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PPC基因缺陷菌株发酵生产L-苯丙氨酸的工艺研究

学位论文数据集第3-4页
摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 绪论第14-26页
    1.1 L-苯丙氨酸理化性质及商业用途第14-15页
    1.2 市场需求及生产方式第15-17页
    1.3 代谢工程法生产L-苯内氨酸第17-18页
        1.3.1 菌种的选择第17页
        1.3.2 大肠杆菌生物合成途径第17-18页
    1.4 提高L-苯丙氨酸产量的调控策略第18-22页
        1.4.1 解除阻遏蛋白抑制作用第18-19页
        1.4.2 提高反应前体E4P和PEP的供给第19-21页
        1.4.3 高产L-Phe生产菌株的构建第21页
        1.4.4 工业发酵过程的参数调控第21-22页
    1.5 本论文立题依据第22-23页
    1.6 本论文研究内容及目的意义第23-26页
第二章 L-苯丙氨酸生产菌株发酵工艺的初步探索第26-38页
    2.1 引言第26页
    2.2 实验材料与设备仪器第26-27页
        2.2.1 所用菌株及携带质粒第26页
        2.2.2 试剂和仪器第26-27页
    2.3 实验方法第27-28页
        2.3.1 培养基第27-28页
        2.3.2 培养方法第28页
    2.4 分析方法第28-29页
        2.4.1 细胞生物量及干重的测定第28页
        2.4.2 高效液相色谱HPLC法测定葡萄糖第28-29页
        2.4.3 高效液相色谱HPLC法测定L-Phe和L-Tyr第29页
    2.5 结果与讨论第29-37页
        2.5.1 诱导温度对菌体生长及L-Phe合成的影响第29-32页
        2.5.2 酪氨酸对菌株生长及L-Phe合成的作用第32-33页
        2.5.3 L-酪氨酸与葡萄糖表观的率系数的探究第33-35页
        2.5.4 高密度发酵生产L-苯丙氨酸第35-37页
    2.6 本章小结第37-38页
第三章 磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因敲除菌株(ppc-菌株)生长条件的探索第38-56页
    3.1 引言第38页
    3.2 材料与仪器第38-39页
        3.2.1 菌株及质粒第38-39页
        3.2.2 试剂和仪器第39页
    3.3 实验方法第39页
    3.4 分析方法第39页
    3.5 结果与讨论第39-53页
        3.5.1 ppc敲除菌生长性能的探索第39-41页
        3.5.2 L-谷氨酸(L-Gln)对ppc-生长代谢的影响第41-45页
        3.5.3 L-天冬氨酸(L-Asp)对ppc-生长代谢的影响第45-47页
        3.5.4 L-Gln与L-Asp协同效应对ppc-生长代谢的影响第47-48页
        3.5.5 柠檬酸对ppc-生长代谢的影响第48-50页
        3.5.6 添加L-Gln培养ppc-菌株与非缺陷菌株生长性能对照第50-52页
        3.5.7 谷氨酸钠(味精)对ppc-生长代谢的影响第52-53页
    3.6 本章小结第53-56页
第四章 ppc-菌株发酵生产L-苯丙氨酸的优化与控制第56-70页
    4.1 引言第56页
    4.2 材料与仪器第56-57页
        4.2.1 菌株及质粒第56页
        4.2.2 试剂和仪器第56-57页
    4.3 实验方法第57页
    4.4 分析方法第57页
    4.5 结果与讨论第57-69页
        4.5.1 探究发酵液中残糖浓度对PPc-菌株生长及L-Phe产量的影响第57-59页
        4.5.2 菌体生物量对发酵生产L-Phe产量的影响第59-62页
        4.5.3 不同生长策略对L-Phe合成影响的探究第62-64页
        4.5.4 ppc缺陷菌株培养策略及发酵产L-Phe性能的探究第64-69页
    4.6 本章小结第69-70页
第五章 ppc-菌株发酵副产物的生成及对L-Phe生产性能的影响第70-80页
    5.1 引言第70页
    5.2 材料与仪器第70-71页
        5.2.1 菌株及质粒第70-71页
        5.2.2 试剂和仪器第71页
    5.3 实验方法第71页
    5.4 分析方法第71-72页
    5.5 结果与讨论第72-78页
        5.5.1 探究pykA,pykF双基因对菌株生长特性的影响第72-75页
        5.5.2 溶氧参数的调节对乙酸生成的影响第75-76页
        5.5.3 发酵液中有机副产物的检测第76-78页
    5.6 本章小结第78-80页
第六章 结论与展望第80-82页
参考文献第82-86页
致谢第86-88页
研究成果及发表的学术论文第88-90页
作者及导师简介第90-91页
附件第91-92页

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