摘要 | 第5-6页 |
abstract | 第6-7页 |
第一章 文献综述 | 第11-25页 |
1.1 紫细菌光系统结构及其功能 | 第11-15页 |
1.1.1 外围天线色素复合体 | 第13-14页 |
1.1.2 核心复合体 | 第14-15页 |
1.1.3 光合色素 | 第15页 |
1.2 紫细菌光合基因表达调控机制异同 | 第15-23页 |
1.2.1 PpsR/CrtJ型调控蛋白 | 第16-19页 |
1.2.2 双组份磷酸化调控系统 | 第19-20页 |
1.2.3 CRP-FNR型调控蛋白 | 第20-21页 |
1.2.4 SPB调控因子 | 第21页 |
1.2.5 非编码小RNA(small-noncoding RNA)调控 | 第21-22页 |
1.2.6 紫细菌光合基因表达调控问题与展望 | 第22-23页 |
1.3 细菌单杂交技术研究蛋白质-DNA互作 | 第23页 |
1.4 研究的目的及意义 | 第23-25页 |
第二章 沼泽红假单胞菌HN1菌株PpsR1蛋白与bchCXYZ启动子区域的克隆及分析 | 第25-35页 |
2.1 实验材料 | 第25-26页 |
2.1.1 菌株 | 第25页 |
2.1.2 主要药品及试剂 | 第25页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-28页 |
2.2.1 培养基制备 | 第26页 |
2.2.2 沼泽红假单胞菌HN1菌株的培养 | 第26页 |
2.2.3 沼泽红假单胞菌HN1菌株基因组DNA的小量提取 | 第26-27页 |
2.2.4 引物设计 | 第27页 |
2.2.5 基因克隆 | 第27-28页 |
2.3 结果与分析 | 第28-34页 |
2.3.1 沼泽红假单胞菌HN1菌株PpsR1蛋白的克隆及序列分析。 | 第28-30页 |
2.3.2 沼泽红假单胞菌CGA009菌株PpsR1蛋白读码框分析 | 第30-32页 |
2.3.3 bchCXYZ操纵子上游调控序列bchp的克隆。 | 第32-33页 |
2.3.4 沼泽红假单胞菌HN1的bchp序列分析 | 第33-34页 |
2.4 本章小结 | 第34-35页 |
第三章 细菌单杂交验证沼泽红假单胞菌HN1菌株PpsR1与bchCXYZ启动子区互作 | 第35-45页 |
3.1 材料 | 第35-36页 |
3.1.1 菌株和质粒 | 第35-36页 |
3.1.2 主要药品及试剂 | 第36页 |
3.1.3 主要仪器 | 第36页 |
3.2 方法 | 第36-40页 |
3.2.1 培养基制备 | 第36-37页 |
3.2.2 细菌单杂交融合表达载体pB1H2ω2-PpsR_(HTH)载体构建 | 第37页 |
3.2.3 报告载体pH3U3-bchp载体的构建 | 第37-38页 |
3.2.4 PpsR1蛋白与bchCXYZ基因启动子互作的细菌单杂交验证 | 第38页 |
3.2.5 ω2-PpsR_(HTH)对细胞毒性的验证 | 第38页 |
3.2.6 报告基因表达特性分析 | 第38-40页 |
3.3 结果 | 第40-44页 |
3.3.1 细菌单杂交融合表达载体pB1H2ω2-PpsR_(HTH)载体构建 | 第40-41页 |
3.3.2 报告载体pH3U3-bchp载体的构建 | 第41-42页 |
3.3.3 细菌单杂交验证PpsR1蛋白与bchCXYZ启动子互作 | 第42-43页 |
3.3.4 ω2-PpsR_(HTH)对毒性的验证 | 第43页 |
3.3.5 ω2-PpsR_(HTH)对pH3U3-bchp报告基因表达的影响 | 第43-44页 |
3.4 本章小结 | 第44-45页 |
第四章 细菌单杂交筛选沼泽红假单胞菌bchCXYZ操纵子的调控蛋白 | 第45-55页 |
4.1 材料 | 第45页 |
4.1.1 试剂 | 第45页 |
4.1.2 仪器设备 | 第45页 |
4.2 方法 | 第45-50页 |
4.2.1 pB1H2ω2-MCS载体构建 | 第45-47页 |
4.2.2 沼泽红假单胞菌HN1菌株的培养及基因组提取 | 第47页 |
4.2.3 沼泽红假单胞菌HN1菌株基因组不完全酶切 | 第47页 |
4.2.4 pB1H2ω2-MCS载体BamHI单酶切 | 第47-48页 |
4.2.5 基因组文库的构建 | 第48页 |
4.2.6 pH3U3诱饵载体构建 | 第48-49页 |
4.2.7 诱饵菌株及其感受态的制备 | 第49页 |
4.2.8 诱饵载体自激活检测 | 第49页 |
4.2.9 文库筛选 | 第49-50页 |
4.3 结果分析 | 第50-54页 |
4.3.1 pB1H2ω2-MCS载体的构建 | 第50页 |
4.3.2 细菌单杂交基因组文库的构建 | 第50-52页 |
4.3.3 细菌单杂交pH3U3诱饵载体的构建及诱饵菌株的制备 | 第52页 |
4.3.4 诱饵载体的自激活验证 | 第52-53页 |
4.3.5 细菌单杂交文库的筛选 | 第53-54页 |
4.3.6 文库筛选测序结果 | 第54页 |
4.4 本章小结 | 第54-55页 |
第五章 讨论与分析 | 第55-58页 |
第六章 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
附录 | 第65-69页 |
致谢 | 第69-70页 |
作者简介 | 第70页 |