| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 引言 | 第8-18页 |
| 1.1 象耳豆根结线虫分布 | 第8-9页 |
| 1.2 根结线虫防治的研究进展 | 第9-11页 |
| 1.2.1 化学药剂防治 | 第9页 |
| 1.2.2 生物防治 | 第9-10页 |
| 1.2.3 农业防治 | 第10页 |
| 1.2.4 物理防治 | 第10页 |
| 1.2.5 抗性品种 | 第10页 |
| 1.2.6 植物检疫 | 第10-11页 |
| 1.3 热激蛋白70家族 | 第11-13页 |
| 1.3.1 Hsp70家族的分类 | 第11-12页 |
| 1.3.2 Hsp70家族蛋白的结构 | 第12页 |
| 1.3.3 Hsp70家族蛋白的生物学功能 | 第12-13页 |
| 1.4 植物寄生线虫Hsp70家族蛋白研究 | 第13-15页 |
| 1.4.1 植物寄生线虫Hsp70功能研究 | 第14页 |
| 1.4.2 植物寄生线虫Hsp70基因的克隆 | 第14页 |
| 1.4.3 植物寄生线虫Hsp70基因的表达 | 第14-15页 |
| 1.4.4 植物寄生线虫Hsp70基因的系统进化 | 第15页 |
| 1.5 展望 | 第15-17页 |
| 1.6 研究的技术路线 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-27页 |
| 2.1 菌株 | 第18页 |
| 2.2 主要试剂与仪器 | 第18-19页 |
| 2.2.1 主要仪器 | 第18页 |
| 2.2.2 主要试剂和培养基配制 | 第18-19页 |
| 2.3 大肠杆菌BL21活化与鉴定 | 第19-21页 |
| 2.3.1 大肠杆菌BL21活化 | 第19页 |
| 2.3.2 提取重组大肠杆菌BL21质粒基因 | 第19-20页 |
| 2.3.3 目的基因PCR扩增 | 第20页 |
| 2.3.4 目的基因回收与鉴定 | 第20-21页 |
| 2.3.5 序列比对 | 第21页 |
| 2.4 大肠杆菌BL21各菌株生长曲线测定 | 第21-22页 |
| 2.5 大肠杆菌BL21各菌株耐热性测定 | 第22页 |
| 2.6 MeHsp70基因表达量与大肠杆菌耐热性相关性测定 | 第22-27页 |
| 2.6.1 MeHsp70基因表达产物SDS-PAGE电泳检测 | 第22-23页 |
| 2.6.2 大肠杆菌BL21 RNA的提取与质量检测 | 第23-24页 |
| 2.6.3 第一链cDNA的合成 | 第24-25页 |
| 2.6.4 cDNA与引物质量的检测 | 第25页 |
| 2.6.5 管家基因实时荧光定量PCR | 第25-26页 |
| 2.6.6 实时荧光定量PCR分析 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-38页 |
| 3.1 大肠杆菌BL21菌株活化 | 第27页 |
| 3.2 重组大肠杆菌BL21质粒基因提取 | 第27-28页 |
| 3.3 PCR扩增结果 | 第28-29页 |
| 3.4 回收目的基因片段 | 第29-30页 |
| 3.5 测序结果 | 第30-32页 |
| 3.6 大肠杆菌BL21热稳定性测定 | 第32-33页 |
| 3.6.1 55℃处理大肠杆菌BL21菌株结果 | 第32页 |
| 3.6.2 65℃处理大肠杆菌BL21菌株结果 | 第32-33页 |
| 3.7 MeHsp70基因表达量SDS-PAGE凝胶电泳检测 | 第33-35页 |
| 3.8 RNA提取结果及质量分析 | 第35页 |
| 3.9 MeHsp70基因实时荧光定量PCR结果 | 第35-36页 |
| 3.10 大肠杆菌BL21各菌株生长曲线测定 | 第36-38页 |
| 3.10.1 37℃下大肠杆菌BL21生长曲线测定结果 | 第36-37页 |
| 3.10.2 30℃下大肠杆菌BL21生长曲线测定结果 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-39页 |
| 4.1 象耳豆根结线虫Hsp70基因对大肠杆菌BL21热稳定性的影响 | 第38-39页 |
| 4.2 象耳豆根结线虫Hsp70基因对大肠杆菌BL21生长特性的影响 | 第39页 |
| 5 结论 | 第39-40页 |
| 5.1 象耳豆根结线虫Hsp70基因对大肠杆菌BL21热稳定性的影响 | 第40页 |
| 5.2 象耳豆根结线虫Hsp70基因对大肠杆菌BL21生长特性的影响 | 第40页 |
| 6 象耳豆根结线虫Hsp70基因研究展望 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-47页 |
| 缩略表 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
