摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
英文缩略表 | 第13-14页 |
第一章 引言 | 第14-24页 |
1.1 苏云金芽胞杆菌概述 | 第14页 |
1.2 芽胞的形成机制 | 第14-18页 |
1.2.1 第0和I阶段:轴丝的形成 | 第16页 |
1.2.2 第II阶段:不对称隔膜的形成 | 第16-17页 |
1.2.3 第III阶段:内吞 | 第17页 |
1.2.4 第IV–V阶段:皮层和胞衣的组装 | 第17-18页 |
1.2.5 第VI–VII阶段:芽胞的成熟和释放阶段 | 第18页 |
1.3 Bt芽胞和杀虫蛋白形成过程中的转录调控机制 | 第18-19页 |
1.4 芽胞杆菌中的Sigma(σ)因子 | 第19-23页 |
1.4.1 Sigma因子-σ~A | 第19-20页 |
1.4.2 Sigma因子-σ~H | 第20页 |
1.4.3 前芽胞中的Sigma因子-σ~F | 第20页 |
1.4.4 母细胞中的Sigma因子-σ~E | 第20-21页 |
1.4.5 前芽胞中的Sigma因子-σ~G | 第21页 |
1.4.6 母细胞中的Sigma因子-σ~K | 第21-23页 |
1.5 研究内容和目的意义 | 第23-24页 |
1.5.1 研究内容 | 第23页 |
1.5.2 目的意义 | 第23-24页 |
第二章 材料与方法 | 第24-34页 |
2.1 实验材料 | 第24-27页 |
2.1.1 质粒与菌株 | 第24页 |
2.1.2 常用培养基 | 第24-25页 |
2.1.3 常用抗生素 | 第25页 |
2.1.4 酶及其他生化试剂 | 第25页 |
2.1.5 常用溶液与缓冲液 | 第25-27页 |
2.2 仪器设备 | 第27页 |
2.3 实验方法 | 第27-34页 |
2.3.1 PCR模板的制备 | 第27页 |
2.3.2 苏云金芽胞杆菌基因组的提取 | 第27-28页 |
2.3.3 目的片段的扩增 | 第28-29页 |
2.3.4 酶切反应 | 第29页 |
2.3.5 目的片段与载体的连接 | 第29页 |
2.3.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第29-30页 |
2.3.7 大肠杆菌(E.coli)感受态细胞的制备 | 第30页 |
2.3.8 热激转化大肠杆菌(E.coli) | 第30页 |
2.3.9 质粒提取、DNA纯化 | 第30页 |
2.3.10 苏云金芽胞杆菌感受态细胞的制备 | 第30-31页 |
2.3.11 电击转化苏云金芽胞杆菌 | 第31页 |
2.3.12 序列的测定和分析 | 第31页 |
2.3.13 蛋白的表达和纯化 | 第31-32页 |
2.3.14 凝胶阻滞实验 | 第32页 |
2.3.15 β-半乳糖苷酶活性测定 | 第32-33页 |
2.3.16 苏云金芽胞杆菌总RNA的提取和纯化 | 第33页 |
2.3.17 RNA芯片分析 | 第33-34页 |
第三章 结果与分析 | 第34-62页 |
3.1 受SigmaK控制的基因的转录分析 | 第34-51页 |
3.1.1 RNA提取及纯化 | 第34-35页 |
3.1.2 DNA芯片分析 | 第35-51页 |
3.2 SigmaK蛋白的表达纯化 | 第51-53页 |
3.2.1 pET21b-sigK融合表达质粒的构建 | 第51-52页 |
3.2.2 SigmaK蛋白的表达 | 第52-53页 |
3.2.3 SigmaK蛋白的表达 | 第53页 |
3.3 Sigma K蛋白的结合活性 | 第53-62页 |
3.3.1 SigmaK因子对cry1Ac基因的控制 | 第53-54页 |
3.3.2 SigmaK对HD73_3496基因的控制作用 | 第54-55页 |
3.3.3 SigmaK对操纵子(HD73_2493、HD73_2494)的控制作用 | 第55-56页 |
3.3.4 SigmaK对HD73_3410基因的控制作用 | 第56-57页 |
3.3.5 SigmaK对HD73_3353基因的控制作用 | 第57-58页 |
3.3.6 SigmaK对exsB(HD73_2208)基因的控制作用 | 第58-59页 |
3.3.7 SigmaK对bclB(HD73_2664)基因的控制作用 | 第59-60页 |
3.3.8 SigmaK对HD73_3156基因的控制作用 | 第60-62页 |
第四章 讨论 | 第62-65页 |
4.1 枯草芽胞杆菌中Sigma K控制的基因谱 | 第62-63页 |
4.2 苏云金芽胞杆菌与枯草芽胞杆菌中Sigma K因子结构比较 | 第63页 |
4.3 苏云金芽胞杆菌中Sigma K因子控制基因的特点 | 第63页 |
4.4 T_7和T_10时期芯片数据比较 | 第63-64页 |
4.5 下一步展望 | 第64-65页 |
第五章 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
作者简历 | 第75页 |