| 英文缩略词表 | 第9-12页 |
| 中文摘要 | 第12-18页 |
| 英文摘要 | 第18-26页 |
| 1 前言 | 第27-31页 |
| 2 实验材料 | 第31-35页 |
| 2.1 血清标本 | 第31页 |
| 2.2 肝脏组织标本 | 第31页 |
| 2.3 动物 | 第31-32页 |
| 2.4 细胞株 | 第32页 |
| 2.5 药物与试剂 | 第32-34页 |
| 2.6 仪器与设备 | 第34-35页 |
| 3 实验方法 | 第35-47页 |
| 3.1 ELISA法检测不同人群血清中TNF-α与Ang Ⅱ的表达水平 | 第35-36页 |
| 3.2 免疫组化法和Western blot法检测TNF-α、Ang Ⅱ、TNFR1、AT1R、AT2R及GRK2在癌肿、癌周与正常肝脏组织中的表达水平 | 第36-39页 |
| 3.2.1 免疫组化法检测癌肿、癌周和正常肝脏组织中TNF-α、Ang Ⅱ、TNFR1、AT1R、AT2R及GRK2蛋白的表达 | 第36-37页 |
| 3.2.2 Western blot法检测癌肿、癌周和正常肝脏组织中TNF-α、AngⅡ、TNFR1、AT1R、AT2R及GRK2蛋白的表达 | 第37-39页 |
| 3.3 CCK-8法检测TNF-α与Ang Ⅱ对HCC细胞增殖能力的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第39-40页 |
| 3.3.2 细胞增殖检测实验（CCK-8 法） | 第40页 |
| 3.4 细胞划痕法和Transwell法检测TNF-α与Ang Ⅱ对HCC细胞迁移及侵袭能力的影响 | 第40-42页 |
| 3.4.1 细胞划痕法检测HCC细胞的移行能力 | 第40-41页 |
| 3.4.2 Transwell法检测HCC细胞的迁移和侵袭能力 | 第41-42页 |
| 3.5 流式细胞术检测TNF-α与Ang Ⅱ对HCC细胞表面TNFR1、AT1R及AT2R表达水平的影响 | 第42页 |
| 3.6 Western blot法检测TNF-α与Ang Ⅱ对HCC细胞中GRK2表达水平的影响 | 第42-43页 |
| 3.6.1 细胞培养和细胞蛋白的提取 | 第42-43页 |
| 3.6.2 细胞蛋白质的定量和Western blot法检测细胞中GRK2的表达 | 第43页 |
| 3.7 CCK-8 法和Transwell法检测GRK2 si RNA转染后HCC细胞增殖、迁移与侵袭能力的变化 | 第43-44页 |
| 3.7.1 HCC细胞的转染 | 第43-44页 |
| 3.7.2 Western blot法鉴定HCC细胞的转染效率 | 第44页 |
| 3.7.3 CCK-8 法和Transwell法检测HCC细胞转染后细胞的增殖、迁移及侵袭能力 | 第44页 |
| 3.8 CCK-8 法和Transwell法检测TNF-α与Ang Ⅱ对GRK2 siRNA转染的HCC细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响 | 第44-45页 |
| 3.9 Western blot法检测小鼠肝癌造模不同时期肝脏中TNF-α、Ang Ⅱ及GRK2的表达水平 | 第45-46页 |
| 3.9.1 DEN诱导小鼠肝癌模型的制备 | 第45页 |
| 3.9.2 小鼠肝脏病理学检查 | 第45-46页 |
| 3.9.3 Western blot法检测小鼠肝脏中TNF-α、Ang Ⅱ及GRK2蛋白的表达 | 第46页 |
| 3.10 统计学处理 | 第46-47页 |
| 4 结果 | 第47-80页 |
| 4.1 TNF-α和Ang Ⅱ在不同人群血清中的表达水平 | 第47-48页 |
| 4.2 TNF-α、Ang Ⅱ、TNFR1、AT1R、AT2R及GRK2在癌肿、癌周和正常肝脏组织中的表达水平 | 第48-52页 |
| 4.2.1 癌肿、癌周和正常肝脏组织中TNF-α、Ang Ⅱ、TNFR1、AT1R、AT2R及GRK2蛋白的表达情况（免疫组化法） | 第48-50页 |
