.3 胶回收方法 | 第21-22页 |
2.2.4 质粒提取方法 | 第22页 |
2.2.5 水稻DNA及RNA提取方法 | 第22-24页 |
2.2.6 第一链cDNA合成 | 第24页 |
2.2.7 qRT-PCR引物设计 | 第24-25页 |
2.2.8 实时定量PCR反应 | 第25页 |
2.2.9 烟草注射异源表达蛋白 | 第25-26页 |
2.2.10 融合蛋白诱导表达、提取及纯化 | 第26-27页 |
2.2.11 Western blot检测方法 | 第27-28页 |
2.2.12 水稻超表达载体及基因沉默(RNAi)载体构建 | 第28-31页 |
2.2.13 EHA105农杆菌感受态细胞的制备与转化 | 第31页 |
2.2.14 SOD酶活性测定方法 | 第31-32页 |
第3章 结果与分析 | 第32-45页 |
3.1 OsOGG1基因克隆 | 第32页 |
3.2 OsOGG1启动子功能表达分析 | 第32-34页 |
3.2.1 OsOGG1启动子克隆及持久表达载体构建 | 第32-33页 |
3.2.2 植物组织GUS染色分析启动子功能 | 第33-34页 |
3.3 OsOGG1亚细胞定位分析 | 第34-36页 |
3.3.1 构建OsOGG1亚细胞定位载体 | 第34-35页 |
3.3.2 融合蛋白OsOGG1-GFP瞬时表达和共聚焦荧光显微观察 | 第35-36页 |
3.4 转基因水稻植株鉴定与筛选 | 第36-37页 |
3.5 非生物胁迫处理诱导日本晴OsOGG1的表达分析 | 第37-39页 |
3.6 OsOGG1在水稻干种子及萌发过程中表达分析 | 第39-40页 |
3.7 OsOGG1原核蛋白表达、纯化及抗体制备 | 第40-42页 |
3.7.1 OsOGG1原核表达载体构建 | 第40-41页 |
3.7.2 OsOGG1融合蛋白诱导表达分析 | 第41页 |
3.7.3 OsOGG1融合蛋白纯化及Western blot检测 | 第41-42页 |
3.8 讨论分析 | 第42-45页 |
第4章 创新性与下一阶段工作 | 第45-46页 |
4.1 创新性 | 第45页 |
4.2 下一阶段工作 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
缩略词 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-56页 |
作者简历 | 第56页 |