| 中文摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 前言 | 第10-13页 |
| 参考文献 | 第11-13页 |
| 第一章 小檗碱抑制饱和脂肪酸诱导的NLRP3炎症小体活化 | 第13-27页 |
| 绪言 | 第13-15页 |
| 1.1 实验材料 | 第15-17页 |
| 1.1.1 试剂 | 第15-16页 |
| 1.1.2 仪器 | 第16-17页 |
| 1.1.3 细胞株 | 第17页 |
| 1.1.4 实验动物 | 第17页 |
| 1.2 实验方法 | 第17-20页 |
| 1.2.1 骨髓分化的巨噬细胞BMDMs的制备方法 | 第17页 |
| 1.2.2 PA-BSA复合物的制备 | 第17-18页 |
| 1.2.3 ELISA法检测IL-1β,IL-18的释放 | 第18页 |
| 1.2.4 Western blotting | 第18页 |
| 1.2.5 Bandscan灰度分析 | 第18-19页 |
| 1.2.6 脂肪细胞分化 | 第19页 |
| 1.2.7 成熟脂肪细胞的油红O染色 | 第19页 |
| 1.2.8 巨噬细胞条件培养基的制各 | 第19页 |
| 1.2.9 放射性葡萄糖摄取测定 | 第19页 |
| 1.2.10 总RNA提取 | 第19-20页 |
| 1.2.11 Real-time quantitative PCR检测m RNA表达 | 第20页 |
| 1.2.12 数据处理 | 第20页 |
| 1.3 实验结果 | 第20-25页 |
| 1.3.1 小檗碱抑制饱和脂肪酸诱导的NLRP3炎症小体活化中IL-1β,IL-18的释放 | 第20-22页 |
| 1.3.2 小檗碱抑制NLRP3炎症小体活化过程中Caspase-1的活化 | 第22-24页 |
| 1.3.3 脂肪细胞的油红O染色 | 第24页 |
| 1.3.4 小檗碱处理后的巨噬细胞条件培养基改善共孵的脂肪细胞胰岛素敏感性. | 第24-25页 |
| 1.4 讨论 | 第25-26页 |
| 1.5 小结 | 第26页 |
| 1.6 参考文献 | 第26-27页 |
| 第二章 小檗碱抑制NLRP3炎症小体活化机理研究 | 第27-41页 |
| 绪言 | 第27-29页 |
| 2.1 实验材料 | 第29-30页 |
| 2.1.1 试剂 | 第29页 |
| 2.1.2 仪器 | 第29-30页 |
| 2.1.3 细胞株 | 第30页 |
| 2.1.4 实验动物 | 第30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-32页 |
| 2.2.1 骨髓分化的巨噬细胞BMDMs的制备方法 | 第30页 |
| 2.2.2 PA-BSA复合物的制备 | 第30页 |
| 2.2.3 Western blotting | 第30页 |
| 2.2.4 Bandscan灰度分析 | 第30页 |
| 2.2.5 MDC染色 | 第30-31页 |
| 2.2.6 免疫荧光 | 第31页 |
| 2.2.7 电镜 | 第31页 |
| 2.2.8 ELISA法检测IL-1β的释放 | 第31页 |
| 2.2.9 慢病毒转染THP-1细胞株 | 第31页 |
| 2.2.10 流式细胞仪检测ROS | 第31-32页 |
| 2.2.11 数据处理 | 第32页 |
| 2.3 实验结果 | 第32-39页 |
| 2.3.1 小檗碱促进巨噬细胞中自噬相关蛋白beclin 1、LC3B-Ⅱ的表达,但是对p | 第32-33页 |
| 2.3.2 小檗碱促进巨噬细胞中自噬小泡(autophagic vacuoles)的增加 | 第33-34页 |
| 2.3.3 小檗碱增强巨噬细胞中LC3B荧光染色(LC3B punctate staining)强度 | 第34页 |
| 2.3.4 小檗碱增加巨噬细胞中自噬小体的数量 | 第34-35页 |
