| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 引言 | 第13-14页 |
| 第一章 综述 | 第14-26页 |
| 1 载体的发展 | 第15-18页 |
| 1.1 基因治疗的概念及发展 | 第15页 |
| 1.2 基因转移途径 | 第15页 |
| 1.3 基因载体 | 第15-18页 |
| 2 神经损伤及细胞治疗 | 第18-24页 |
| 2.1 神经系统损伤 | 第18-19页 |
| 2.2 细胞疗法 | 第19-24页 |
| 2.2.1 胚胎干细胞 | 第19-20页 |
| 2.2.2 神经干细胞 | 第20页 |
| 2.2.3 骨髓间充质干细胞 | 第20-21页 |
| 2.2.4 脐带血干细胞 | 第21页 |
| 2.2.5 脂肪干细胞 | 第21-22页 |
| 2.2.6 雪旺细胞 | 第22页 |
| 2.2.7 嗅鞘细胞 | 第22-23页 |
| 2.2.8 诱导多能干细胞 | 第23页 |
| 2.2.9 直接重编程细胞 | 第23-24页 |
| 3 展望 | 第24页 |
| 4 本课题的选题依据以及设计思路 | 第24-26页 |
| 4.1 选题依据 | 第24-25页 |
| 4.2 设计思路 | 第25-26页 |
| 第二章 阳离子化紫菜多糖的制备及表征 | 第26-31页 |
| 1 仪器与试剂 | 第26-27页 |
| 1.1 仪器 | 第26页 |
| 1.2 试剂 | 第26-27页 |
| 2 方法 | 第27-28页 |
| 2.1 阳离子化紫菜多糖的制备 | 第27页 |
| 2.1.1 氧化多糖的制备 | 第27页 |
| 2.1.2 阳离子化多糖的制备 | 第27页 |
| 2.2 阳离子化多糖的表征 | 第27-28页 |
| 2.2.1 红外光谱的测定 | 第27-28页 |
| 2.2.2 电位的测定 | 第28页 |
| 3 实验结果 | 第28-29页 |
| 3.1 红外光谱的测定 | 第28页 |
| 3.2 电位的测定 | 第28-29页 |
| 4 讨论 | 第29-30页 |
| 5 本章小结 | 第30-31页 |
| 第三章 乙二胺阳离子化的紫菜多糖作为基因载体的初步探究 | 第31-51页 |
| 1 仪器与试剂 | 第31-34页 |
| 1.1 仪器 | 第31-32页 |
| 1.2 试剂 | 第32-33页 |
| 1.3 主要溶液 | 第33-34页 |
| 2 方法 | 第34-41页 |
| 2.1 质粒DNA的制备 | 第34-36页 |
| 2.1.1 DH5α 感受态的制备 | 第34-35页 |
| 2.1.2 质粒DNA转化感受态大肠杆菌 | 第35页 |
| 2.1.3 转化克隆的筛选和鉴定 | 第35-36页 |
| 2.2 Ed-PYP/pDNA复合物的制备及琼脂糖凝胶电泳 | 第36-37页 |
| 2.3 Ed-PYP作为基因载体的初步探究 | 第37-41页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第37-38页 |
| 2.3.2 Ed-PYP/pDNA细胞毒性的测定 | 第38页 |
| 2.3.3 Ed-PYP细胞转染效果考察 | 第38-39页 |
| 2.3.4 Ed-PYP/pDNA复合物的体外转染效果 | 第39页 |
| 2.3.5 Ed-PYP/pDNA复合物的摄取及转运机理研究 | 第39-41页 |
| 3 实验结果 | 第41-48页 |
| 3.1 质粒DNA（Ascl1及EGFP）的制备 | 第41-42页 |
| 3.2 基因滞留实验结果 | 第42页 |
| 3.3 细胞毒性的结果 | 第42-43页 |
| 3.4 荧光法测定Ed-PYP/pDNA复合物的转染 | 第43-45页 |
| 3.5 ELISA法测定Ed-PYP/pDNA复合物的转染 | 第45页 |
| 3.6 Ed-PYP/pDNA复合物的摄取及转运机理研究 | 第45-48页 |
| 3.6.1 Ed-PYP/pDNA复合物穿膜机制 | 第45-47页 |
| 3.6.2 Ed-PYP/pDNA复合物胞内转运机制 | 第47-48页 |
| 4 讨论 | 第48-50页 |
| 5 本章小结 | 第50-51页 |
| 第四章 成纤维细胞的神经分化 | 第51-73页 |
| 1 仪器与试剂 | 第51-54页 |
| 1.1 仪器 | 第51-52页 |
| 1.2 试剂 | 第52-53页 |
| 1.3 主要溶液 | 第53-54页 |
| 2 方法 | 第54-58页 |
| 2.1 质粒DNA的制备 | 第54页 |
| 2.2 Ed-PYP/pDNA复合物的制备 | 第54-55页 |
| 2.3 Ed-PYP/pDNA复合物的表征 | 第55页 |
| 2.3.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第55页 |
| 2.3.2 电位及粒径测定 | 第55页 |
| 2.4 细胞培养 | 第55页 |
| 2.5 成纤维细胞向神经细胞直接重编程 | 第55-56页 |
| 2.6 神经细胞的鉴定 | 第56-58页 |
| 2.6.1 细胞形态学观察 | 第56页 |
| 2.6.2 ELISA试剂盒鉴定神经相关因子表达 | 第56页 |
| 2.6.3 免疫荧光鉴定（双染） | 第56-57页 |
| 2.6.4 蛋白免疫印迹（Western blotting, WB） | 第57-58页 |
| 3 实验结果 | 第58-70页 |
| 3.1 质粒DNA的鉴定 | 第58页 |
| 3.2 Ed-PYP/pDNA复合物的表征 | 第58-63页 |
| 3.2.1 琼脂糖凝胶电泳 | 第58-59页 |
| 3.2.2 Ed-PYP/pDNA复合物的形态及Zeta电位 | 第59-63页 |
| 3.3 诱导形态学变化 | 第63-64页 |
| 3.4 ELISA检测神经相关蛋白表达 | 第64-66页 |
| 3.5 免疫荧光鉴定 | 第66-67页 |
| 3.6 蛋白免疫印迹（Western blotting, WB） | 第67-70页 |
| 4 讨论 | 第70-72页 |
| 5 本章小结 | 第72-73页 |
| 全文总结 | 第73-75页 |
| 本文创新点如下 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 攻读硕士期间发表的相关论文 | 第88页 |
