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大豆胚尖遗传转化体系的优化及MYB转录因子转基因大豆的鉴定

中文摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第一章 绪论第12-24页
    1.1 植物遗传转化技术概述第12-14页
        1.1.1 农杆菌介导的遗传转化法第12页
        1.1.2 花粉管通道法第12-13页
        1.1.3 聚乙二醇法第13页
        1.1.4 电激法第13-14页
        1.1.5 基因枪法第14页
    1.2 大豆遗传转化的再生系统第14-17页
        1.2.1 丛生芽器官发生途径的再生体系第15页
        1.2.2 原生质体培养的再生体系第15-16页
        1.2.3 体细胞胚胎发生的再生途径第16-17页
    1.3 影响农杆菌介导遗传转化的因素第17-19页
        1.3.1 基因型第17页
        1.3.2 受体类型第17-18页
        1.3.3 农杆菌菌株第18页
        1.3.4 抗氧化剂第18-19页
        1.3.5 培养条件第19页
        1.3.6 筛选方式第19页
    1.4 MYB 转录因子的研究现状第19-21页
        1.4.1 植物 MYB 转录因子的主要特征及其分类第19-20页
        1.4.2 大豆中的 MYB 转录因子第20-21页
    1.5 大豆异黄酮的概述第21-22页
        1.5.1 大豆异黄酮的分布及生物学特性第21页
        1.5.2 大豆异黄酮的生理功能第21-22页
        1.5.3 大豆异黄酮的需求现状第22页
        1.5.4 大豆异黄酮的生物合成途径第22页
    1.6 研究的目的和意义第22-24页
第二章 大豆胚尖遗传转化体系的优化第24-34页
    2.1 材料第24-25页
        2.1.1 供试材料第24页
        2.1.2 菌株和载体第24页
        2.1.3 激素和相关生化试剂第24-25页
        2.1.4 仪器第25页
        2.1.5 基础培养基第25页
        2.1.6 遗传转化过程相关培养基第25页
    2.2 方法第25-29页
        2.2.1 胚尖遗传转化体系的操作流程第25-27页
        2.2.2 胚尖遗传转化体系的优化第27-28页
        2.2.3 乙酰丁香酮(AS)的浓度对抗性植株再生率的影响第28页
        2.2.4 AS 活化对再生率及转化率的影响第28页
        2.2.5 IAA 浓度对生根的影响第28页
        2.2.6 IAA 与 IBA 对毛状根影响的比较分析第28-29页
    2.3 结果与分析第29-33页
        2.3.1 AS 的浓度对抗性植株再生率的影响第29页
        2.3.2 AS 活化对再生率及转化率的影响第29-30页
        2.3.3 IAA 浓度对生根的影响第30-31页
        2.3.4 IAA 与 IBA 对毛状根影响的比较分析第31-32页
        2.3.5 优化后的胚尖遗传转化率第32-33页
    2.4 讨论第33页
    2.5 本章小结第33-34页
第三章 MYB 转录因子的转化及转基因大豆的鉴定第34-44页
    3.1 材料第34-36页
        3.1.1 供试材料第34页
        3.1.2 仪器第34页
        3.1.3 试剂第34页
        3.1.4 检测所需相关药品配方第34-36页
    3.2 方法第36-39页
        3.2.1 MYB12A 及 MYB12B2 的遗传转化第36页
        3.2.2 T0代植株的 PCR 检测第36-37页
        3.2.3 T1代植株的 Glufosinate 涂抹及 PCR 检测第37页
        3.2.4 T2代植株 BAR 试纸条检测第37页
        3.2.5 T2代植株 Western blot 检测第37-39页
    3.3 结果与分析第39-42页
        3.3.1 菌液 PCR第39页
        3.3.2 T0代植株的 PCR 检测第39-40页
        3.3.3 T1代植株的 Glufosinate 涂抹第40-41页
        3.3.4 T1代植株 PCR第41-42页
        3.3.5 T2代植株 BAR 试纸条检测第42页
        3.3.6 T2代植株 Western blot 检测第42页
    3.4 讨论第42-43页
    3.5 本章小结第43-44页
第四章 大豆异黄酮含量测定第44-53页
    4.1 材料第44页
        4.1.1 供试材料第44页
        4.1.2 仪器第44页
        4.1.3 试剂与耗材第44页
    4.2 方法第44-46页
        4.2.1 色谱条件第44-45页
        4.2.2 标准品的配置第45页
        4.2.3 标准曲线的绘制第45页
        4.2.4 样品的制备第45页
        4.2.5 样品的测定第45-46页
    4.3 结果与分析第46-51页
        4.3.1 流动相的选择第46页
        4.3.2 大豆异黄酮标准曲线的绘制第46-47页
        4.3.3 相同基因的不同品种异黄酮含量分析第47-51页
        4.3.4 相同品种的不同基因异黄酮含量分析第51页
    4.4 讨论第51-52页
    4.5 本章小结第52-53页
结论第53-54页
参考文献第54-61页
作者简介第61-62页
致谢第62页

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