| 摘要 | 第5-7页 |
| abstract | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| 1.1 褐飞虱与水稻的互作研究 | 第12-14页 |
| 1.1.1 褐飞虱的危害与控制 | 第12-13页 |
| 1.1.2 水稻与褐飞虱的协同进化 | 第13-14页 |
| 1.2 昆虫细胞凋亡的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 乙酰胆碱酯酶参与细胞凋亡的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.3.1 乙酰胆碱酯酶的生物学特征 | 第15-16页 |
| 1.3.2 昆虫乙酰胆碱酯酶的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3.3 乙酰胆碱酯酶在凋亡细胞中的表达过程 | 第17-18页 |
| 1.3.4 乙酰胆碱酯酶抑制剂 | 第18页 |
| 1.4 实验中涉及的主要实验技术 | 第18-21页 |
| 1.4.1 免疫组织化学技术的发展与应用 | 第18-19页 |
| 1.4.2 实时荧光定量PCR (Real-time quantitative PCR)技术 | 第19页 |
| 1.4.3 酵母双杂交技术 | 第19-21页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第21-22页 |
| 1.6 技术路线图 | 第22-23页 |
| 第二章 AChE在水稻抗性诱导的褐飞虱凋亡中肠细胞中的定位及表达 | 第23-39页 |
| 2.1 实验材料试剂与材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第23页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第23-25页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第25页 |
| 2.2 实验方法和步骤 | 第25-32页 |
| 2.2.1 褐飞虱中肠细胞系的建立 | 第25-26页 |
| 2.2.2 褐飞虱中肠细胞的凋亡鉴定 | 第26-28页 |
| 2.2.3 AChE基因的RT-PCR检测 | 第28-30页 |
| 2.2.4 Western blot印记杂交检测AChE的表达 | 第30-32页 |
| 2.3 实验结果与分析 | 第32-38页 |
| 2.3.1 酶解法分离褐飞虱中肠细胞及其原代、继代培养 | 第32-33页 |
| 2.3.2 抗性诱导下褐飞虱中肠细胞的凋亡情况与AChE的表达 | 第33-35页 |
| 2.3.3 通过实时定量PCR技术检测AChE的表达 | 第35-37页 |
| 2.3.4 不同抗性处理组的褐飞虱中肠细胞总蛋白的提取检测 | 第37-38页 |
| 2.4 小结 | 第38-39页 |
| 第三章 利用酵母双杂核系统筛选与AChE互作的褐飞虱蛋白 | 第39-55页 |
| 3.1 实验材料与试剂 | 第39-41页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第39页 |
| 3.1.2 主要实验仪器 | 第39页 |
| 3.1.3 主要实验试剂 | 第39-41页 |
| 3.2 实验方法和步骤 | 第41-49页 |
| 3.2.1 褐飞虱cDNA文库的建立 | 第41-44页 |
| 3.2.2 褐飞虱cDNA文库的质量和滴度检测 | 第44-45页 |
| 3.2.3 褐飞虱pGBKT7-ACHE重组诱饵载体的构建 | 第45-47页 |
| 3.2.4 重组诱饵载体的对自身毒性和自激活的检测 | 第47-48页 |
| 3.2.5 利用诱饵质粒pGBKT7-AChE筛选褐飞虱cDNA文库 | 第48-49页 |
| 3.3 实验结果与分析 | 第49-54页 |
| 3.3.1 褐飞虱cDNA文库的建立 | 第49-50页 |
| 3.3.2 文库质量和滴度检测 | 第50-51页 |
| 3.3.3 诱饵质粒的构建 | 第51-52页 |
| 3.3.4 诱饵质粒的自激活和毒性检测 | 第52-53页 |
| 3.3.5 诱饵质粒pGBKT7-AChE筛选褐飞虱cDNA文库 | 第53-54页 |
| 3.4 小结 | 第54-55页 |
| 讨论与展望 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
