| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 缩略语表 | 第12-13页 |
| 1 前言 | 第13-25页 |
| 1.1 地黄概述 | 第13-14页 |
| 1.1.1 地黄的药用和保健作用 | 第13页 |
| 1.1.2 地黄化学成分研究 | 第13-14页 |
| 1.2 毛蕊花糖苷概述 | 第14-20页 |
| 1.2.1 毛蕊花糖苷的药理作用 | 第15-18页 |
| 1.2.2 毛蕊花糖苷生物合成途径研究 | 第18-20页 |
| 1.2.3 毛蕊花糖苷生物合成相关酶基因研究 | 第20页 |
| 1.3 转录组及其在药用植物研究中的应用 | 第20-23页 |
| 1.3.1 转录组测序及其研究进展 | 第20-21页 |
| 1.3.2 转录组测序在药用植物方面的应用 | 第21-22页 |
| 1.3.3 转录组测序在地黄研究中的应用 | 第22-23页 |
| 1.4 本课题研究目的及意义 | 第23-25页 |
| 2 材料与方法 | 第25-37页 |
| 2.1 材料 | 第25-27页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第25页 |
| 2.1.2 菌株和载体 | 第25页 |
| 2.1.3 引物 | 第25页 |
| 2.1.4 实验仪器设备 | 第25页 |
| 2.1.5 实验试剂及药品 | 第25-26页 |
| 2.1.6 主要试剂配方 | 第26-27页 |
| 2.2 转录组测序方法 | 第27-28页 |
| 2.2.1 RNA的提取和质检 | 第27页 |
| 2.2.2 转录组文库的构建、质检 | 第27-28页 |
| 2.2.3 测序数据分析 | 第28页 |
| 2.3 毛蕊花糖苷生物合成途径的建立 | 第28-29页 |
| 2.4 候选基因RT-PCR及同源比对分析 | 第29-30页 |
| 2.5 候选基因荧光定量PCR | 第30-33页 |
| 2.5.1 总RNA的提取与检测 | 第30页 |
| 2.5.2 cDNA的合成 | 第30-31页 |
| 2.5.3 荧光定量PCR内参基因的选择 | 第31-32页 |
| 2.5.4 荧光定量PCR反应 | 第32-33页 |
| 2.6 毛蕊花糖苷生物合成途径关键酶RgC4H的克隆和表达载体构建 | 第33-37页 |
| 2.6.1 RgC4H基因克隆及蛋白分析 | 第33-35页 |
| 2.6.2 RgC4H基因植物表达载体的构建 | 第35-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-65页 |
| 3.1 转录组测序 | 第37-44页 |
| 3.1.1 RNA的提取和质检 | 第37页 |
| 3.1.2 转录组文库的构建、质检 | 第37-38页 |
| 3.1.3 原始数据的统计 | 第38-39页 |
| 3.1.4 转录本的组装 | 第39-40页 |
| 3.1.5 基因功能的注释及分类 | 第40-44页 |
| 3.2 毛蕊花糖苷生物合成途径的建立 | 第44-48页 |
| 3.3 毛蕊花糖苷生物合成候选关键酶基因的挖掘 | 第48-49页 |
| 3.4 毛蕊花糖苷生物合成候选关键酶基因的验证 | 第49-55页 |
| 3.4.1 毛蕊花糖苷生物合成候选关键酶基因的RT-PCR | 第49页 |
| 3.4.2 毛蕊花糖苷生物合成候选关键酶基因的序列分析 | 第49-55页 |
| 3.5 毛花糖苷生物合成候选关键酶基因的鉴定 | 第55-65页 |
| 3.5.1 总RNA的提取与检测 | 第55-56页 |
| 3.5.2 毛花糖苷生物合成候选关键酶基因的空间特异性表达 | 第56页 |
| 3.5.3 毛花糖苷生物合成候选关键酶基因的时间和基因型特异性表达 | 第56-58页 |
| 3.5.4 毛花糖苷生物合成途径RgC4H基因的克隆和表达载体构建 | 第58-65页 |
| 4 讨论 | 第65-71页 |
| 4.1 转录组测序及功能注释结果评价 | 第65-66页 |
| 4.2 毛蕊花糖苷生物合成途径构建及相关酶基因的发掘与验证 | 第66-67页 |
| 4.3 毛蕊花糖苷生物合成途径中关键酶基因的鉴定 | 第67-71页 |
| 5 结论 | 第71-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第81-82页 |
