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狂犬病病毒诱导人和鼠神经母细胞瘤细胞自噬的研究

摘要第3-5页
ABSTRACT第5-7页
本论文常用英文缩写词第8-14页
第一章 前言第14-32页
    1.1 研究背景第14-32页
        1.1.1 狂犬病病毒第14-19页
        1.1.2 细胞自噬第19-27页
        1.1.3 细胞凋亡第27-30页
        1.1.4 研究目的及意义第30页
        1.1.5 研究技术与路线第30-32页
第二章 狂犬病病毒感染诱导SK和NA细胞自噬第32-63页
    2.1 引言第32-33页
    2.2 材料第33-36页
        2.2.1 质粒第33页
        2.2.2 病毒第33页
        2.2.3 酶、抗体及其他相关试剂第33页
        2.2.4 细菌及其培养相关试剂第33-34页
        2.2.5 细胞及其培养相关试剂第34页
        2.2.6 蛋白电泳相关试剂第34-35页
        2.2.7 主要仪器及耗材第35-36页
    2.3 方法第36-42页
        2.3.1 GD-SH-01 和HEP-Flury生长曲线的测定第36-37页
        2.3.2 自噬体的电子显微镜观察第37页
        2.3.3 激光共聚焦观察自噬体变化第37-39页
        2.3.4 免疫印迹检测自噬流相关蛋白第39-42页
    2.4 结果与分析第42-59页
        2.4.1 GD-SH-01 和HEP-Flury的生长曲线第42-44页
        2.4.2 RABV感染SK和NA细胞后自噬体的超微结构第44-47页
        2.4.3 RABV感染诱导SK和NA细胞自噬囊泡形成第47-51页
        2.4.4 RABV感染SK和NA细胞后自噬相关蛋白的变化第51-53页
        2.4.5 GD-SH-01 诱导SK细胞自噬流增强,而在NA细胞自噬流减弱第53-57页
        2.4.6 GD-SH-01 在SK细胞中自噬通路的检测第57-59页
    2.5 讨论第59-61页
        2.5.1 细胞的选择第59页
        2.5.2 野毒株诱导细胞自噬而弱毒不诱导细胞自噬第59-60页
        2.5.3 野毒株在两种神经母细胞瘤细胞内产生不同的自噬流趋势第60-61页
        2.5.4 自噬通路第61页
    2.6 小结第61-63页
第三章 狂犬病病毒诱导的细胞自噬与凋亡的关系第63-79页
    3.1 引言第63页
    3.2 材料第63-64页
        3.2.1 细胞及其培养相关试剂第63页
        3.2.2 流式检测相关试剂、耗材及仪器第63-64页
        3.2.3 自噬检测相关试剂、耗材及仪器第64页
        3.2.4 其他仪器与耗材第64页
    3.3 方法第64-67页
        3.3.1 狂犬病病毒诱导细胞凋亡的检测第64-65页
        3.3.2 狂犬病病毒诱导细胞的线粒体膜电位检测第65-66页
        3.3.3 Rapamycin药物浓度的摸索第66页
        3.3.4 自噬增强组与无药物组狂犬病病毒诱导凋亡率检测第66-67页
        3.3.5 自噬增强组与无药物组狂犬病病毒滴度检测第67页
    3.4 结果与分析第67-76页
        3.4.1 狂犬病病毒诱导细胞凋亡第67-71页
        3.4.2 狂犬病病毒诱导细胞的膜电位变化第71-72页
        3.4.3 自噬增强组与无药物组狂犬病病毒诱导的凋亡率差异第72-75页
        3.4.4 自噬增强组与无药物组狂犬病病毒滴度第75-76页
    3.5 讨论第76-78页
        3.5.1 野毒株狂犬病病毒诱导较明显的凋亡第76-77页
        3.5.2 自噬和凋亡的关系第77-78页
    3.6 小结第78-79页
第四章 GD-SH-01 M基因对自噬的影响第79-103页
    4.1 引言第79页
    4.2 材料第79-81页
        4.2.1 质粒第79-80页
        4.2.2 病毒及抗体第80页
        4.2.3 核酸纯化相关试剂第80页
        4.2.4 酶及其他相关试剂第80-81页
        4.2.5 细菌及其培养相关试剂第81页
        4.2.6 细胞及其培养相关试剂第81页
        4.2.7 要仪器及耗材第81页
    4.3 方法第81-90页
        4.3.1 重组狂犬病与亲本Hep-Flury和GD-SH-01 毒滴度的滴定第81页
        4.3.2 重组狂犬病病毒自噬检测第81-82页
        4.3.3 表达GD-SH-01 的N,P,M,G蛋白与m RFP蛋白偶联质粒的构建第82-88页
        4.3.4 狂犬病病毒细胞毒性的检测第88页
        4.3.5 狂犬病病毒g RNA和各结构蛋白m RNA水平的检测第88-90页
    4.4 结果与分析第90-100页
        4.4.1 重组狂犬病与亲本Hep-Flury和GD-SH-01 毒滴度的滴定第90-92页
        4.4.2 蛋白印迹检测重组狂犬病病毒自噬情况第92页
        4.4.3 GD-SH-01 的M基因促进狂犬病病毒诱导细胞凋亡第92-94页
        4.4.4 单个GD-SH-01 的结构蛋白与自噬的关系第94-98页
        4.4.5 狂犬病病毒基因复制和转录能力与自噬的关系第98-100页
    4.5 讨论第100-102页
        4.5.1 单个狂犬病病毒蛋白不能诱导自噬第100-101页
        4.5.2 狂犬病病毒M基因对自噬有促进作用第101-102页
    4.6 小结第102-103页
第五章 全文总结第103-105页
    5.1 总结第103-104页
    5.2 创新点第104页
    5.3 下步计划第104-105页
参考文献第105-123页
附录第123页

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