| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 引言 | 第13-20页 |
| 1.1 黏膜免疫 | 第13页 |
| 1.2 乳酸乳球菌表达系统及作为活载的应用 | 第13-17页 |
| 1.2.1 宿主菌 | 第14页 |
| 1.2.2 诱导剂——乳链菌肽（Nisin） | 第14-15页 |
| 1.2.3 NICE中的质粒载体 | 第15-16页 |
| 1.2.4 重组乳酸乳球菌作为活载体的应用 | 第16-17页 |
| 1.3 口蹄疫疫苗的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3.1 灭活疫苗 | 第17页 |
| 1.3.2 多表位疫苗 | 第17-18页 |
| 1.3.3 核酸疫苗 | 第18页 |
| 1.3.4 活载体疫苗 | 第18页 |
| 1.4 总结与展望 | 第18-20页 |
| 第二章 牛IFN-α 基因在乳酸乳球菌中的表达及鉴定 | 第20-31页 |
| 2.1 材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第20页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 培养基及主要试剂的配制 | 第20-22页 |
| 2.1.4 主要实验仪器 | 第22页 |
| 2.2 方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 目的基因设计与合成 | 第22页 |
| 2.2.2 引物的设计合成 | 第22页 |
| 2.2.3 重组表达载体的构建 | 第22-25页 |
| 2.2.4 重组表达质粒的鉴定 | 第25页 |
| 2.2.5 蛋白的诱导表达及鉴定 | 第25-26页 |
| 2.3 结果 | 第26-29页 |
| 2.3.1 IFN-α 序列分析及密码子优化 | 第26-27页 |
| 2.3.2 重组表达质粒的鉴定 | 第27-28页 |
| 2.3.3 重组乳酸乳球菌的表达与鉴定结果 | 第28-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 A型FMDV VP1基因在乳酸乳球菌中的表达 | 第31-39页 |
| 3.1 材料 | 第31页 |
| 3.1.1 菌株和毒株 | 第31页 |
| 3.1.2 主要试剂 | 第31页 |
| 3.1.3 主要试剂的配制 | 第31页 |
| 3.2 方法 | 第31-35页 |
| 3.2.1 A型FMDV VP1基因的克隆 | 第31-32页 |
| 3.2.2 目的基因设计与合成 | 第32页 |
| 3.2.3 引物的设计合成 | 第32-33页 |
| 3.2.4 重组表达载体的构建 | 第33-34页 |
| 3.2.5 重组表达质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| 3.2.6 蛋白的诱导表达及鉴定 | 第35页 |
| 3.3 结果 | 第35-37页 |
| 3.3.1 VP1序列分析及密码子优化 | 第35页 |
| 3.3.2 重组表达质粒的鉴定 | 第35-36页 |
| 3.3.3 重组乳酸乳球菌的SDS-PAGE结果分析 | 第36-37页 |
| 3.3.4 重组乳酸乳球菌的Western blotting结果鉴定 | 第37页 |
| 3.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第四章 重组乳酸乳球菌小鼠黏膜免疫的效果研究 | 第39-49页 |
| 4.1 材料 | 第39页 |
| 4.1.1 菌株、病毒和实验动物 | 第39页 |
| 4.1.2 主要试剂 | 第39页 |
| 4.1.3 主要实验仪器 | 第39页 |
| 4.2 方法 | 第39-43页 |
| 4.2.1 小鼠分组及免疫 | 第39-40页 |
| 4.2.2 黏膜样品中sIgA的检测 | 第40页 |
| 4.2.3 血液中IgG、Ig A的检测 | 第40-41页 |
| 4.2.4 外周血CD4~+、CD8~+ T细胞亚群的检测 | 第41页 |
| 4.2.5 脾淋巴细胞增殖试验 | 第41-42页 |
| 4.2.6 小鼠血清中和抗体测定 | 第42-43页 |
| 4.2.7 细胞因子的检测 | 第43页 |
| 4.3 实验结果 | 第43-47页 |
| 4.3.1 黏膜样品中sIgA的检测结果 | 第43-44页 |
| 4.3.2 血液中IgG、Ig A的检测 | 第44页 |
| 4.3.3 外周血CD4~+、CD8~+ T细胞亚群的检测结果 | 第44-45页 |
| 4.3.4 脾淋巴细胞增殖试验结果 | 第45-46页 |
| 4.3.5 中和抗体的检测结果 | 第46页 |
| 4.3.6 细胞因子的检测结果 | 第46-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-49页 |
| 第五章 全文总结 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 附录 | 第56-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简历 | 第59页 |
