致谢 | 第7-9页 |
摘要 | 第9-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
主要缩略词 | 第12-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-39页 |
1.1 核酸连接酶的研究进展 | 第15-27页 |
1.1.1 核酸连接酶催化反应的分子机理的研究 | 第15-18页 |
1.1.2 DNA连接酶的研究进展 | 第18-23页 |
1.1.3 RNA连接酶的研究进展 | 第23-27页 |
1.2 耐辐射球菌的研究进展 | 第27-39页 |
1.2.1 细胞形态特征与结构 | 第28-29页 |
1.2.2 基因组结构 | 第29-31页 |
1.2.3 耐辐射球菌的DNA损伤抗性 | 第31-32页 |
1.2.4 耐辐射球菌的抗性保护机制 | 第32-35页 |
1.2.5 耐辐射球菌的DNA修复机制 | 第35-39页 |
第二章 耐辐射球菌RNA连接酶的生物信息学分析 | 第39-44页 |
2.1 引言 | 第39页 |
2.2 材料和方法 | 第39-40页 |
2.2.1 材料 | 第39-40页 |
2.2.2 方法 | 第40页 |
2.3 结果 | 第40-42页 |
2.3.1 RNA连接酶基因位置,核酸序列,氨基酸序列及motif在线分析 | 第40-41页 |
2.3.2 DR2339生物进化树分析 | 第41-42页 |
2.4 讨论 | 第42-44页 |
第三章 耐辐射球菌RNA连接突变株的构建和特性分析 | 第44-66页 |
3.1 实验材料 | 第44-45页 |
3.1.1 实验菌种和试剂 | 第44-45页 |
3.1.2 仪器与设备 | 第45页 |
3.2 实验方法 | 第45-55页 |
3.2.1 菌株培养 | 第45页 |
3.2.2 基因缺失突变株的构建 | 第45-46页 |
3.2.3 DR2339基因的克隆 | 第46-47页 |
3.2.4 DR2339补偿质粒的构建以及转化 | 第47页 |
3.2.5 生长曲线测定 | 第47页 |
3.2.6 耐辐射球菌突变株和野生型辐射抗性表型实验 | 第47-48页 |
3.2.7 过氧化氢酶活性染色实验 | 第48页 |
3.2.8 超氧化物歧化酶活性染色实验 | 第48-49页 |
3.2.9 氮蓝四唑(NBT)法测量超氧化物岐化酶(SOD)活性 | 第49-50页 |
3.2.10 ABTS法测量细胞总抗氧化活性 | 第50-52页 |
3.2.11 耐辐射球菌RNA的抽提、逆转录和实时定量PCR | 第52-53页 |
3.2.12 DR2339蛋白的体外表达 | 第53-55页 |
3.3 实验结果与分析 | 第55-66页 |
3.3.1 基因缺失突变株的鉴定 | 第55-56页 |
3.3.2 突变株△DR2339和野生型R1菌株相比生长明显延缓 | 第56页 |
3.3.3 菌株抗逆性处理结果表明突变株ADR2339对各种逆境都更为敏感 | 第56-59页 |
3.3.4 突变菌株抗氧化能力的活性分析 | 第59-62页 |
3.3.5 DR2339基因的缺失对D.radiodurans体内部分基因转录水平的影响 | 第62-64页 |
3.3.6 DR2339表达纯化结果分析 | 第64-66页 |
第四章 总结和展望 | 第66-68页 |
参考文献 | 第68-74页 |
硕士期间已发表论文 | 第74页 |