| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略语 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-16页 |
| 研究现状、成果 | 第13-15页 |
| 研究目的、方法 | 第15-16页 |
| 一、氧化应激状下ARPE-19外泌体制备 | 第16-28页 |
| 1.1 对象和方法 | 第16-22页 |
| 1.1.1 对象 | 第16-18页 |
| 1.1.1.1 细胞来源 | 第16页 |
| 1.1.1.2 主要仪器 | 第16页 |
| 1.1.1.3 主要试剂 | 第16-17页 |
| 1.1.1.4 主要试剂的配置 | 第17-18页 |
| 1.1.2 方法 | 第18-22页 |
| 1.1.2.1 正常ARPE-19细胞的培养 | 第18-19页 |
| 1.1.2.1.1 细胞复苏 | 第18页 |
| 1.1.2.1.2 细胞培养及传代 | 第18页 |
| 1.1.2.1.3 细胞冻存 | 第18-19页 |
| 1.1.2.2 正常ARPE-19细胞外泌体的分离提取 | 第19页 |
| 1.1.2.2.1 超速差速离心法 | 第19页 |
| 1.1.2.2.2 Exosome提取试剂盒(SBI) | 第19页 |
| 1.1.2.2.3 Exclusion qEV法 | 第19页 |
| 1.1.2.3 外泌体的鉴定 | 第19-21页 |
| 1.1.2.3.1 透射电镜观察外泌体形态 | 第19-20页 |
| 1.1.2.3.2 Western blot法检测外泌体表面特异标志蛋白CD63 | 第20-21页 |
| 1.1.2.4 鱼藤酮诱导ARPE-19细胞氧化应激损伤 | 第21-22页 |
| 1.1.3 统计学分析 | 第22页 |
| 1.2 结果 | 第22-24页 |
| 1.2.1 正常ARPE-19细胞形态 | 第22页 |
| 1.2.2 正常ARPE-19细胞外泌体形态特征及鉴定结果 | 第22-23页 |
| 1.2.3 不同浓度鱼藤酮对ARPE-19细胞增殖的影响 | 第23-24页 |
| 1.3 讨论 | 第24-27页 |
| 1.3.1 外泌体的生物学特征 | 第24-26页 |
| 1.3.2 视网膜色素上皮细胞与氧化应激 | 第26-27页 |
| 1.4 小结 | 第27-28页 |
| 二、氧化应激下ARPE-19细胞外泌体对其Akt、VEGF-A影响 | 第28-41页 |
| 2.1 对象和方法 | 第28-32页 |
| 2.1.1 对象 | 第28-29页 |
| 2.1.1.1 材料 | 第28页 |
| 2.1.1.2 主要仪器 | 第28页 |
| 2.1.1.3 主要试剂 | 第28-29页 |
| 2.1.1.4 主要试剂的配置 | 第29页 |
| 2.1.2 方法 | 第29-32页 |
| 2.1.2.1 氧化应激下ARPE-19细胞外泌体的制备 | 第29页 |
| 2.1.2.2 BCA法检测外泌体浓度 | 第29-30页 |
| 2.1.2.3 外泌体与ARPE-19细胞共培养 | 第30页 |
| 2.1.2.4 MTT法检测细胞增殖活力 | 第30页 |
| 2.1.2.5 免疫荧光染色检测Akt与VEGF-A的表达 | 第30页 |
| 2.1.2.6 Western blot法检测Akt与VEGF-A的表达 | 第30页 |
| 2.1.2.7 RT-PCR检测Akt与VEGF-A的表达 | 第30-32页 |
| 2.1.3 统计学分析 | 第32页 |
| 2.2 结果 | 第32-36页 |
| 2.2.1 外泌体共培养后ARPE-19细胞形态 | 第32-33页 |
| 2.2.2 MTT检测细胞增殖能力 | 第33页 |
| 2.2.3 细胞免疫荧光检测ARPE-19细胞中Akt及VEGF-A的表达 | 第33-35页 |
| 2.2.4 western blot检测外泌体对Akt、VEGF-A蛋白表达的影响 | 第35页 |
| 2.2.5 RT-PCR检测ARPE-19细胞中Akt与VEGF-A的表达 | 第35-36页 |
| 2.3 讨论 | 第36-40页 |
| 2.3.1 AMD与氧化应激 | 第36-37页 |
| 2.3.2 AKT与VEGF-A的生物学特性 | 第37-39页 |
| 2.3.3 外泌体的免疫调节作用 | 第39-40页 |
| 2.4 小结 | 第40-41页 |
| 全文结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-49页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第49-50页 |
| 综述 外泌体在年龄相关性黄斑变性发病机制中的研究进展 | 第50-58页 |
| 综述参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简历 | 第59页 |
