中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第1章 绪论 | 第12-18页 |
1.1 PCSK9的结构与功能 | 第12-13页 |
1.2 PCSK9与LDLR的研究进展 | 第13-14页 |
1.3 PCSK9抑制剂的种类 | 第14-15页 |
1.4 MicroRNAs的生物合成及其作用机制 | 第15-16页 |
1.5 MicroRNAs与脂质代谢 | 第16-18页 |
第2章 实验材料 | 第18-20页 |
2.1 细胞和主要试剂 | 第18-19页 |
2.2 主要仪器设备 | 第19-20页 |
第3章 实验方法 | 第20-28页 |
3.1 常用试剂的配制 | 第20-21页 |
3.2 细胞培养 | 第21-22页 |
3.2.1 细胞复苏 | 第21页 |
3.2.2 细胞传代 | 第21页 |
3.2.3 细胞冻存 | 第21-22页 |
3.3 细胞转染 | 第22页 |
3.4 双荧光素酶报告基因分析 | 第22-23页 |
3.5 蛋白质印迹法-Western blot | 第23-25页 |
3.5.1 贴壁细胞蛋白质提取 | 第23页 |
3.5.2 SDS-PAGE凝胶配制 | 第23-24页 |
3.5.3 电泳 | 第24页 |
3.5.4 转膜(湿转法) | 第24-25页 |
3.5.5 封闭、抗体孵育与ECL化学发光检测 | 第25页 |
3.6 细胞免疫荧光 | 第25-26页 |
3.7 细胞脂内吞 | 第26页 |
3.8 油红O染色 | 第26页 |
3.9 生物信息学靶标分析网站 | 第26-27页 |
3.10 统计分析 | 第27-28页 |
第4章 实验结果 | 第28-38页 |
4.1 生物信息学预测结果 | 第28-30页 |
4.1.1 miR-224 序列保守性分析 | 第28页 |
4.1.2 miR2245p与PCSK9 mRNA 3′UTR结合位点的预测 | 第28-29页 |
4.1.3 miR2245p与PCSK9 mRNA 3′UTR结合自由能分析 | 第29-30页 |
4.2 双荧光素酶报告基因检测miR2245p与PCSK9 mRNA 3′UTR的结合情况 | 第30-31页 |
4.3 miR2245p对HepG2细胞PCSK9表达的影响 | 第31-32页 |
4.4 miR2245p对HepG2细胞LDLR的调控 | 第32-35页 |
4.5 miR2245p对HepG2细胞内的脂滴含量的影响 | 第35页 |
4.6 miR2245p对HepG2脂质摄取能力的影响 | 第35-38页 |
第5章 讨论 | 第38-44页 |
第6章 结论 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-53页 |
主要英文缩略词索引 | 第53-55页 |
综述 | 第55-78页 |
References | 第72-78页 |
攻读学位期间的科研成果 | 第78-80页 |
课题资助 | 第80-82页 |
致谢 | 第82页 |