中文摘要 | 第5-13页 |
ABSTRACT | 第13-22页 |
缩略语表 | 第25-27页 |
绪论 | 第27-31页 |
第一部分 柠檬酸合成酶对卵巢癌细胞增殖、侵袭、迁移和化疗敏感性的作用研究 | 第31-71页 |
1.材料与方法 | 第31-51页 |
1.1 组织标本和细胞株 | 第31-32页 |
1.2 实验常用试剂 | 第32-33页 |
1.3 主要试剂配制 | 第33-35页 |
1.4 主要仪器 | 第35-36页 |
1.5 细胞培养 | 第36-38页 |
1.6 Real-time PCR | 第38-41页 |
1.7 免疫蛋白印迹检测 | 第41-44页 |
1.8 细胞转染 | 第44页 |
1.9 酶活性检测 | 第44-45页 |
1.10 细胞内ATP检测 | 第45-47页 |
1.11 细胞增殖实验 | 第47页 |
1.12 细胞侵袭实验 | 第47-48页 |
1.13 细胞迁移实验 | 第48-49页 |
1.14 细胞毒性实验 | 第49页 |
1.15 细胞克隆形成实验 | 第49-50页 |
1.16 基因芯片检测 | 第50-51页 |
1.17 统计学分析 | 第51页 |
2.结果 | 第51-67页 |
2.1 柠檬酸合成酶在卵巢肿瘤组织和细胞中的表达 | 第51-53页 |
2.2 干扰SKOV3、A2780中柠檬酸合成酶表达对酶活性和ATP的影响 | 第53-55页 |
2.3 柠檬酸合成酶基因沉默影响AMPK/P38 MAPK信号通路 | 第55-57页 |
2.4 柠檬酸合成酶基因沉默降低SKOV3和A2780细胞株增殖活性, | 第57-58页 |
2.5 柠檬酸合成酶基因沉默促进SKOV3和A2780细胞凋亡 | 第58-60页 |
2.6 柠檬酸合成酶基因沉默抑制SKOV3和A2780细胞株侵袭和迁移能力 | 第60-62页 |
2.7 柠檬酸合成酶基因沉默提高卵巢癌细胞株对顺铂的化疗敏感性 | 第62-64页 |
2.8 柠檬酸合成酶基因沉默增加卵巢癌细胞DNA损伤水平 | 第64-65页 |
2.9 柠檬酸合成酶基因沉默降低卵巢癌细胞株耐药相关基因m RNA水平,提高凋亡相关基因m RNA水平 | 第65-67页 |
3.讨论 | 第67-70页 |
4.结论 | 第70-71页 |
第二部分 琥珀酸脱氢酶B亚基对卵巢癌细胞增殖、侵袭、迁移和化疗敏感性的作用研究 | 第71-107页 |
第一节 琥珀酸脱氢酶B亚基对卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移的作用研究 | 第72-98页 |
1.材料与方法 | 第72-82页 |
2.结果 | 第82-95页 |
3.讨论 | 第95-97页 |
4.结论 | 第97-98页 |
第二节 琥珀酸脱氢酶B亚基对卵巢癌化疗敏感性的作用研究 | 第98-107页 |
1.材料与方法 | 第98-100页 |
2.结果 | 第100-105页 |
3.讨论 | 第105-106页 |
4.结论 | 第106-107页 |
第三部分 柠檬酸合成酶和琥珀酸脱氢酶B亚基对卵巢癌细胞线粒体DNA相对拷贝数的作用研究 | 第107-127页 |
1.材料与方法 | 第109-116页 |
1.1 组织标本和细胞株 | 第109-110页 |
1.2 实验常用试剂 | 第110页 |
1.3 主要仪器 | 第110页 |
1.4 细胞培养 | 第110-112页 |
1.5 组织标本总DNA提取 | 第112-113页 |
1.6 细胞总DNA提取 | 第113页 |
1.7 细胞转染 | 第113-114页 |
1.8 Real-time PCR | 第114-116页 |
1.9 免疫蛋白印迹 | 第116页 |
1.10 统计学分析 | 第116页 |
2.结果 | 第116-124页 |
2.1 人卵巢肿瘤组织中线粒体DNA相对拷贝数和线粒体转录因子TFAM的表达 | 第116-117页 |
2.2 人卵巢肿瘤组织中CS和SDHB的表达 | 第117-118页 |
2.3 分别基因沉默卵巢癌细胞株SKOV3和A2780中CS和SDHB,检测两者对mt ND2/HBB水平的影响 | 第118-120页 |
2.4 分别基因沉默CS和SDHB,检测对TFAM水平的影响 | 第120-121页 |
2.5 CS基因沉默对ERK/P38通路的影响 | 第121-122页 |
2.6 SDHB基因沉默对ERK/P38通路的影响 | 第122页 |
2.7 CS和SDHB水平对PGC1α m RNA水平的影响 | 第122-124页 |
3.讨论 | 第124-125页 |
4.结论 | 第125-127页 |
课题总结 | 第127-128页 |
参考文献 | 第128-136页 |
致谢 | 第136-138页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第138-139页 |