基金资助 | 第3-4页 |
目录 | 第4-8页 |
摘要 | 第8-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第1章 论文选题依据及研究内容 | 第14-28页 |
1.1 论文选题依据 | 第14-26页 |
1.1.1 研究意义 | 第14-15页 |
1.1.2 研究现状 | 第15-26页 |
1.1.2.1 病毒侵染宿主细胞的主要机制 | 第15-17页 |
1.1.2.2 荧光标记病毒成像在研究病毒侵染途径方面的应用 | 第17-21页 |
1.1.2.3 量子点在生物成像领域的应用 | 第21-26页 |
1.2 研究目标、研究内容、以及拟解决的关键科学问题 | 第26-27页 |
1.2.1 研究目标 | 第26页 |
1.2.2 研究内容 | 第26页 |
1.2.3 拟解决的关键科学问题 | 第26-27页 |
1.3 技术路线 | 第27-28页 |
第2章 组氨酸标签原位修饰病毒的量子点标记 | 第28-38页 |
2.1 前言 | 第28页 |
2.2 实验部分 | 第28-31页 |
2.2.1 实验仪器 | 第28-29页 |
2.2.2 NTA-Ni修饰量子点 | 第29页 |
2.2.3 HEp-2细胞复苏和传代培养 | 第29-30页 |
2.2.4 RSV的扩增 | 第30页 |
2.2.5 原位多肽标记病毒 | 第30-31页 |
2.2.6 标记病毒免疫荧光分析 | 第31页 |
2.2.7 病毒滴度分析 | 第31页 |
2.3 结果与讨论 | 第31-36页 |
2.3.1 NTA-Ni修饰量子点的表征 | 第31-33页 |
2.3.2 His6修饰HEp-2细胞成像 | 第33页 |
2.3.3 His6标记RSV成像 | 第33-34页 |
2.3.4 His6标记病毒与病毒免疫荧光共定位分析 | 第34-35页 |
2.3.5 His6和量子点标记对病毒感染力的影响 | 第35-36页 |
2.4 小结 | 第36-38页 |
第3章 利用量子点及核酸染料的病毒原位双色标记 | 第38-54页 |
3.1 前言 | 第38-39页 |
3.2 实验部分 | 第39-42页 |
3.2.1 实验仪器 | 第39-40页 |
3.2.2 HEp-2细胞培养 | 第40页 |
3.2.3 RSV的扩增 | 第40页 |
3.2.4 标记病毒的制备 | 第40页 |
3.2.5 双标病毒细胞成像 | 第40-41页 |
3.2.6 病毒滴度分析 | 第41页 |
3.2.7 标记病毒免疫荧光分析 | 第41页 |
3.2.8 一步生长曲线测定 | 第41-42页 |
3.3 结果与讨论 | 第42-53页 |
3.3.1 RSV扩增时间考察 | 第42页 |
3.3.2 细胞生物素化的表征 | 第42-43页 |
3.3.3 细胞生物素化对细胞和病毒增殖的影响 | 第43-45页 |
3.3.4 生物素标记病毒 | 第45-46页 |
3.3.5 生物素标记及QDs标记对病毒感染力的影响 | 第46-49页 |
3.3.6 单病毒示踪分析病毒侵染早期行为 | 第49-50页 |
3.3.7 原位双色标记病毒 | 第50-51页 |
3.3.8 双标病毒监测RSV核酸释放过程 | 第51-53页 |
3.4 小结 | 第53-54页 |
第4章 基于病毒自组装过程的双量子点标记策略 | 第54-64页 |
4.1 前言 | 第54-55页 |
4.2 实验部分 | 第55-57页 |
4.2.1 实验仪器 | 第55-56页 |
4.2.2 HEp-2细胞培养 | 第56页 |
4.2.3 RSV的扩增 | 第56页 |
4.2.4 基因探针QDs-MB的制备 | 第56页 |
4.2.5 病毒基因组的量子点标记 | 第56页 |
4.2.6 双色量子点标记病毒制备 | 第56-57页 |
4.2.7 病毒滴度分析 | 第57页 |
4.2.8 活细胞实时成像监测病毒侵染动态 | 第57页 |
4.3 结果与讨论 | 第57-63页 |
4.3.1 基因探针构建与表征 | 第57-59页 |
4.3.2 基因探针对病毒核酸的标记与表征 | 第59-60页 |
4.3.3 基因探针标记病毒用于病毒核酸侵染行为成像 | 第60-62页 |
4.3.4 双量子点标记病毒的制备及感染力测定 | 第62-63页 |
4.4 小结 | 第63-64页 |
第5章 实时示踪量子点标记的呼吸道合胞病毒在活细胞内的动态输运途径 | 第64-74页 |
5.1 前言 | 第64-65页 |
5.2 实验部分 | 第65-66页 |
5.2.1 实验仪器 | 第65页 |
5.2.2 HEp-2细胞培养 | 第65页 |
5.2.3 RSV的扩增 | 第65页 |
5.2.4 原位标记病毒的制备 | 第65页 |
5.2.5 活细胞实时成像监测病毒侵染动态 | 第65-66页 |
5.2.6 药物抑制实验 | 第66页 |
5.3 结果与讨论 | 第66-73页 |
5.3.1 病毒侵染过程的长时间成像 | 第66页 |
5.3.2 RSV通过小窝蛋白/脂筏介导的内吞途径进入细胞 | 第66-69页 |
5.3.3 RSV侵染依赖于细胞骨架 | 第69-71页 |
5.3.4 单颗粒示踪技术用于RSV侵染行为研究 | 第71页 |
5.3.5 病毒在内质网积累 | 第71-72页 |
5.3.6 呼吸道合胞病毒侵染机理研究 | 第72-73页 |
5.4 小结 | 第73-74页 |
第6章 全文总结与展望 | 第74-78页 |
6.1 全文总结 | 第74-76页 |
6.1.1 主要结论 | 第74-75页 |
6.1.2 主要创新点 | 第75-76页 |
6.2 前景展望 | 第76-78页 |
6.2.1 优良的无机纳米荧光材料的开发 | 第76页 |
6.2.2 纳米级分辨率光学成像技术的开发及应用 | 第76页 |
6.2.3 病毒的活体成像示踪 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-94页 |
科研成果 | 第94-96页 |
致谢 | 第96页 |