中文摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第12-24页 |
1.1 植物遗传转化技术概述 | 第12-14页 |
1.1.1 农杆菌介导的遗传转化法 | 第12页 |
1.1.2 花粉管通道法 | 第12-13页 |
1.1.3 聚乙二醇法 | 第13页 |
1.1.4 电激法 | 第13-14页 |
1.1.5 基因枪法 | 第14页 |
1.2 大豆遗传转化的再生系统 | 第14-17页 |
1.2.1 丛生芽器官发生途径的再生体系 | 第15页 |
1.2.2 原生质体培养的再生体系 | 第15-16页 |
1.2.3 体细胞胚胎发生的再生途径 | 第16-17页 |
1.3 影响农杆菌介导遗传转化的因素 | 第17-19页 |
1.3.1 基因型 | 第17页 |
1.3.2 受体类型 | 第17-18页 |
1.3.3 农杆菌菌株 | 第18页 |
1.3.4 抗氧化剂 | 第18-19页 |
1.3.5 培养条件 | 第19页 |
1.3.6 筛选方式 | 第19页 |
1.4 MYB 转录因子的研究现状 | 第19-21页 |
1.4.1 植物 MYB 转录因子的主要特征及其分类 | 第19-20页 |
1.4.2 大豆中的 MYB 转录因子 | 第20-21页 |
1.5 大豆异黄酮的概述 | 第21-22页 |
1.5.1 大豆异黄酮的分布及生物学特性 | 第21页 |
1.5.2 大豆异黄酮的生理功能 | 第21-22页 |
1.5.3 大豆异黄酮的需求现状 | 第22页 |
1.5.4 大豆异黄酮的生物合成途径 | 第22页 |
1.6 研究的目的和意义 | 第22-24页 |
第二章 大豆胚尖遗传转化体系的优化 | 第24-34页 |
2.1 材料 | 第24-25页 |
2.1.1 供试材料 | 第24页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第24页 |
2.1.3 激素和相关生化试剂 | 第24-25页 |
2.1.4 仪器 | 第25页 |
2.1.5 基础培养基 | 第25页 |
2.1.6 遗传转化过程相关培养基 | 第25页 |
2.2 方法 | 第25-29页 |
2.2.1 胚尖遗传转化体系的操作流程 | 第25-27页 |
2.2.2 胚尖遗传转化体系的优化 | 第27-28页 |
2.2.3 乙酰丁香酮(AS)的浓度对抗性植株再生率的影响 | 第28页 |
2.2.4 AS 活化对再生率及转化率的影响 | 第28页 |
2.2.5 IAA 浓度对生根的影响 | 第28页 |
2.2.6 IAA 与 IBA 对毛状根影响的比较分析 | 第28-29页 |
2.3 结果与分析 | 第29-33页 |
2.3.1 AS 的浓度对抗性植株再生率的影响 | 第29页 |
2.3.2 AS 活化对再生率及转化率的影响 | 第29-30页 |
2.3.3 IAA 浓度对生根的影响 | 第30-31页 |
2.3.4 IAA 与 IBA 对毛状根影响的比较分析 | 第31-32页 |
2.3.5 优化后的胚尖遗传转化率 | 第32-33页 |
2.4 讨论 | 第33页 |
2.5 本章小结 | 第33-34页 |
第三章 MYB 转录因子的转化及转基因大豆的鉴定 | 第34-44页 |
3.1 材料 | 第34-36页 |
3.1.1 供试材料 | 第34页 |
3.1.2 仪器 | 第34页 |
3.1.3 试剂 | 第34页 |
3.1.4 检测所需相关药品配方 | 第34-36页 |
3.2 方法 | 第36-39页 |
3.2.1 MYB12A 及 MYB12B2 的遗传转化 | 第36页 |
3.2.2 T0代植株的 PCR 检测 | 第36-37页 |
3.2.3 T1代植株的 Glufosinate 涂抹及 PCR 检测 | 第37页 |
3.2.4 T2代植株 BAR 试纸条检测 | 第37页 |
3.2.5 T2代植株 Western blot 检测 | 第37-39页 |
3.3 结果与分析 | 第39-42页 |
3.3.1 菌液 PCR | 第39页 |
3.3.2 T0代植株的 PCR 检测 | 第39-40页 |
3.3.3 T1代植株的 Glufosinate 涂抹 | 第40-41页 |
3.3.4 T1代植株 PCR | 第41-42页 |
3.3.5 T2代植株 BAR 试纸条检测 | 第42页 |
3.3.6 T2代植株 Western blot 检测 | 第42页 |
3.4 讨论 | 第42-43页 |
3.5 本章小结 | 第43-44页 |
第四章 大豆异黄酮含量测定 | 第44-53页 |
4.1 材料 | 第44页 |
4.1.1 供试材料 | 第44页 |
4.1.2 仪器 | 第44页 |
4.1.3 试剂与耗材 | 第44页 |
4.2 方法 | 第44-46页 |
4.2.1 色谱条件 | 第44-45页 |
4.2.2 标准品的配置 | 第45页 |
4.2.3 标准曲线的绘制 | 第45页 |
4.2.4 样品的制备 | 第45页 |
4.2.5 样品的测定 | 第45-46页 |
4.3 结果与分析 | 第46-51页 |
4.3.1 流动相的选择 | 第46页 |
4.3.2 大豆异黄酮标准曲线的绘制 | 第46-47页 |
4.3.3 相同基因的不同品种异黄酮含量分析 | 第47-51页 |
4.3.4 相同品种的不同基因异黄酮含量分析 | 第51页 |
4.4 讨论 | 第51-52页 |
4.5 本章小结 | 第52-53页 |
结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
作者简介 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |