中文摘要 | 第5-7页 |
英文摘要 | 第7-8页 |
英文缩略语名词对照表 | 第9-12页 |
前言 | 第12-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-20页 |
1. MACC1的概述 | 第15-16页 |
2. MACC1在恶性肿瘤中表达及意义 | 第16-18页 |
3. 临床应用及展望 | 第18-20页 |
第二章 MACC1在食管癌细胞株中的表达及其载体的构建 | 第20-33页 |
2.1 实验材料 | 第20-23页 |
2.2 实验方法 | 第23-28页 |
2.2.1 细胞培养的准备工作 | 第23页 |
2.2.2 细胞培养 | 第23-24页 |
2.2.3 重组腺病毒载体的构建 | 第24-25页 |
2.2.4 重组腺病毒载体HEK293A细胞进行病毒扩增 | 第25页 |
2.2.5 重组腺病毒滴度测定 | 第25页 |
2.2.6 MACC1 siRNA转染Eca109细胞 | 第25-26页 |
2.2.7RT-PCR | 第26-27页 |
2.2.8 Western检测MACC1蛋白的表达 | 第27-28页 |
2.2.9 统计学方法 | 第28页 |
2.3 实验结果 | 第28-31页 |
2.3.1 MACC1 mRNA在ESCC细胞株中的表达 | 第28-29页 |
2.3.2 MACC1蛋白在ESCC细胞株中的表达 | 第29页 |
2.3.3 Ad-MACC1感染TE13细胞后MACC1蛋白的表达 | 第29-30页 |
2.3.4 MACC1 siRNA转染Eca109细胞后MACC1基因的表达 | 第30-31页 |
2.4 讨论 | 第31-33页 |
第三章 MACC1对ESCC细胞增殖和迁移的影响 | 第33-40页 |
3.1 材料和方法 | 第33-35页 |
3.1.1 主要试剂和仪器 | 第33页 |
3.1.2 细胞培养 | 第33页 |
3.1.3 MACC1过表达和沉默 | 第33-34页 |
3.1.4 MTT法检测MACC1过表达或沉默对细胞增值能力的影响 | 第34页 |
3.1.5 流式细胞仪检测MACC1过表达或沉默对细胞周期的影响 | 第34页 |
3.1.6 刮除-迁移分析法(Scrape-migration assay) | 第34页 |
3.1.7 槽迁移率分析(Boyden chamber migration assay) | 第34-35页 |
3.1.8 增值和迁移相关蛋白表达的检测 | 第35页 |
3.1.9 统计学方法 | 第35页 |
3.2 实验结果 | 第35-39页 |
3.2.1 MACC1抑制细胞的增值 | 第36页 |
3.2.2 增值细胞核抗原(PCNA)表达 | 第36页 |
3.2.3 细胞周期的变化 | 第36-37页 |
3.2.4 MACC1促进细胞迁移 | 第37页 |
3.2.5 MACC1促进细胞克隆形成 | 第37-38页 |
3.2.6 c-MET的表达 | 第38-39页 |
3.3 讨论 | 第39-40页 |
第四章 主要结论与展望 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-47页 |
作者简介 | 第47页 |