Abstract | 第9-10页 |
摘要 | 第11-12页 |
Chapter 1 Review | 第12-18页 |
1.1 Research advance on endophytic fungi in plants | 第12-15页 |
1.1.1 Definition of endophytic fungi in plants | 第12页 |
1.1.2 Distribution of endophytic fungi in plants | 第12页 |
1.1.3 Biological effects of Endophytic Fungi on their host plants | 第12-13页 |
1.1.4 Endophytic fungi as a source of bioactive natural products | 第13-15页 |
1.1.4.1 Endophyte as source of Anti-Fungal reagent | 第13页 |
1.1.4.2 Endophyte as source of Anti-cancer reagent | 第13-14页 |
1.1.4.3 Endophyte as source of Anti-Tuberculosis reagent | 第14页 |
1.1.4.4 Endophyte as source of antioxidants | 第14页 |
1.1.4.5 Endophyte as source of Anti-inflammatory reagent | 第14-15页 |
1.2 The medicinal plants that were studied in this research | 第15-18页 |
1.2.1 Desmodium elegans (圆锥山蚂蟥) | 第15页 |
1.2.2 Iris alctea(马蔺) | 第15-16页 |
1.2.3 Pedicularis resupinata (马先蒿) | 第16页 |
1.2.4 Salvia miltiorrhiza(丹参) | 第16-17页 |
1.2.5 Parasenecio ambiguus(两似蟹甲草) | 第17-18页 |
Chapter 2 Isolation and purification of endophytic fungi from five plants | 第18-24页 |
2.1 Introduction | 第18页 |
2.2 Experimental materials and instruments | 第18-19页 |
2.2.1 Experimental plant samples | 第18页 |
2.2.2 Experimental instruments | 第18-19页 |
2.2.3 chemicals | 第19页 |
2.2.4 Culture medium | 第19页 |
2.3 Experimental method | 第19-20页 |
2.3.1 Isolation and purification of Endophytic Fungi | 第19-20页 |
2.4 Results and discussion | 第20-24页 |
2.4.1 Result | 第20-23页 |
2.4.1.1 Isolation and purification of Endophytic Fungi | 第20页 |
2.4.1.2 Morphological characteristics of endophytic fungi isolated from 5 plants | 第20-23页 |
2.4.2 Discussion | 第23-24页 |
Chapter 3 Extract of Secondary metabolites of endophytic fungi and their biological activityagainst MAO and ACHE | 第24-37页 |
3.1 Introduction | 第24-25页 |
3.2 Experimental materials | 第25-27页 |
3.2.1 Experimental strains | 第25页 |
3.2.2 Culture medium | 第25页 |
3.2.3 Chemicals and Instruments | 第25-27页 |
3.2.3.1 Reagents and drugs | 第25-26页 |
3.2.3.2 Instruments | 第26-27页 |
3.2.4 experimental animal | 第27页 |
3.3 Experimental method | 第27-30页 |
3.3.1 Fermentation of endophytic fungi and sample preparation | 第27页 |
3.3.2 Monoamine oxidase (MAO) inhibitory activity assay | 第27-29页 |
3.3.2.1 Preparation of the solutions | 第27-28页 |
3.3.2.2 Preparation of monoamine oxidase | 第28页 |
3.3.2.3 Determination of monoamine oxidase inhibtory activity of 70 crude extracts | 第28-29页 |
3.3.3 Acetylcholinesterase inhibitory activity assay | 第29-30页 |
3.3.3.1 Preparation of the solutions | 第29页 |
3.3.3.2 Determination of acetylcholinesterase activity of crude extracts | 第29-30页 |
3.4 Experimental results and discussion | 第30-37页 |
3.4.1 Results | 第30-35页 |
3.4.1.1 Monoamine oxidase inhibitory activity of extracts | 第30-33页 |
3.4.1.2 Acetylcholinesterase activity of crude extracts | 第33-35页 |
3.4.2 Discussion | 第35-37页 |
Chapter 4 A preliminary study on the chemical constituents of endophytic fungi SMH-3 | 第37-48页 |
4.1 introduction | 第37页 |
4.2 Materials and instruments | 第37-40页 |
4.2.1 fungi materials | 第37页 |
4.2.2 Culture medium | 第37-38页 |
4.2.3 Experimental materials and instruments | 第38-40页 |
4.2.3.1 Instruments | 第38-39页 |
4.2.3.2 Reagents | 第39页 |
4.2.3.3 Preparation method of chromogenic agent | 第39-40页 |
4.3 Experimental method | 第40-41页 |
4.3.2 Preliminary study on chemical constituents of strain SMH-3 | 第40-41页 |
4.3.2.1 Fermentation of strain SMH-3 | 第40页 |
4.3.2.2 Extraction of secondary metabolites from strain SMH-3 | 第40页 |
4.3.2.3 Isolation and purification of chemical constituents from crude extract of strain | 第40-41页 |
4.3.7 Monoamine oxidase (MAO) inhibitory activity assay of isolated compounds | 第41页 |
4.3.7.1 Sample preparation | 第41页 |
4.3.7.2 Monoamine oxidase (MAO) inhibitory activity assay | 第41页 |
4.3.8 Acetylcholinesterase inhibitory activity assay of isolated compounds | 第41页 |
4.3.8.1 Sample preparation | 第41页 |
4.3.8.2 Acetylcholinesterase inhibitory activity assay | 第41页 |
4.4 Experimental results and discussion | 第41-46页 |
4.4.1 Structural identification of compounds | 第41-45页 |
4.4.1.1 structures of the compounds | 第42-43页 |
4.4.1.2 Identification of compounds | 第43-45页 |
4.4.2 Monoamine oxidase inhibitory activity of compounds | 第45-46页 |
4.4.3 Acetylcholinesterase inhibitory activity of compounds | 第46页 |
4.5 discussion | 第46-48页 |
Chapter 5 Molecular identification of endophytic fungi SMH-3 | 第48-56页 |
5.1 Introduction | 第48-49页 |
5.1.1 Materials | 第48页 |
5.1.2 Experimental reagents | 第48-49页 |
5.1.3 Experimental instrument | 第49页 |
5.2 Experimental method | 第49-52页 |
5.2.1 Molecular Examination and Phylogenetic Analyses | 第49-52页 |
5.2.1.1 Strain Cultivation | 第49页 |
5.2.1.2 DNA extraction from mycelia | 第49-50页 |
5.2.1.4 ITS-PCR amplification | 第50-51页 |
5.2.1.4.1 ITS primer sequence | 第50页 |
5.2.1.4.2 PCR system | 第50页 |
5.2.1.4.3 PCR condition: | 第50-51页 |
5.2.1.6 Detection of PCR amplification purity | 第51页 |
5.2.1.7 Detection of DNA purity | 第51页 |
5.2.1.8 Purification and Sequencing of amplified products | 第51页 |
5.2.1.9 Analysis of PCR product sequences | 第51-52页 |
5.2.2 Morphological Examination | 第52页 |
5.4 Experimental results | 第52-55页 |
5.4.1 Genome DNA testing | 第52页 |
5.4.2 Molecular biological identification | 第52-53页 |
5.4.3 Clustering analysis of endophytic fungi SMH-3 | 第53页 |
5.4.4 SMH-3 phylogenetic tree | 第53-55页 |
5.5 Experiment discussion | 第55-56页 |
Conclusion | 第56-57页 |
REFRENCES | 第57-64页 |
ACKNOWLEDGEMENT | 第64-65页 |
附录 A(攻读硕士学位期间所发表的论文及成果) | 第65页 |