摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-19页 |
1.1 引言 | 第11-12页 |
1.2 NADPH氧化酶结构 | 第12页 |
1.3 植物NADPH氧化酶研究进展 | 第12-17页 |
1.3.1 植物NADPH氧化酶的功能 | 第13-16页 |
1.3.2 植物NADPH氧化酶蛋白活性的调节机制 | 第16-17页 |
1.4 本研究的目的及立题依据 | 第17页 |
1.5 研究内容 | 第17-19页 |
1.5.1 丹参RBOH基因的克隆与生物信息学分析 | 第17页 |
1.5.2 丹参RBOH基因组织表达及诱导表达 | 第17-18页 |
1.5.3 丹参RbohE基因的过表达载体和沉默载体构建 | 第18页 |
1.5.4 丹参RbohE基因的转基因植株构建 | 第18-19页 |
第二章 丹参SmRbohE基因的克隆与NOX家族基因生物信息学分析 | 第19-30页 |
2.1 引言 | 第19页 |
2.2 丹参SmRbohE基因的克隆 | 第19-21页 |
2.2.1 引物设计 | 第19-20页 |
2.2.2 丹参悬浮细胞RNA提取 | 第20页 |
2.2.3 总RNA反转录 | 第20-21页 |
2.2.4 丹参SmRbohE 3'RACE | 第21页 |
2.2.5 丹参SmRbohE基因扩增 | 第21页 |
2.3 丹参NOX家族基因生物信息学分析 | 第21-22页 |
2.3.1 丹参SmRboh基因的筛选 | 第21页 |
2.3.2 丹参RBOH蛋白信号肽预测 | 第21页 |
2.3.3 丹参RBOH蛋白螺旋卷曲的预测 | 第21-22页 |
2.3.4 预测丹参中RBOH蛋白二级结构 | 第22页 |
2.3.5 预测丹参中Rboh蛋白三级结构 | 第22页 |
2.3.6 丹参中Rboh家族基因系统发育关系 | 第22页 |
2.4 结果与分析 | 第22-27页 |
2.4.1 丹参RbohE基因全长的获得 | 第22-23页 |
2.4.2 丹参NOX基因筛选 | 第23-24页 |
2.4.3 丹参RBOH蛋白信号肽预测 | 第24-25页 |
2.4.4 丹参RBOH蛋白螺旋卷曲的预测 | 第25页 |
2.4.5 丹参中RBOH蛋白二级结构 | 第25-26页 |
2.4.6 丹参中RBOH蛋白三级结构 | 第26-27页 |
2.4.7 丹参中NOX家族系统发育关系 | 第27页 |
2.5 讨论 | 第27-29页 |
2.6 小结 | 第29-30页 |
第三章 丹参NOX基因组织表达及诱导表达 | 第30-37页 |
3.1 引言 | 第30页 |
3.2 材料与方法 | 第30-32页 |
3.2.1 设计引物 | 第31页 |
3.2.2 材料处理及模板制备 | 第31页 |
3.2.3 实时定量反应体系构建 | 第31-32页 |
3.3 结果与分析 | 第32-35页 |
3.3.1 丹参Rboh基因的组织表达分析 | 第32-33页 |
3.3.2 丹参RbohE基因的诱导表达分析 | 第33-35页 |
3.4 讨论 | 第35-36页 |
3.5 小结 | 第36-37页 |
第四章 丹参RbohE基因的过表达和沉默载体构建及植株转化 | 第37-50页 |
4.1 引言 | 第37页 |
4.2 材料与方法 | 第37-43页 |
4.2.1 材料 | 第37页 |
4.2.2 SmRboh基因过表达载体构建 | 第37-40页 |
4.2.3 RbohE基因沉默载体构建 | 第40-42页 |
4.2.4 农杆菌感受态的制备及转化 | 第42-43页 |
4.2.5 丹参RbohE基因的转基因植株构建 | 第43页 |
4.3 结果与分析 | 第43-47页 |
4.3.1 植物过表达载体的构建 | 第43-44页 |
4.3.2 植物RNAi载体的构建 | 第44-45页 |
4.3.3 重组质粒转化农杆菌 | 第45-46页 |
4.3.4 构建丹参SmRbohE基因的过表达植株 | 第46页 |
4.3.5 构建丹参SmRbohE基因的沉默植株 | 第46-47页 |
4.4 讨论 | 第47页 |
4.5 小结 | 第47-50页 |
参考文献 | 第50-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简介 | 第56页 |