摘要 | 第4-6页 |
abstract | 第6-7页 |
1 引言 | 第11-31页 |
1.1 大薯简介 | 第11-12页 |
1.2 薯蓣属植物分子育种研究进展 | 第12-28页 |
1.2.1 分子标记研究进展 | 第13-18页 |
1.2.2 薯蓣属转基因研究进展 | 第18-28页 |
1.3 研究思路 | 第28-29页 |
1.4 本研究目的和意义 | 第29-30页 |
1.5 技术路线 | 第30-31页 |
2 材料与方法 | 第31-41页 |
2.1 植物材料和仪器 | 第31-34页 |
2.1.1 植物材料 | 第31-32页 |
2.1.2 仪器设备 | 第32-33页 |
2.1.3 AFLP中所用接头和引物的序列 | 第33页 |
2.1.4 质粒与农杆菌菌株 | 第33-34页 |
2.2 大薯种质资源遗传多样性AFLP分析 | 第34-35页 |
2.2.1 基因组DNA的提取 | 第34页 |
2.2.2 酶切连接 | 第34页 |
2.2.3 预扩增 | 第34-35页 |
2.2.4 特异性扩增 | 第35页 |
2.2.5 引物的筛选 | 第35页 |
2.2.6 统计分析 | 第35页 |
2.3 大薯类原球茎的离体诱导及再生体系的建立 | 第35-37页 |
2.3.1 外植体的接种及无菌苗的获得 | 第35页 |
2.3.2 类原球茎的诱导 | 第35-36页 |
2.3.3 类原球茎的增殖 | 第36-37页 |
2.3.4 类原球茎的生长与生根 | 第37页 |
2.3.5 类原球茎的离体诱导及增殖分化的验证 | 第37页 |
2.3.6 类原球茎植株的炼苗与移栽 | 第37页 |
2.4 大薯类原球茎的发育解剖学观察 | 第37-38页 |
2.5 大薯类原球茎遗传转化体系的构建 | 第38-39页 |
2.5.1 类群原球茎遗传转化体系的正交试验设计 | 第38页 |
2.5.2 根癌农杆菌的活化及侵染 | 第38-39页 |
2.5.3 除根癌农杆菌 | 第39页 |
2.5.4 组织化学染色 | 第39页 |
2.6 遗传转化体系的验证-SikSAD基因转化大薯的研究 | 第39-41页 |
2.6.1 卡那霉素对大薯类原球茎诱导和增殖分化的影响 | 第39页 |
2.6.2 侵染与转化 | 第39-40页 |
2.6.3 PCR检测 | 第40页 |
2.6.4 半定量及定量PCR | 第40-41页 |
3 结果与分析 | 第41-71页 |
3.1 大薯种质资源遗传多样性AFLP分析 | 第41-48页 |
3.1.1 基因组DNA的提取 | 第41页 |
3.1.2 大薯材料的AFLP扩增结果 | 第41-43页 |
3.1.3 不同引物组合的标记效率 | 第43-44页 |
3.1.4 大薯遗传多样性分析 | 第44-48页 |
3.2 大薯类原球茎的离体诱导及再生体系的建立 | 第48-58页 |
3.2.1 不同生长物质组合培养基诱导类原球茎 | 第48-50页 |
3.2.2 不同生长物质组合培养基对类原球茎增殖的影响 | 第50-53页 |
3.2.3 类原球茎的生长与生根 | 第53-54页 |
3.2.4 类原球茎的离体诱导及增殖分化的验证 | 第54-56页 |
3.2.5 类原球茎植株的炼苗与移栽 | 第56-58页 |
3.3 大薯类原球茎的发育解剖学观察 | 第58-62页 |
3.4 大薯类原球茎遗传转化体系的构建 | 第62-65页 |
3.4.1 不同因素对大薯类原球茎遗传转化的影响 | 第62-64页 |
3.4.2 gus组织染色检测 | 第64-65页 |
3.5 遗传转化体系的验证-sikSAD基因转化大薯的研究 | 第65-71页 |
3.5.1 卡那霉素对大薯类原球茎诱导的影响 | 第65-66页 |
3.5.2 卡那霉素对大薯类原球茎增殖分化的影响 | 第66-67页 |
3.5.3 农杆菌侵染后类原球茎的形态观察 | 第67-68页 |
3.5.4 PCR检测 | 第68页 |
3.5.5 半定量及定量PCR | 第68-71页 |
4 讨论 | 第71-76页 |
4.1 大薯种质资源遗传多样性AFLP分析 | 第71-72页 |
4.2 大薯类原球茎的离体诱导及再生体系的建立 | 第72-73页 |
4.3 大薯类原球茎的发育解剖学研究 | 第73-74页 |
4.4 大薯类原球茎遗传转化体系的构建 | 第74-75页 |
4.5 遗传转化体系的验证-sikSAD基因转化大薯的研究 | 第75-76页 |
5 结论 | 第76-77页 |
6 创新点 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-94页 |
缩略词表 | 第94-95页 |
附录 | 第95-96页 |
在读期间发表的主要论文 | 第96页 |
主持的研究课题 | 第96-97页 |
致谢 | 第97页 |