摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
缩略表 | 第9-10页 |
第一章 绪论 | 第10-21页 |
1 心血管疾病及相关机理 | 第10-11页 |
2 血管紧张素转化酶的研究现状 | 第11-17页 |
2.1 ACE分子结构 | 第12页 |
2.2 ACE基因结构 | 第12-13页 |
2.3 ACE两个活性基团的研究 | 第13-17页 |
3 ACE抑制剂 | 第17-19页 |
3.1 ACEI与ACE络合结构分析 | 第18-19页 |
4 研究目的与意义 | 第19-21页 |
第二章 ACE-N结构域的基因克隆及载体构建 | 第21-29页 |
1 前言 | 第21页 |
2 材料试剂、仪器和方法 | 第21-25页 |
2.1 材料试剂 | 第21页 |
2.2 仪器 | 第21-22页 |
2.3 ACE-N基因的克隆 | 第22-25页 |
3 结果 | 第25-27页 |
4 讨论 | 第27-29页 |
第三章 ACE-N结构域在毕赤酵母GS115中的表达与纯化 | 第29-39页 |
1 前言 | 第29页 |
2 材料试剂、仪器和方法 | 第29-34页 |
2.1 材料试剂 | 第29页 |
2.2 仪器 | 第29-30页 |
2.3 ACE-N结构域的表达与纯化 | 第30-34页 |
3 结果 | 第34-37页 |
3.1 毕赤酵母重组子的鉴定和筛选 | 第34-35页 |
3.2 硫酸铵饱和度选择 | 第35页 |
3.3 ACE-N结构域蛋白的诱导表达纯化和鉴定 | 第35-37页 |
3.4 ACE-N结构域蛋白的浓度测定 | 第37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
第四章 ACE、ACE-N和ACE-C水解HHL酶学活性分析 | 第39-51页 |
1 前言 | 第39-40页 |
2 材料试剂、仪器和方法 | 第40-42页 |
2.1 材料试剂 | 第40页 |
2.2 仪器 | 第40页 |
2.3 ACE,ACE-N,ACE-C酶学动力学分析 | 第40-42页 |
3 结果 | 第42-48页 |
3.1 蛋白浓度测定 | 第42-43页 |
3.2 马尿酸标准曲线测定 | 第43页 |
3.3 酶活测定结果 | 第43-44页 |
3.4 米氏常数Km测定结果 | 第44-46页 |
3.5 方法回收率与精密度试验 | 第46页 |
3.6 HPLC色谱图 | 第46-48页 |
4 讨论 | 第48-51页 |
第五章 结论与展望 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-55页 |