摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 引言 | 第10-18页 |
1.1 帕金森病 | 第10页 |
1.2 α-syn在帕金森病中的作用 | 第10-12页 |
1.2.1 α-syn蛋白的聚集 | 第11页 |
1.2.2 α-syn蛋白结构 | 第11-12页 |
1.2.3 α-syn蛋白与自噬的关系 | 第12页 |
1.3 β-syn | 第12-13页 |
1.4 自噬 | 第13-15页 |
1.4.1 自噬介绍 | 第13-15页 |
1.4.2 自噬与帕金森病 | 第15页 |
1.5 MPTP诱导的帕金森病模型 | 第15-18页 |
2 材料和方法 | 第18-36页 |
2.1 对实验过程所需野生型 β-syn质粒的构建 | 第18-25页 |
2.1.1 主要仪器与设备 | 第18页 |
2.1.2 试剂及配制方法 | 第18-20页 |
2.1.3 实验步骤 | 第20-25页 |
2.2 构建MPTP慢性帕金森模型及定位微量病毒注射 | 第25-26页 |
2.2.1 主要材料、仪器与设备 | 第25页 |
2.2.2 主要试剂和配制 | 第25页 |
2.2.3 实验步骤 | 第25-26页 |
2.3 行为学检测 | 第26-27页 |
2.3.1 主要仪器与设备 | 第26页 |
2.3.2 实验步骤 | 第26-27页 |
2.4 小鼠黑质区域神经元放电情况的记录 | 第27-28页 |
2.4.1 主要仪器与设备 | 第27页 |
2.4.2 常用试剂及配制 | 第27页 |
2.4.3 实验步骤 | 第27-28页 |
2.5 免疫荧光、免疫组化和Western blot检测实验 | 第28-36页 |
2.5.1 主要仪器和设备 | 第28-29页 |
2.5.2 主要试剂和配制方法 | 第29-31页 |
2.5.3 实验步骤 | 第31-36页 |
3 结果与讨论 | 第36-56页 |
3.1 野生型 β-syn质粒的构建及鉴定 | 第36-37页 |
3.1.1 质粒构建模型 | 第36页 |
3.1.2 双酶切,Western blot和测序 | 第36-37页 |
3.2 腺病毒AAV的包装和表达 | 第37-39页 |
3.2.1 腺病毒包装质粒的验证 | 第37-38页 |
3.2.2 在小鼠黑质脑区注射 β-syn一个月后的表达情况 | 第38-39页 |
3.3 行为学能力的检测 | 第39-40页 |
3.4 电生理记录黑质脑区神经元放电情况 | 第40-42页 |
3.5 β-syn和 α-syn的表达变化 | 第42-46页 |
3.5.1 β-syn的表达 | 第42-44页 |
3.5.2 α-syn的表达 | 第44-46页 |
3.6 β-syn对多巴胺能神经元的影响 | 第46-51页 |
3.6.1 酪氨酸氢化酶(Tyrosine hydrogenase,TH)的检测 | 第46-48页 |
3.6.2 神经元退化指标的检测 | 第48-51页 |
3.7 β-syn对MPTP小鼠黑质自噬蛋白的影响 | 第51-56页 |
4 结论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-64页 |
致谢 | 第64-66页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第66-67页 |