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香蕉枯萎病拮抗菌的筛选及防病生物有机肥的研制

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1. 前言第12-18页
    1.1 香蕉枯萎病的发生与危害第12页
    1.2 香蕉枯萎病病原菌及其治病机理第12-14页
    1.3 香蕉枯萎病的防治办法第14-17页
        1.3.1 抗病品种选育第14-15页
        1.3.2 耕作方式第15页
        1.3.3 生物防治第15-17页
            1.3.3.1 真菌用于生物防治的研究第15-16页
            1.3.3.2 细菌用于生物防治的研究第16-17页
    1.4 本研究的目的及意义第17-18页
2. 实验材料与方法第18-28页
    2.1 香蕉枯萎病拮抗细菌的分离筛选与鉴定第18-20页
        2.1.1 土壤样品的采集第18页
        2.1.2 拮抗菌的分离与纯化第18页
        2.1.3 拮抗菌的筛选及保存第18-19页
            2.1.3.1 拮抗菌的初步筛选第18-19页
            2.1.3.2 拮抗菌的复筛第19页
        2.1.4 拮抗菌的鉴定第19-20页
            2.1.4.1 生理生化指标的测定第19页
            2.1.4.2 16S rRNA序列分析第19-20页
    2.2 拮抗菌发酵液、挥发性代谢产物抑菌能力的测定及脂肽类物质的提取分析第20-21页
        2.2.1 拮抗菌发酵液对病原菌的抑制作用测定第20页
        2.2.2 拮抗菌发酵液对病原菌孢子萌发的影响第20页
        2.2.3 拮抗菌挥发性代谢产物对病原菌菌丝生长的抑制能力测定第20页
        2.2.4 脂肽类物质的提取、保存与分析第20-21页
            2.2.4.1 脂肽类物质的提取与保存第20-21页
            2.2.4.2 脂肽类物质的测定与分析第21页
    2.3 对香蕉枯萎病具有防控作用的生物有机肥的研制第21-24页
        2.3.1 香蕉枯萎病防控有机肥的初步研制第21-22页
            2.3.1.1 实验材料第21-22页
            2.3.1.2 实验设计第22页
            2.3.1.3 试验样品的采集与测定第22页
        2.3.2 生物有机肥配方的研究第22-24页
            2.3.2.1 实验材料第22-23页
            2.3.2.2 物料配方比例的研究第23-24页
            2.3.2.3 配方有机肥盆栽实验设计第24页
            2.3.2.4 拮抗菌的计数方法第24页
    2.4 生物有机肥的盆栽防治效果以及对香蕉根际土微生物多样性的影响第24-28页
        2.4.1 实验材料第24-25页
            2.4.1.1 土壤样品第24-25页
            2.4.1.2 主要实验药品及试剂第25页
            2.4.1.3 引物第25页
        2.4.2 相对防效的测定第25页
        2.4.3 根际土中微生物数量的测定第25-26页
        2.4.4 PCR-DGGE分析土壤中真菌多样性第26-28页
            2.4.4.1 土壤总DNA的提取及PCR反应第26页
            2.4.4.2 变形梯度凝胶电泳(DGGE)分析第26-27页
            2.4.4.3 回收聚变性梯度凝胶电泳中的DNA及PCR扩增第27页
            2.4.4.4 感受态细胞(E.coli DH5 α)的制备第27页
            2.4.4.5 PCR回收产物与载体连接以及连接产物的转化第27-28页
            2.4.4.6 阳性克隆子的筛选以及测序第28页
3 实验结果与分析第28-52页
    3.1 香蕉枯萎病拮抗菌的分离、筛选与鉴定第28-32页
        3.1.1 香蕉枯萎病拮抗菌的分离与筛选第28-30页
        3.1.2 拮抗细菌的鉴定结果第30-32页
    3.2 拮抗菌发酵液、挥发性代谢产物抑菌能力测定及脂肽类物质的分析结果第32-37页
        3.2.1 拮抗菌发酵液对香蕉枯萎病病原菌的抑制效果第32-34页
            3.2.1.1 拮抗菌发酵液对病原菌生长的抑制作用第32-33页
            3.2.1.2 拮抗菌发酵液对病原菌孢子萌发的影响第33-34页
        3.2.2 拮抗菌挥发性代谢产物对病原菌菌丝生长的抑制作用第34页
        3.2.3 拮抗菌脂肽类物质的分析第34-37页
    3.3 WJA,WJ5,WJ22,WJ25二次发酵有机肥对香蕉生长的影响第37-41页
        3.3.1 不同有机肥对香蕉长势的作用第37-38页
        3.3.2 不同有机肥处理对植株酶活的影响第38-41页
            3.3.2.1 不同有机肥处理对香蕉超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响第39-40页
            3.3.2.2 不同有机肥处理对香蕉过氧化氢酶(CAT)活性的影响第40-41页
            3.3.2.3 不同有机肥处理对香蕉过氧化物酶(POD)活性的影响第41页
    3.4 拮抗菌WJ22配方有机肥的研究第41-47页
        3.4.1 菜籽饼加入量对WJ22固体发酵有机肥的影响第41-42页
        3.4.2 木薯渣加入量对拮抗菌WJ22固体发酵有机肥的影响第42-44页
        3.4.3 按树皮加入量对WJ22固体发酵有机肥的影响第44页
        3.4.4 正交实验结果分析第44-45页
        3.4.5 不同配方肥料盆栽试验结果分析第45-47页
            3.4.5.1 盆栽试验香蕉长势统计第45-47页
            3.4.5.2 盆栽试验不同配方肥的养分含量比较第47页
    3.5 拮抗菌WJA,WJ5,WJ22,WJ25二次发酵生物有机肥对香蕉枯萎病以及土壤微生物多样性的影响第47-52页
        3.5.1 拮抗菌二次发酵有机肥盆栽香蕉发病率统计第47-48页
        3.5.2 拮抗菌二次发酵有机肥处理香蕉根际土壤微生物数量的变化第48-49页
        3.5.3 拮抗菌二次发酵有机肥处理香蕉根际真菌多样性分析第49-52页
            3.5.3.1 土壤总DNA的提取及真菌18SrDNA的PCR扩增结果第49-50页
            3.5.3.2 真菌18SrDNA的DGGE分析结果第50-51页
            3.5.3.3 测序结果分析第51-52页
4 讨论第52-56页
    4.1 拮抗菌的筛选与鉴定第52-53页
    4.2 拮抗菌发酵液、挥发性代谢产物对病原菌生长的抑制能力以及脂肽类物质的分析第53-54页
    4.3 香蕉枯萎病防控有机肥的研制第54-55页
    4.4 不同有机肥处理植株发病率以及对根际土微生物多样性的影响第55-56页
5 结论第56-57页
6 展望第57-58页
参考文献第58-66页
附录第66-73页
    附录一:培养基配方第66页
    附录二:拮抗菌16Sr DNA序列第66-70页
    附录三:真菌18S rDNA序列第70-73页
致谢第73页

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