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毛果杨PtrGARP1基因的功能研究

摘要第3-4页
Abstract第4页
1 绪论第7-16页
    1.1 引言第7页
    1.2 植物维管系统第7-9页
        1.2.1 初生维管系统第8页
        1.2.2 次生维管系统第8-9页
    1.3 植物细胞壁第9-14页
        1.3.1 细胞壁的结构第9-10页
        1.3.2 细胞壁的化学成分第10-11页
        1.3.3 参与次生壁加厚的调控因素第11-14页
    1.4 细胞骨架与细胞壁的构建关系第14页
    1.5 本课题研究的目的与意义第14-16页
2 材料与方法第16-32页
    2.1 植物材料第16页
    2.2 菌株与载体第16页
    2.3 实验仪器第16页
    2.4 常用试剂及培养基溶液的配制第16-17页
    2.5 实验方法第17-32页
        2.5.1 植物基因组DNA的提取第17页
        2.5.2 植物总RNA的提取第17-18页
        2.5.3 首链cDNA的合成第18-19页
        2.5.4 引物设计第19页
        2.5.5 载体构建第19-23页
        2.5.6 目的DNA片段胶回收第23页
        2.5.7 大肠杆菌转化第23页
        2.5.8 质粒提取第23-24页
        2.5.9 农杆菌转化第24页
        2.5.10 半定量RT-PCR第24页
        2.5.11 实时荧光定量PCR第24-25页
        2.5.12 拟南芥种子的萌发与栽培第25页
        2.5.13 拟南芥遗传转化第25-26页
        2.5.14 毛果杨遗传转化第26页
        2.5.15 植物组织石蜡包埋与切片第26-28页
        2.5.16 细胞组织化学染色第28页
        2.5.17 蛋白印迹杂交第28-29页
        2.5.18 原位杂交第29-31页
        2.5.19 显微镜观察第31-32页
3 结果与分析第32-49页
    3.1 毛果杨PtrGARP1基因序列分析第32-33页
    3.2 毛果杨PtrGARP1基因组织内转录表达第33-35页
    3.3 毛果杨木质化茎组织内PtrGARP1;1 基因RNA原位表达第35-36页
        3.3.1 PtrGARP1;1 基因原位杂交探针的制备第35-36页
        3.3.2 毛果杨PtrGARP1;1 基因原位杂交分析第36页
    3.4 毛果杨PtrGARP1;1-GFP融合蛋白亚细胞定位第36-41页
        3.4.1 过表达载体构建及转基因拟南芥植株的鉴定第36-39页
        3.4.2 PtrGARP1;1-GFP融合蛋白亚细胞定位第39-41页
    3.5 毛果杨PtrGARP1;1 基因在拟南芥中异源表达第41-42页
        3.5.1 根部形态学观察第41-42页
        3.5.2 茎段形态学观察第42页
    3.6 毛果杨PtrGARP1;1 基因敲除突变体表型分析第42-49页
        3.6.1 毛果杨转基因突变体的制备与植株鉴定第42-46页
        3.6.2 毛果杨PtrGARP1;1 基因突变体表型分析第46-49页
4 讨论第49-51页
5 结论第51-52页
参考文献第52-61页
攻读学位期间发表的学术论文第61-62页
致谢第62-63页

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