摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
第一章 绪论 | 第11-29页 |
1.1 前言 | 第11页 |
1.2 混合模式色谱技术 | 第11-15页 |
1.2.1 反相/离子交换模式(RPLC/IEC) | 第11-12页 |
1.2.2 离子交换/疏水模式(IEC/HIC) | 第12-13页 |
1.2.3 亲水/离子交换模式(HILIC/IEC) | 第13页 |
1.2.4 亲水/反相模式(HILIC/RPLC) | 第13-14页 |
1.2.5 尺寸排阻/反相模式(SEC/RPLC) | 第14-15页 |
1.2.6 尺寸排阻/离子交换模式(SEC/IEC) | 第15页 |
1.3 两性离子及其在液相色谱中的应用 | 第15-20页 |
1.3.1 两性离子固定相的定义 | 第15页 |
1.3.2 两性离子固定相的性质 | 第15-16页 |
1.3.3 两性离子在液相色谱中的研究概述 | 第16-18页 |
1.3.4 两性离子色谱固定相的应用 | 第18-20页 |
1.4 本论文的研究意义和研究工作 | 第20-21页 |
参考文献 | 第21-29页 |
第二章 以组氨酸、半胱氨酸和还原型谷胱甘肽为配基的三种混合模式色谱固定相的制备及其色谱性能 | 第29-47页 |
2.1 引言 | 第29页 |
2.2 实验部分 | 第29-34页 |
2.2.1 仪器 | 第29-30页 |
2.2.2 试剂 | 第30-32页 |
2.2.3 固定相的合成及表征 | 第32-33页 |
2.2.4 色谱柱的装填 | 第33页 |
2.2.5 色谱条件 | 第33-34页 |
2.2.6 蛋白质量回收率的测定 | 第34页 |
2.3 结果与讨论 | 第34-44页 |
2.3.1 改性硅胶的表征 | 第34-35页 |
2.3.2 三种两性离子改性硅胶的色谱条件的表征 | 第35-39页 |
2.3.3 两性离子改性硅胶与ODS柱的对比研究 | 第39-40页 |
2.3.4 流动相中乙腈浓度对蛋白分离的影响 | 第40-41页 |
2.3.5 流动相中盐浓度对蛋白分离的影响 | 第41-43页 |
2.3.6 pH值的影响 | 第43-44页 |
2.4 本章小结 | 第44页 |
参考文献 | 第44-47页 |
第三章 配基的疏水性与静电作用对两性离子混合模式固定相分离蛋白的影响 | 第47-63页 |
3.1 引言 | 第47-48页 |
3.2 实验部分 | 第48-50页 |
3.2.1 仪器 | 第48页 |
3.2.2 试剂 | 第48页 |
3.2.3 固定相的合成 | 第48-49页 |
3.2.4 季铵化半胱氨酸改性硅胶色谱柱的装填 | 第49页 |
3.2.5 色谱条件 | 第49页 |
3.2.6 容量因子测定 | 第49页 |
3.2.7 参数logI及Z的测定 | 第49-50页 |
3.2.8 参数j及φ的测定 | 第50页 |
3.3 结果与讨论 | 第50-59页 |
3.3.1 三种季铵化半胱氨酸两性离子固定相对蛋白的分离 | 第50页 |
3.3.2 静电作用对两性离子固定相分离效果的影响 | 第50-52页 |
3.3.3 疏水作用对两性离子固定相分离效果的影响 | 第52-53页 |
3.3.4 盐浓度对两性离子固定相分离效果的影响 | 第53-54页 |
3.3.5 有机溶剂浓度对两性离子固定相分离效果的影响 | 第54页 |
3.3.6 pH对两性离子固定相分离效果的影响 | 第54-57页 |
3.3.7 蛋白质在季铵化半胱氨酸柱上反相保留机理的研究 | 第57-58页 |
3.3.8 蛋白质在季铵化半胱氨酸柱上离子交换保留机理的研究 | 第58-59页 |
3.4 本章小结 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-63页 |
第四章 反相/离子交换液相色谱对鸡蛋清、猪心粗提液和牛奶中蛋白质的分离纯化 | 第63-71页 |
4.1 引言 | 第63页 |
4.2 实验部分 | 第63-65页 |
4.2.1 仪器 | 第63页 |
4.2.2 试剂 | 第63-64页 |
4.2.3 色谱条件 | 第64页 |
4.2.4 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第64页 |
4.2.5 样品的预处理 | 第64-65页 |
4.3 结果与讨论 | 第65-68页 |
4.3.1 离线单柱二维液相色谱法对标准蛋白的分离 | 第65-66页 |
4.3.2 乙基季铵化反相离子交换混合模式固定相对猪心中细胞色素C的分离 | 第66页 |
4.3.3 乙基季铵化反相离子交换混合模式固定相对牛奶的分离 | 第66-67页 |
4.3.4 乙基季铵化反相离子交换混合模式固定相对蛋清的分离 | 第67-68页 |
4.4 本章小结 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-71页 |
攻读硕士期间取得的研究成果 | 第71-73页 |
致谢 | 第73页 |