| 4.2.2 癌肿、癌周和正常肝脏组织中TNF-α、Ang Ⅱ、TNFR1、AT1R、AT2R及GRK2蛋白的表达情况（Western blot法） | 第50-52页 |
| 4.3 TNF-α和Ang Ⅱ对HCC细胞株增殖能力的影响 | 第52-55页 |
| 4.3.1 TNF-α和Ang Ⅱ单独及联合应用增强Hep G2细胞的增殖活性 | 第52-53页 |
| 4.3.2 TNF-α和Ang Ⅱ单独及联合应用增强Bel-7402 细胞的增殖活性 | 第53-55页 |
| 4.4 TNF-α和Ang Ⅱ对HCC细胞株迁移及侵袭能力的影响 | 第55-60页 |
| 4.4.1 TNF-α和Ang Ⅱ单独及联合应用增强Hep G2细胞的移行能力 | 第55-56页 |
| 4.4.2 TNF-α和Ang Ⅱ单独及联合应用增强Hep G2细胞的迁移与侵袭能力 | 第56-57页 |
| 4.4.3 TNF-α和Ang Ⅱ单独及联合应用增强Bel-7402 细胞的移行能力 | 第57-59页 |
| 4.4.4 TNF-α和Ang Ⅱ单独及联合应用增强Bel-7402 细胞的迁移与侵袭能力 | 第59-60页 |
| 4.5 TNF-α和Ang Ⅱ对HCC细胞株表面TNFR1、AT1R及AT2R表达的影响 | 第60-65页 |
| 4.5.1 TNF-α和Ang Ⅱ单独及联合应用诱导Hep G2细胞表面TNFR1、AT1R与AT2R的差异性表达 | 第60-63页 |
| 4.5.2 TNF-α 和Ang Ⅱ 单独及联合应用诱导Bel-7402 细胞表面TNFR1、AT1R与AT2R的差异性表达 | 第63-65页 |
| 4.6 TNF-α和Ang Ⅱ对HCC细胞株中GRK2表达水平的影响 | 第65-68页 |
| 4.6.1 TNF-α和Ang Ⅱ单独及联合应用降低HepG2细胞中GRK2的表达水平 | 第65-66页 |
| 4.6.2 TNF-α和Ang Ⅱ单独及联合应用降低Bel-7402 细胞中GRK2的表达水平 | 第66-68页 |
| 4.7 GRK2对HCC细胞株增殖、迁移和侵袭能力的影响 | 第68-72页 |
| 4.7.1 GRK2低表达增强HepG2细胞的增殖、迁移和侵袭能力 | 第68-70页 |
| 4.7.2 GRK2低表达增强Bel-7402 细胞的增殖、迁移和侵袭能力 | 第70-72页 |
| 4.8 TNF-α和Ang Ⅱ对GRK2 siRNA转染的HCC细胞株增殖、迁移与侵袭能力的影响 | 第72-76页 |
| 4.8.1 TNF-α和Ang Ⅱ对GRK2 si RNA转染的HepG2细胞促增殖、迁移与侵袭能力明显减弱 | 第72-74页 |
| 4.8.2 TNF-α和Ang Ⅱ对GRK2 si RNA转染的Bel-7402 细胞促增殖、迁移与侵袭能力明显减弱 | 第74-76页 |
| 4.9 TNF-α、Ang Ⅱ和GRK2在DEN诱导的小鼠肝癌模型肝脏中的表达水平 | 第76-80页 |
| 4.9.1 DEN诱导的小鼠肝癌模型肝脏整体和病理变化 | 第76-78页 |
| 4.9.2 TNF-α、Ang Ⅱ和GRK2在小鼠肝癌造模不同时期肝脏中的表达水平 | 第78-80页 |
| 5 讨论 | 第80-85页 |
| 5.1 TNF-α和Ang Ⅱ促进HCC细胞的增殖、迁移与侵袭活性 | 第80-81页 |
| 5.2 TNFR1、AT1R和AT2R参与HCC细胞的增殖、迁移与侵袭过程 | 第81-82页 |
| 5.3 GRK2抑制HCC细胞的增殖、迁移与侵袭活性 | 第82-83页 |
| 5.4 TNF-α和Ang Ⅱ通过调节GRK2的表达影响HCC细胞的增殖、迁移与侵袭活性 | 第83-85页 |
| 6 结论 | 第85-86页 |
| 7 本课题的创新点 | 第86-87页 |
| 8 本课题的不足之处和后续工作 | 第87-88页 |
| 9 参考文献 | 第88-100页 |
| 附录 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102-104页 |
| 综述：G蛋白偶联受体激酶2活性和表达的调控及在恶性肿瘤中的作用 | 第104-115页 |
| 参考文献 | 第111-115页 |
