摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第12-26页 |
1.1 固定化酶简介 | 第12-18页 |
1.1.1 固定化酶的概念 | 第13页 |
1.1.2 固定化酶的方法 | 第13-14页 |
1.1.3 固定化酶载体材料的研究与应用 | 第14-16页 |
1.1.4 固定化酶的一般性质 | 第16-17页 |
1.1.5 固定化酶的优缺点 | 第17-18页 |
1.2 固定化酶材料聚电解质刷 | 第18-20页 |
1.2.1 聚合物刷的历史 | 第18页 |
1.2.2 聚合物刷的分类 | 第18-19页 |
1.2.3 聚电解质刷的应用 | 第19-20页 |
1.3 蛋白酶与聚电解质刷的相互作用机制 | 第20-24页 |
1.3.1 蛋白质与聚电解质相互作用的成因 | 第21-22页 |
1.3.2 蛋白质与聚电解质相互作用的分类 | 第22-23页 |
1.3.3 影响蛋白质与聚电解质相互作用的因素 | 第23页 |
1.3.4 纳米球形聚电解质刷(SPB)吸附蛋白的机理 | 第23-24页 |
1.4 本论文的研究目的与研究内容 | 第24-26页 |
1.4.1 研究目的和意义 | 第24-25页 |
1.4.2 研究内容 | 第25-26页 |
第二章 磁性纳米球形聚电解质刷(MSPB)的制备 | 第26-35页 |
2.1 引言 | 第26页 |
2.2 实验试剂与仪器 | 第26-27页 |
2.3 实验方法 | 第27-28页 |
2.3.1 Fe_3O_4的制备 | 第27页 |
2.3.2 光引发剂安息香丙烯酸酯(BA)的合成 | 第27-28页 |
2.3.3 光乳液聚合法制备磁性纳米球形聚电解质刷(MSPB) | 第28页 |
2.4 分析方法 | 第28-29页 |
2.4.1 粒径的测定 | 第28页 |
2.4.2 MSPB热重分析 | 第28页 |
2.4.3 光引发剂表征 | 第28-29页 |
2.5 结果与讨论 | 第29-33页 |
2.5.1 Fe_3O_4的粒度 | 第29页 |
2.5.2 安息香丙烯酸酯(BA)的表征 | 第29-30页 |
2.5.3 BA量对聚电解质链(PB)长度的影响 | 第30-31页 |
2.5.4 丙烯酸量对聚电解质链(PB)长度的影响 | 第31页 |
2.5.5 光反应时间对聚电解质链(PB)长度的影响 | 第31-32页 |
2.5.6 MSPB的形貌结构表征 | 第32-33页 |
2.6 本章小结 | 第33-35页 |
第三章 MSPB固定化蛋白酶固定化条件研究 | 第35-44页 |
3.1 引言 | 第35页 |
3.2 实验试剂与仪器 | 第35页 |
3.3 实验方法 | 第35-38页 |
3.3.1 L-酪氨酸标准曲线的绘制 | 第35-36页 |
3.3.2 BSA-考马斯亮蓝标曲线的绘制 | 第36页 |
3.3.3 酶活测量方法 | 第36-37页 |
3.3.4 蛋白酶等电点的测定 | 第37页 |
3.3.5 MSPB固定化蛋白酶Zeta电位检测 | 第37页 |
3.3.6 pH值对MSPB固定化酶酶活的影响 | 第37页 |
3.3.7 离子强度对固定化酶酶活的影响 | 第37页 |
3.3.8 初始浓度对固定化酶酶活的影响 | 第37页 |
3.3.9 固定化时间对固定化酶酶活的影响 | 第37-38页 |
3.4 结果与讨论 | 第38-43页 |
3.4.1 L-酪氨酸标准曲线 | 第38页 |
3.4.2 BSA-考马斯亮蓝标曲线 | 第38-39页 |
3.4.3 蛋白酶等电点分析 | 第39页 |
3.4.4 Zeta电位分析 | 第39-40页 |
3.4.5 pH对固定化酶酶活的影响 | 第40-41页 |
3.4.6 离子强度对固定化酶酶活的影响 | 第41-42页 |
3.4.7 初始浓度固定化酶酶酶活的影响 | 第42页 |
3.4.8 固定化时间对固定化酶酶活的影响 | 第42-43页 |
3.5 本章小结 | 第43-44页 |
第四章 MSPB固定化蛋白酶的酶学性质 | 第44-51页 |
4.1 引言 | 第44页 |
4.2 实验试剂与仪器 | 第44页 |
4.3 实验方法 | 第44-46页 |
4.3.1 固定化酶和游离酶的最适pH | 第44页 |
4.3.2 固定化酶和游离酶最适温度 | 第44页 |
4.3.3 固定化酶热稳定性 | 第44-45页 |
4.3.4 固定化酶储存稳定性 | 第45页 |
4.3.5 固定化酶米氏常数K_m的测定 | 第45页 |
4.3.6 MSPB固定化酶重复使用性考察 | 第45-46页 |
4.4 结果与讨论 | 第46-50页 |
4.4.1 pH对固定化酶的影响 | 第46页 |
4.4.2 温度对固定化酶的影响 | 第46-47页 |
4.4.3 固定化酶热稳定性 | 第47-49页 |
4.4.4 酶的动力学常数 | 第49页 |
4.4.5 固定化酶的重复使用性 | 第49-50页 |
4.5 本章小结 | 第50-51页 |
第五章 总结与展望 | 第51-53页 |
5.1 全文总结 | 第51页 |
5.2 展望 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-61页 |
致谢 | 第61页 |