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家蚕microRNA Novel-31*对家蚕溶血素基因的表达的调控

英文缩写说明第5-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第1章 绪论第16-26页
    1.1 miRNA的研究第16-21页
        1.1.1 miRNA的发现第16页
        1.1.2 miRNA的产生过程第16-17页
        1.1.3 miRNA的作用机制第17-18页
        1.1.4 miRNA的检测手段第18-19页
        1.1.5 miRNA的生物学功能第19-20页
        1.1.6 miRNA与RNAi第20-21页
    1.2 miRNA与家蚕第21-23页
        1.2.1 家蚕miRNA研究进展第21-22页
        1.2.2 家蚕病毒miRNA研究进展第22-23页
    1.3 miRNA与昆虫免疫第23页
    1.4 本课题研究目的及意义第23-24页
    1.5 本课题主要研究内容与研究方法第24-26页
        1.5.1 主要研究内容第24-25页
        1.5.2 实验技术路线第25-26页
第2章 Novel-31*及溶血素基因在家蚕血淋巴及中肠组织表达的定量分析第26-36页
    2.1 引言第26页
    2.2 实验材料与试剂第26-28页
        2.2.1 主要实验材料及试剂第26页
        2.2.2 主要实验仪器及设备第26-27页
        2.2.3 主要试剂的配置第27-28页
        2.2.4 常用生物信息学软件第28页
    2.3 实验方法第28-31页
        2.3.1 生物信息学预测靶基因第28页
        2.3.2 病原接种第28页
        2.3.3 组织收集第28-29页
        2.3.4 总RNA及Small RNA提取第29页
        2.3.5 反转录反应第29-30页
        2.3.6 实时荧光定量PCR检测Novel-31*及溶血素基因表达变化第30-31页
    2.4 结果与分析第31-33页
        2.4.1 Novel-31*二级结构及靶基因预测第31-32页
        2.4.2 家蚕感染BmCPV后血淋巴及中肠Novel-31*表达变化第32页
        2.4.3 家蚕感染BmCPV后血淋巴及中肠溶血素基因表达变化第32-33页
    2.5 本章讨论第33-36页
第3章 Novel-31*对家蚕溶血素基因的表达调控第36-48页
    3.1 引言第36页
    3.2 实验材料与试剂第36-38页
        3.2.1 主要实验材料与试剂第36页
        3.2.2 主要实验仪器与设备第36页
        3.2.3 主要试剂的配置第36-38页
    3.3 实验方法第38-44页
        3.3.1 293T细胞培养第38-39页
        3.3.2 E.coli Top10感受态细胞制备第39页
        3.3.3 菌种保存(甘油菌)第39页
        3.3.4 慢病毒表达载体构建第39-42页
        3.3.5 Novel-31*对靶基因作用验证第42-43页
        3.3.6 总RNA提取第43-44页
        3.3.7 反转录反应第44页
        3.3.8 实时荧光定量PCR检测溶血素基因及GST标签基因表达变化第44页
    3.4 结果与分析第44-46页
        3.4.1 载体p LNHX-UTR-GST及pLKO.3G-miR-N31*的构建与细胞转染效率第44-45页
        3.4.2 Novel-31*对靶基因表达的调控效果第45-46页
    3.5 本章讨论第46-48页
第4章 Novel-31* mimics对家蚕溶血素基因的表达调控第48-56页
    4.1 引言第48页
    4.2 实验材料与试剂第48-49页
        4.2.1 主要实验材料与试剂第48页
        4.2.2 主要实验仪器与设备第48页
        4.2.3 主要试剂的配置第48-49页
    4.3 实验方法第49-51页
        4.3.1 家蚕BmN细胞培养第49-50页
        4.3.2 Novel-31* mimics转染Bm N细胞第50页
        4.3.3 Novel-31* mimics注射家蚕第50页
        4.3.4 组织收集第50-51页
        4.3.5 总RNA提取第51页
        4.3.6 反转录反应第51页
        4.3.7 实时荧光定量PCR检测溶血素基因表达变化第51页
    4.4 结果分析第51-53页
        4.4.1 Novel-31* mimics对家蚕Bm N细胞溶血素基因的调控效果第51-52页
        4.4.2 Novel-31* mimics对家蚕蚕血淋巴及中肠组织溶血素基因的调控效果第52-53页
    4.5 本章讨论第53-56页
结论第56-58页
参考文献第58-65页
攻读硕士学位期间发表的学位论文第65-66页
致谢第66页

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