摘要 | 第7-11页 |
Abstract | 第11-15页 |
缩略词 | 第16-17页 |
第一章 绪论 | 第17-34页 |
1.1 纤维素的结构与性质 | 第17页 |
1.2 纤维素降解微生物 | 第17-19页 |
1.2.1 纤维素降解细菌 | 第18页 |
1.2.2 纤维素降解古菌 | 第18页 |
1.2.3 纤维素降解真菌 | 第18-19页 |
1.3 里氏木霉纤维素酶诱导表达 | 第19-22页 |
1.3.1 里氏木霉纤维素酶系组成 | 第19-20页 |
1.3.2 里氏木霉纤维素酶的表达调控 | 第20-22页 |
1.4 真核生物碳源感应受体蛋白分类 | 第22-28页 |
1.4.1 转运蛋白介导的碳源感应 | 第23-24页 |
1.4.2 无转运活性的类转运蛋白介导的碳源感应 | 第24-25页 |
1.4.3 G-蛋白偶联受体介导的碳源感应 | 第25-26页 |
1.4.4 碳源感受器之间的关系 | 第26-28页 |
1.5 碳源感应在里氏木霉纤维素酶诱导过程中的作用 | 第28-32页 |
1.5.1 纤维素酶诱导型碳源 | 第28-29页 |
1.5.2 纤维素酶诱导假说 | 第29页 |
1.5.3 参与纤维素酶表达的碳源感应系统的研究 | 第29-32页 |
1.6 立题依据及研究内容 | 第32-34页 |
第二章 里氏木霉纤维二糖和乳糖转运蛋白的筛选 | 第34-52页 |
2.1 材料和方法 | 第35-41页 |
2.1.1 菌种和质粒 | 第35页 |
2.1.2 引物 | 第35-37页 |
2.1.3 培养基和培养条件 | 第37页 |
2.1.4 菌种保藏 | 第37-38页 |
2.1.5 实验步骤 | 第38-41页 |
2.2 结果与讨论 | 第41-50页 |
2.2.1 纤维二糖/乳糖转运蛋白筛选系统受体菌的构建 | 第41-43页 |
2.2.2 纤维二糖/乳糖转运蛋白筛选系统阳性对照菌株构建 | 第43-44页 |
2.2.3 候选转运蛋白纤维二糖/乳糖转运活性测定 | 第44-48页 |
2.2.4 Tr_47710生物信息学分析 | 第48-50页 |
2.3 本章小结 | 第50-52页 |
第三章 里氏木霉糖转运蛋白Stp1基因缺失菌性质测定及机理探究 | 第52-98页 |
3.1 材料和方法 | 第52-66页 |
3.1.1 菌种和质粒 | 第52页 |
3.1.2 本章引物 | 第52-54页 |
3.1.3 培养基和培养条件 | 第54页 |
3.1.4 实验步骤 | 第54-66页 |
3.2 结果与讨论 | 第66-95页 |
3.2.1 里氏木霉糖转运蛋白编码基因stp1敲除质粒的构建 | 第66-67页 |
3.2.2 糖转运蛋白基因stp1的敲除 | 第67-69页 |
3.2.3 糖转运蛋白Stp1基因缺失菌生长测定 | 第69-70页 |
3.2.4 △stp1菌株纤维素酶活及Cbh Ⅰ表达测定 | 第70-72页 |
3.2.5 △stp1菌株纤维素酶相关编码基因转录检测 | 第72-73页 |
3.2.6 Stp1缺失对纤维二糖诱导纤维素酶的影响 | 第73-75页 |
3.2.7 Stp1缺失对纤维二糖代谢和转运的影响 | 第75-78页 |
3.2.8 Bgl1对△stp1菌株响应纤维二糖的影响 | 第78-82页 |
3.2.9 Bgl1对△stp1菌株纤维素降解的影响 | 第82-84页 |
3.2.10 Stp1对纤维素酶诱导过程中葡萄糖阻遏的影响 | 第84-86页 |
3.2.11 与Stp1相互作用蛋白的筛选 | 第86-95页 |
3.3 本章小结 | 第95-98页 |
第四章 里氏木霉Stp1缺失突变株表达谱分析 | 第98-112页 |
4.1 材料和方法 | 第98-101页 |
4.1.1 菌种 | 第98-99页 |
4.1.2 本章引物 | 第99页 |
4.1.3 培养基和培养条件 | 第99页 |
4.1.4 实验方法 | 第99-100页 |
4.1.5 基因表达水平研究 | 第100-101页 |
4.2 结果与讨论 | 第101-110页 |
4.2.1 送测RNA样品的纯度和浓度检测结果 | 第101-102页 |
4.2.2 表达谱测序质量分析 | 第102-103页 |
4.2.3 差异表达基因统计 | 第103-108页 |
4.2.4 Tr_3405转录上调验证 | 第108-109页 |
4.2.5 Tr_3405生物信息学分析 | 第109-110页 |
4.3 本章小结 | 第110-112页 |
第五章 Tr_3405的基因敲除及其对纤维素酶表达的影响 | 第112-136页 |
5.1 材料和方法 | 第112-116页 |
5.1.1 菌种和质粒 | 第112-113页 |
5.1.2 本章引物 | 第113-114页 |
5.1.3 培养基及培养条件 | 第114页 |
5.1.4 实验方法 | 第114-116页 |
5.2 结果与讨论 | 第116-133页 |
5.2.1 里氏木霉中Tr_3405的过表达 | 第116-118页 |
5.2.2 Tr_3405在里氏木霉中的敲除 | 第118-120页 |
5.2.3 Tr_3405缺失突变株表型测定 | 第120-127页 |
5.2.4 △crt1菌株中Xyr1的表达分析 | 第127-128页 |
5.2.5 Crt1相互作用蛋白pull-down钓取 | 第128-133页 |
5.3 纤维素酶诱导表达过程中碳源感应模型 | 第133-135页 |
5.4 本章小结 | 第135-136页 |
第六章 一种新型纤维素酶诱导碳源—葡萄糖酸内酯 | 第136-147页 |
6.1 材料和方法 | 第136-138页 |
6.1.1 菌种 | 第136-137页 |
6.1.2 引物 | 第137页 |
6.1.3 培养基和培养条件 | 第137-138页 |
6.1.4 实验方法 | 第138页 |
6.2 结果和讨论 | 第138-145页 |
6.2.1 葡萄糖酸内酯能够诱导里氏木霉纤维素酶表达 | 第138-139页 |
6.2.2 葡萄糖酸内酯可以作为碳源供里氏木霉生长 | 第139-140页 |
6.2.3 葡萄糖酸内酯诱导纤维素酶表达需要Xyr1和Crt1的存在 | 第140-142页 |
6.2.4 Cel1a在葡萄糖酸内酯诱导纤维素酶表达过程起到至关重要的作用 | 第142-143页 |
6.2.5 葡萄糖酸内酯诱导纤维素酶表达受糖转运蛋白Stp1影响 | 第143-145页 |
6.2.6 葡萄糖酸内醋诱导纤维素酶表达模型 | 第145页 |
6.3 本章小结 | 第145-147页 |
全文总结及展望 | 第147-149页 |
参考文献 | 第149-160页 |
致谢 | 第160-161页 |
攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第161-162页 |
附件 | 第162-181页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第181页 |