| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-37页 |
| 1 大熊猫 | 第16-26页 |
| 1.1 大熊猫简介 | 第16-23页 |
| 1.2 大熊猫的种群现况 | 第23-24页 |
| 1.3 大熊猫的社会价值 | 第24-25页 |
| 1.4 大熊猫研究及保护现况 | 第25-26页 |
| 2 乳汁 | 第26-28页 |
| 2.1 母乳的生物学作用 | 第26页 |
| 2.2 母乳的分类 | 第26-27页 |
| 2.3 母乳生成的机制 | 第27-28页 |
| 2.4 大熊猫母乳的研究现状 | 第28页 |
| 3 microRNA研究进展 | 第28-33页 |
| 3.1 microRNA简介 | 第28-29页 |
| 3.2 microRNA的生物合成机制 | 第29-30页 |
| 3.3 microRNA的作用机制 | 第30-31页 |
| 3.4 microRNA的研究方法 | 第31-32页 |
| 3.5 动植物miRNA的区别 | 第32-33页 |
| 4 实时荧光定量PCR(RT-PCR) | 第33-36页 |
| 4.1 技术原理 | 第33-34页 |
| 4.2 方法分类 | 第34-35页 |
| 4.3 miRNA荧光定量PCR | 第35-36页 |
| 5 乳汁中的microRNA研究 | 第36-37页 |
| 第二章 本研究选题背景与目的 | 第37-39页 |
| 1 选题背景 | 第37页 |
| 2 主要研究内容 | 第37-38页 |
| 3 研究的目的 | 第38-39页 |
| 第三章 材料与方法 | 第39-55页 |
| 1 实验动物和乳汁收集 | 第39页 |
| 1.1 实验用大熊猫选择 | 第39页 |
| 1.2 大熊猫乳汁的收集 | 第39页 |
| 2 试验时间与地点 | 第39页 |
| 3 主要仪器和试剂 | 第39-40页 |
| 3.1 主要仪器 | 第39-40页 |
| 3.2 主要试剂 | 第40页 |
| 4 乳汁中高质量RNA的制备 | 第40-43页 |
| 4.1 RNA的提取操作 | 第40-41页 |
| 4.2 RNA量检测 | 第41-43页 |
| 5 小RNA测序文库构建及测序 | 第43-44页 |
| 6 测序数据的生物信息学分析 | 第44-46页 |
| 6.1 测序数据过滤 | 第44-46页 |
| 6.2 文库测序数据的标准化(归一) | 第46页 |
| 7 荧光定量验证 | 第46-52页 |
| 7.1 高通量测序数据的可靠性验证 | 第46-49页 |
| 7.2 乳汁中植物源性miRNA的验证 | 第49-50页 |
| 7.3 乳汁中miRNA稳定性验证 | 第50-52页 |
| 8 表达模式(STEM)分析 | 第52页 |
| 9 靶基因功能和通路富集分析 | 第52-53页 |
| 9.1 靶基因功能富集分析 | 第52-53页 |
| 9.2 靶基因通路(Pathway)富集分析 | 第53页 |
| 10 参考数据库与分析软件 | 第53-55页 |
| 第四章 结果与分析 | 第55-94页 |
| 1 总RNA质检以及small RNA测序文库构建质检结果 | 第55-56页 |
| 1.1 总RNA甲醛变性琼脂糖凝胶检测结果 | 第55页 |
| 1.2 总RNA浓度检测结果 | 第55-56页 |
| 1.3 总RNA毛细管电泳检测结果 | 第56页 |
| 2 测序数据概述以及特征 | 第56-65页 |
| 2.1 测序数据过滤 | 第56-59页 |
| 2.2 小RNA序列的长度分布 | 第59页 |
| 2.3 首次鉴定的miRNA统计 | 第59-60页 |
| 2.4 鉴定所得miRNA的保守性分析 | 第60-61页 |
| 2.5 大熊猫乳汁中miRNA表达量特征 | 第61-62页 |
| 2.6 不同泌乳期miRNAome表达模式特征 | 第62-63页 |
| 2.7 乳汁中外源性miRNA的发现 | 第63-65页 |
| 3 大熊猫乳汁中高度表达的microRNA | 第65-81页 |
| 4 miRNA的表达模式分析 | 第81-87页 |
| 5 大熊猫不同泌乳阶段特异性表达的miRNA | 第87-88页 |
| 6 高通量测序数据的验证 | 第88-89页 |
| 7 乳汁中植物源性miRNA验证 | 第89-92页 |
| 7.1 植物源miRNA的耐高碘酸钠氧化验证 | 第89-90页 |
| 7.2 乳汁中植物源性miRNA的验证 | 第90页 |
| 7.3 乳汁中植物源性miRNA的浓度检测 | 第90-92页 |
| 8 乳汁中miRNA稳定性分析 | 第92-94页 |
| 第五章 讨论 | 第94-104页 |
| 1 miRNA分析方法的选择 | 第94-95页 |
| 1.1 高通量测序技术具有独特的优势 | 第94-95页 |
| 1.2 生物学重复合并建库在经费有限的情况仍有科研价值 | 第95页 |
| 2 乳汁中高表达的miRNAs促进乳汁分泌和婴儿的早期发育 | 第95-96页 |
| 3 阶段特异性表达的miRNA展现出功能适应性 | 第96-97页 |
| 4 大熊猫乳汁中真实地存在植物源性的miRNA | 第97-98页 |
| 4.1 存在的真实性 | 第97-98页 |
| 4.2 植物源性miRNA的浓度 | 第98页 |
| 5 乳汁中miRNA具有很好的稳定性 | 第98-100页 |
| 6 乳汁中miRNA的筛选及其功能验证 | 第100-101页 |
| 7 食物来源miRNA介导的跨物种研究 | 第101-104页 |
| 第六章 结论与创新点 | 第104-106页 |
| 1 结论 | 第104页 |
| 2 论文创新点 | 第104-106页 |
| 参考文献 | 第106-113页 |
| 致谢 | 第113-114页 |
| 附录 | 第114-126页 |
| 博士在读期间发表论文及科研成果 | 第126-128页 |
