摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
1 绪论 | 第7-16页 |
1.1 引言 | 第7页 |
1.2 植物维管系统 | 第7-9页 |
1.2.1 初生维管系统 | 第8页 |
1.2.2 次生维管系统 | 第8-9页 |
1.3 植物细胞壁 | 第9-14页 |
1.3.1 细胞壁的结构 | 第9-10页 |
1.3.2 细胞壁的化学成分 | 第10-11页 |
1.3.3 参与次生壁加厚的调控因素 | 第11-14页 |
1.4 细胞骨架与细胞壁的构建关系 | 第14页 |
1.5 本课题研究的目的与意义 | 第14-16页 |
2 材料与方法 | 第16-32页 |
2.1 植物材料 | 第16页 |
2.2 菌株与载体 | 第16页 |
2.3 实验仪器 | 第16页 |
2.4 常用试剂及培养基溶液的配制 | 第16-17页 |
2.5 实验方法 | 第17-32页 |
2.5.1 植物基因组DNA的提取 | 第17页 |
2.5.2 植物总RNA的提取 | 第17-18页 |
2.5.3 首链cDNA的合成 | 第18-19页 |
2.5.4 引物设计 | 第19页 |
2.5.5 载体构建 | 第19-23页 |
2.5.6 目的DNA片段胶回收 | 第23页 |
2.5.7 大肠杆菌转化 | 第23页 |
2.5.8 质粒提取 | 第23-24页 |
2.5.9 农杆菌转化 | 第24页 |
2.5.10 半定量RT-PCR | 第24页 |
2.5.11 实时荧光定量PCR | 第24-25页 |
2.5.12 拟南芥种子的萌发与栽培 | 第25页 |
2.5.13 拟南芥遗传转化 | 第25-26页 |
2.5.14 毛果杨遗传转化 | 第26页 |
2.5.15 植物组织石蜡包埋与切片 | 第26-28页 |
2.5.16 细胞组织化学染色 | 第28页 |
2.5.17 蛋白印迹杂交 | 第28-29页 |
2.5.18 原位杂交 | 第29-31页 |
2.5.19 显微镜观察 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-49页 |
3.1 毛果杨PtrGARP1基因序列分析 | 第32-33页 |
3.2 毛果杨PtrGARP1基因组织内转录表达 | 第33-35页 |
3.3 毛果杨木质化茎组织内PtrGARP1;1 基因RNA原位表达 | 第35-36页 |
3.3.1 PtrGARP1;1 基因原位杂交探针的制备 | 第35-36页 |
3.3.2 毛果杨PtrGARP1;1 基因原位杂交分析 | 第36页 |
3.4 毛果杨PtrGARP1;1-GFP融合蛋白亚细胞定位 | 第36-41页 |
3.4.1 过表达载体构建及转基因拟南芥植株的鉴定 | 第36-39页 |
3.4.2 PtrGARP1;1-GFP融合蛋白亚细胞定位 | 第39-41页 |
3.5 毛果杨PtrGARP1;1 基因在拟南芥中异源表达 | 第41-42页 |
3.5.1 根部形态学观察 | 第41-42页 |
3.5.2 茎段形态学观察 | 第42页 |
3.6 毛果杨PtrGARP1;1 基因敲除突变体表型分析 | 第42-49页 |
3.6.1 毛果杨转基因突变体的制备与植株鉴定 | 第42-46页 |
3.6.2 毛果杨PtrGARP1;1 基因突变体表型分析 | 第46-49页 |
4 讨论 | 第49-51页 |
5 结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-61页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |