摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1. 前言 | 第12-18页 |
1.1 香蕉枯萎病的发生与危害 | 第12页 |
1.2 香蕉枯萎病病原菌及其治病机理 | 第12-14页 |
1.3 香蕉枯萎病的防治办法 | 第14-17页 |
1.3.1 抗病品种选育 | 第14-15页 |
1.3.2 耕作方式 | 第15页 |
1.3.3 生物防治 | 第15-17页 |
1.3.3.1 真菌用于生物防治的研究 | 第15-16页 |
1.3.3.2 细菌用于生物防治的研究 | 第16-17页 |
1.4 本研究的目的及意义 | 第17-18页 |
2. 实验材料与方法 | 第18-28页 |
2.1 香蕉枯萎病拮抗细菌的分离筛选与鉴定 | 第18-20页 |
2.1.1 土壤样品的采集 | 第18页 |
2.1.2 拮抗菌的分离与纯化 | 第18页 |
2.1.3 拮抗菌的筛选及保存 | 第18-19页 |
2.1.3.1 拮抗菌的初步筛选 | 第18-19页 |
2.1.3.2 拮抗菌的复筛 | 第19页 |
2.1.4 拮抗菌的鉴定 | 第19-20页 |
2.1.4.1 生理生化指标的测定 | 第19页 |
2.1.4.2 16S rRNA序列分析 | 第19-20页 |
2.2 拮抗菌发酵液、挥发性代谢产物抑菌能力的测定及脂肽类物质的提取分析 | 第20-21页 |
2.2.1 拮抗菌发酵液对病原菌的抑制作用测定 | 第20页 |
2.2.2 拮抗菌发酵液对病原菌孢子萌发的影响 | 第20页 |
2.2.3 拮抗菌挥发性代谢产物对病原菌菌丝生长的抑制能力测定 | 第20页 |
2.2.4 脂肽类物质的提取、保存与分析 | 第20-21页 |
2.2.4.1 脂肽类物质的提取与保存 | 第20-21页 |
2.2.4.2 脂肽类物质的测定与分析 | 第21页 |
2.3 对香蕉枯萎病具有防控作用的生物有机肥的研制 | 第21-24页 |
2.3.1 香蕉枯萎病防控有机肥的初步研制 | 第21-22页 |
2.3.1.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.3.1.2 实验设计 | 第22页 |
2.3.1.3 试验样品的采集与测定 | 第22页 |
2.3.2 生物有机肥配方的研究 | 第22-24页 |
2.3.2.1 实验材料 | 第22-23页 |
2.3.2.2 物料配方比例的研究 | 第23-24页 |
2.3.2.3 配方有机肥盆栽实验设计 | 第24页 |
2.3.2.4 拮抗菌的计数方法 | 第24页 |
2.4 生物有机肥的盆栽防治效果以及对香蕉根际土微生物多样性的影响 | 第24-28页 |
2.4.1 实验材料 | 第24-25页 |
2.4.1.1 土壤样品 | 第24-25页 |
2.4.1.2 主要实验药品及试剂 | 第25页 |
2.4.1.3 引物 | 第25页 |
2.4.2 相对防效的测定 | 第25页 |
2.4.3 根际土中微生物数量的测定 | 第25-26页 |
2.4.4 PCR-DGGE分析土壤中真菌多样性 | 第26-28页 |
2.4.4.1 土壤总DNA的提取及PCR反应 | 第26页 |
2.4.4.2 变形梯度凝胶电泳(DGGE)分析 | 第26-27页 |
2.4.4.3 回收聚变性梯度凝胶电泳中的DNA及PCR扩增 | 第27页 |
2.4.4.4 感受态细胞(E.coli DH5 α)的制备 | 第27页 |
2.4.4.5 PCR回收产物与载体连接以及连接产物的转化 | 第27-28页 |
2.4.4.6 阳性克隆子的筛选以及测序 | 第28页 |
3 实验结果与分析 | 第28-52页 |
3.1 香蕉枯萎病拮抗菌的分离、筛选与鉴定 | 第28-32页 |
3.1.1 香蕉枯萎病拮抗菌的分离与筛选 | 第28-30页 |
3.1.2 拮抗细菌的鉴定结果 | 第30-32页 |
3.2 拮抗菌发酵液、挥发性代谢产物抑菌能力测定及脂肽类物质的分析结果 | 第32-37页 |
3.2.1 拮抗菌发酵液对香蕉枯萎病病原菌的抑制效果 | 第32-34页 |
3.2.1.1 拮抗菌发酵液对病原菌生长的抑制作用 | 第32-33页 |
3.2.1.2 拮抗菌发酵液对病原菌孢子萌发的影响 | 第33-34页 |
3.2.2 拮抗菌挥发性代谢产物对病原菌菌丝生长的抑制作用 | 第34页 |
3.2.3 拮抗菌脂肽类物质的分析 | 第34-37页 |
3.3 WJA,WJ5,WJ22,WJ25二次发酵有机肥对香蕉生长的影响 | 第37-41页 |
3.3.1 不同有机肥对香蕉长势的作用 | 第37-38页 |
3.3.2 不同有机肥处理对植株酶活的影响 | 第38-41页 |
3.3.2.1 不同有机肥处理对香蕉超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响 | 第39-40页 |
3.3.2.2 不同有机肥处理对香蕉过氧化氢酶(CAT)活性的影响 | 第40-41页 |
3.3.2.3 不同有机肥处理对香蕉过氧化物酶(POD)活性的影响 | 第41页 |
3.4 拮抗菌WJ22配方有机肥的研究 | 第41-47页 |
3.4.1 菜籽饼加入量对WJ22固体发酵有机肥的影响 | 第41-42页 |
3.4.2 木薯渣加入量对拮抗菌WJ22固体发酵有机肥的影响 | 第42-44页 |
3.4.3 按树皮加入量对WJ22固体发酵有机肥的影响 | 第44页 |
3.4.4 正交实验结果分析 | 第44-45页 |
3.4.5 不同配方肥料盆栽试验结果分析 | 第45-47页 |
3.4.5.1 盆栽试验香蕉长势统计 | 第45-47页 |
3.4.5.2 盆栽试验不同配方肥的养分含量比较 | 第47页 |
3.5 拮抗菌WJA,WJ5,WJ22,WJ25二次发酵生物有机肥对香蕉枯萎病以及土壤微生物多样性的影响 | 第47-52页 |
3.5.1 拮抗菌二次发酵有机肥盆栽香蕉发病率统计 | 第47-48页 |
3.5.2 拮抗菌二次发酵有机肥处理香蕉根际土壤微生物数量的变化 | 第48-49页 |
3.5.3 拮抗菌二次发酵有机肥处理香蕉根际真菌多样性分析 | 第49-52页 |
3.5.3.1 土壤总DNA的提取及真菌18SrDNA的PCR扩增结果 | 第49-50页 |
3.5.3.2 真菌18SrDNA的DGGE分析结果 | 第50-51页 |
3.5.3.3 测序结果分析 | 第51-52页 |
4 讨论 | 第52-56页 |
4.1 拮抗菌的筛选与鉴定 | 第52-53页 |
4.2 拮抗菌发酵液、挥发性代谢产物对病原菌生长的抑制能力以及脂肽类物质的分析 | 第53-54页 |
4.3 香蕉枯萎病防控有机肥的研制 | 第54-55页 |
4.4 不同有机肥处理植株发病率以及对根际土微生物多样性的影响 | 第55-56页 |
5 结论 | 第56-57页 |
6 展望 | 第57-58页 |
参考文献 | 第58-66页 |
附录 | 第66-73页 |
附录一:培养基配方 | 第66页 |
附录二:拮抗菌16Sr DNA序列 | 第66-70页 |
附录三:真菌18S rDNA序列 | 第70-73页 |
致谢 | 第73页 |