| 2.3.5 小檗碱通过AMPK/mTOR/p70S6K信号通路影响自噬,Ara-A(AMPK的抑制剂)阻断小檗碱诱导的Beclin1的上调及对Caspase-1活化的抑制 | 第35-36页 |
| 2.3.6 Western blotting检验自噬相关基因Beclin 1(ATG6)的干扰效率 | 第36-37页 |
| 2.3.7 干扰Beclin 1(ATG6)几乎逆转小檗碱对于IL-1β释放的抑制作用 | 第37-38页 |
| 2.3.8 干扰Beclin 1(ATG6)几乎逆转小檗碱对于抑制NLRP3炎症小体活化过程中Caspase-1的活化的抑制作用 | 第38页 |
| 2.3.9 小檗碱减弱饱和脂肪酸诱导巨噬细胞产生的自噬相关的线粒体ROS,而同时加入自噬抑制剂3-MA则抑制了小檗碱的这一作用 | 第38-39页 |
| 2.4 讨论 | 第39-40页 |
| 2.5 小结 | 第40页 |
| 2.6 参考文献 | 第40-41页 |
| 第三章 小檗碱通过抑制CD11c阳性的脂肪相关的巨噬细胞的浸润以及脂肪组织中NLRP | 第41-57页 |
| 绪言 | 第41-44页 |
| 3.1 实验材料 | 第44-45页 |
| 3.1.1 试剂 | 第44页 |
| 3.1.2 仪器 | 第44页 |
| 3.1.3 细胞株 | 第44页 |
| 3.1.4 实验动物 | 第44-45页 |
| 3.2 实验方法 | 第45-47页 |
| 3.2.1 葡萄糖耐受实验(GTT) | 第45页 |
| 3.2.2 胰岛素耐受实验(ITT) | 第45页 |
| 3.2.3 ELISA检测血清胰岛素水平 | 第45页 |
| 3.2.4 脂肪组织中stromal vascular fraction(SVF)细胞分离提取 | 第45-46页 |
| 3.2.5 流式细胞分析 | 第46页 |
| 3.2.6 组织病理切片 | 第46页 |
| 3.2.7 脂肪组织体外培养 | 第46页 |
| 3.2.8 脂肪组织蛋白提取 | 第46页 |
| 3.2.9 脂质体剔除小鼠巨噬细胞 | 第46页 |
| 3.2.10 骨髓分化的巨噬细胞BMDMs的制备方法 | 第46-47页 |
| 3.2.11 PA-BSA复合物的制备 | 第47页 |
| 3.2.12 Western blotting | 第47页 |
| 3.2.13 Bandscan灰度分析 | 第47页 |
| 3.2.14 数据处理 | 第47页 |
| 3.3 实验结果 | 第47-55页 |
| 3.3.1 小檗碱抑制高脂诱导的体内血糖稳态的异常变化 | 第47-49页 |
| 3.3.2 小檗碱对于小鼠体重的影响 | 第49页 |
| 3.3.3 小檗碱缓解高脂诱导的小鼠血清胰岛素值显著升高 | 第49-50页 |
| 3.3.4 小檗碱抑制高脂诱导的小鼠脂肪组织体积增长 | 第50-51页 |
| 3.3.5 小檗碱抑制肥胖诱导的CD11c阳性的脂肪相关的巨噬细胞的浸润 | 第51-52页 |
| 3.3.6 小檗碱抑制脂肪组织中stromal vascular fraction(SVF)细胞CD11c的表达 | 第52页 |
| 3.3.7 小檗碱抑制脂肪组织中Caspase-1的活性 | 第52页 |
| 3.3.8 小檗碱改善高脂诱导的脂肪组织的炎症状况 | 第52-53页 |
| 3.3.9 脂肪组织体外培养实验证实小檗碱对于脂肪组织炎症的改善作用 | 第53-54页 |
| 3.3.10 巨噬细胞剔除及转输实验 | 第54-55页 |
| 3.4 讨论 | 第55页 |
| 3.5 小结 | 第55-56页 |
| 3.6 参考文献 | 第56-57页 |
| 结语 | 第57-58页 |
| 附录一 主要缩略词语表 | 第58-59页 |
| 附录二 已发表和待发表文章 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
