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量子点标记的呼吸道合胞病毒活细胞内动态输运途径示踪分析

基金资助第3-4页
目录第4-8页
摘要第8-11页
Abstract第11-13页
第1章 论文选题依据及研究内容第14-28页
    1.1 论文选题依据第14-26页
        1.1.1 研究意义第14-15页
        1.1.2 研究现状第15-26页
            1.1.2.1 病毒侵染宿主细胞的主要机制第15-17页
            1.1.2.2 荧光标记病毒成像在研究病毒侵染途径方面的应用第17-21页
            1.1.2.3 量子点在生物成像领域的应用第21-26页
    1.2 研究目标、研究内容、以及拟解决的关键科学问题第26-27页
        1.2.1 研究目标第26页
        1.2.2 研究内容第26页
        1.2.3 拟解决的关键科学问题第26-27页
    1.3 技术路线第27-28页
第2章 组氨酸标签原位修饰病毒的量子点标记第28-38页
    2.1 前言第28页
    2.2 实验部分第28-31页
        2.2.1 实验仪器第28-29页
        2.2.2 NTA-Ni修饰量子点第29页
        2.2.3 HEp-2细胞复苏和传代培养第29-30页
        2.2.4 RSV的扩增第30页
        2.2.5 原位多肽标记病毒第30-31页
        2.2.6 标记病毒免疫荧光分析第31页
        2.2.7 病毒滴度分析第31页
    2.3 结果与讨论第31-36页
        2.3.1 NTA-Ni修饰量子点的表征第31-33页
        2.3.2 His6修饰HEp-2细胞成像第33页
        2.3.3 His6标记RSV成像第33-34页
        2.3.4 His6标记病毒与病毒免疫荧光共定位分析第34-35页
        2.3.5 His6和量子点标记对病毒感染力的影响第35-36页
    2.4 小结第36-38页
第3章 利用量子点及核酸染料的病毒原位双色标记第38-54页
    3.1 前言第38-39页
    3.2 实验部分第39-42页
        3.2.1 实验仪器第39-40页
        3.2.2 HEp-2细胞培养第40页
        3.2.3 RSV的扩增第40页
        3.2.4 标记病毒的制备第40页
        3.2.5 双标病毒细胞成像第40-41页
        3.2.6 病毒滴度分析第41页
        3.2.7 标记病毒免疫荧光分析第41页
        3.2.8 一步生长曲线测定第41-42页
    3.3 结果与讨论第42-53页
        3.3.1 RSV扩增时间考察第42页
        3.3.2 细胞生物素化的表征第42-43页
        3.3.3 细胞生物素化对细胞和病毒增殖的影响第43-45页
        3.3.4 生物素标记病毒第45-46页
        3.3.5 生物素标记及QDs标记对病毒感染力的影响第46-49页
        3.3.6 单病毒示踪分析病毒侵染早期行为第49-50页
        3.3.7 原位双色标记病毒第50-51页
        3.3.8 双标病毒监测RSV核酸释放过程第51-53页
    3.4 小结第53-54页
第4章 基于病毒自组装过程的双量子点标记策略第54-64页
    4.1 前言第54-55页
    4.2 实验部分第55-57页
        4.2.1 实验仪器第55-56页
        4.2.2 HEp-2细胞培养第56页
        4.2.3 RSV的扩增第56页
        4.2.4 基因探针QDs-MB的制备第56页
        4.2.5 病毒基因组的量子点标记第56页
        4.2.6 双色量子点标记病毒制备第56-57页
        4.2.7 病毒滴度分析第57页
        4.2.8 活细胞实时成像监测病毒侵染动态第57页
    4.3 结果与讨论第57-63页
        4.3.1 基因探针构建与表征第57-59页
        4.3.2 基因探针对病毒核酸的标记与表征第59-60页
        4.3.3 基因探针标记病毒用于病毒核酸侵染行为成像第60-62页
        4.3.4 双量子点标记病毒的制备及感染力测定第62-63页
    4.4 小结第63-64页
第5章 实时示踪量子点标记的呼吸道合胞病毒在活细胞内的动态输运途径第64-74页
    5.1 前言第64-65页
    5.2 实验部分第65-66页
        5.2.1 实验仪器第65页
        5.2.2 HEp-2细胞培养第65页
        5.2.3 RSV的扩增第65页
        5.2.4 原位标记病毒的制备第65页
        5.2.5 活细胞实时成像监测病毒侵染动态第65-66页
        5.2.6 药物抑制实验第66页
    5.3 结果与讨论第66-73页
        5.3.1 病毒侵染过程的长时间成像第66页
        5.3.2 RSV通过小窝蛋白/脂筏介导的内吞途径进入细胞第66-69页
        5.3.3 RSV侵染依赖于细胞骨架第69-71页
        5.3.4 单颗粒示踪技术用于RSV侵染行为研究第71页
        5.3.5 病毒在内质网积累第71-72页
        5.3.6 呼吸道合胞病毒侵染机理研究第72-73页
    5.4 小结第73-74页
第6章 全文总结与展望第74-78页
    6.1 全文总结第74-76页
        6.1.1 主要结论第74-75页
        6.1.2 主要创新点第75-76页
    6.2 前景展望第76-78页
        6.2.1 优良的无机纳米荧光材料的开发第76页
        6.2.2 纳米级分辨率光学成像技术的开发及应用第76页
        6.2.3 病毒的活体成像示踪第76-78页
参考文献第78-94页
科研成果第94-96页
致谢第96页

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