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淫羊藿苷抗骨质疏松分子机理研究

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
英文缩写词表第12-14页
第1章 绪论第14-20页
   ·国内外研究现状综述第15-17页
     ·淫羊藿苷对骨髓间充质干细胞、成骨细胞、破骨细胞的影响第15-16页
     ·淫羊藿苷及其代谢物雌激素样作用的研究第16页
     ·淫羊藿苷与 NO 信号途径的研究第16-17页
   ·淫羊藿苷防治骨质疏松存在的问题第17-18页
   ·展望第18页
   ·本文构想第18-20页
第2章 骨髓间充质干细胞的体外分离、培养与诱导分化第20-26页
   ·材料和方法第20-22页
     ·主要试剂第20页
     ·主要仪器第20-21页
     ·试剂配制第21页
     ·骨髓间充质干细胞的分离与培养第21-22页
     ·骨髓间充质干细胞的诱导分化第22页
   ·结果第22-23页
     ·形态学观察第22-23页
     ·碱性磷酸酶染色第23页
     ·矿化结节染色第23页
   ·讨论第23-26页
第3章 淫羊藿苷与其主要代谢产物淫羊藿次苷Ⅱ对骨髓间充质干细胞成骨性分化的影响第26-36页
   ·材料与方法第26-30页
     ·实验材料第26页
     ·主要仪器第26页
     ·主要试剂第26-27页
     ·试剂配制第27页
     ·骨髓间充质干细胞的分离与培养第27页
     ·药物干预第27-28页
     ·成骨性分化指标检测第28-30页
       ·ALP 活性检测第28页
       ·碱磷酶阳性克隆(CFU-FALP)分析第28页
       ·骨钙素含量的测定第28页
       ·钙盐沉积量的测定第28页
       ·钙化结节分析第28页
       ·RT-Real Time PCR 分析第28-30页
     ·统计学分析第30页
   ·结果第30-34页
     ·ICA 和 ICS II 对 ALP 活性的影响第30-31页
     ·ALP 组织化学染色结果第31页
     ·对骨钙素分泌量的影响第31-32页
     ·对钙化结节的影响第32页
     ·对钙盐沉积量的影响第32-33页
     ·Real Time RT-PCR 实验结果第33-34页
       ·总 RNA 质量鉴定第33页
       ·各基因相对表达量检测第33-34页
   ·讨论第34-36页
第4章 淫羊藿次苷Ⅱ对rBMSCs 成骨性分化过程中雌激素通路的影响第36-46页
   ·材料第36-37页
     ·实验动物第36页
     ·主要试剂与仪器第36-37页
   ·方法第37-39页
     ·大鼠骨髓间充质干细胞的培养第37页
     ·大鼠骨髓间充质干细胞的前处理及药物干预第37页
     ·ALP 活性测定第37页
     ·骨钙素分泌量的测定第37页
     ·钙盐沉积量的测定第37页
     ·Real Time RT-PCR 分析第37-38页
     ·Western-blot第38页
     ·统计学分析第38-39页
   ·结果第39-45页
     ·ALP 活性分析第39页
     ·骨钙素分泌量分析第39-40页
     ·钙盐沉积量分析第40-41页
     ·Real Time RT-PCR 分析第41-42页
       ·成骨相关基因表达情况第41页
       ·雌激素通路相关基因表达情况第41-42页
     ·Western-blot 分析第42-45页
       ·I 型胶原蛋白表达量分析第42-43页
       ·ERα蛋白表达量分析第43页
       ·PR 蛋白表达量分析第43-44页
       ·PS-2 蛋白表达量分析第44-45页
   ·讨论第45-46页
第5章 淫羊藿次苷Ⅱ对 rBMSCs 成骨性分化过程中 NO-cGMP-PKG 信号通路的影响第46-55页
   ·材料第46-47页
     ·实验动物第46页
     ·主要仪器与试剂第46-47页
   ·方法第47-49页
     ·大鼠骨髓间充质干细胞的培养第47页
     ·实验分组及药物干预第47页
     ·ALP 活性分析第47页
     ·骨钙素分泌量测定第47页
     ·钙盐沉积量测定第47-48页
     ·iNOS活性测定第48页
     ·NO 生成量测定第48页
     ·cGMP 生成量测定第48页
     ·Real Time RT-PCR 测定第48页
     ·Western-blot 分析第48-49页
     ·统计学分析第49页
   ·结果第49-53页
     ·ALP 活性测定结果第49页
     ·ICS II 及相关阻断剂对骨钙素的影响第49-50页
     ·ICS II 及通路阻断剂对钙盐沉积量的影响第50页
     ·ICS II和L-NAME对iNOS及NO表达的影响第50-51页
     ·ICS II和ODQ对sGC及cGMP表达的影响第51-52页
     ·ICS II和PDE5对cGMP及PKG表达的影响第52-53页
   ·讨论第53-55页
结论第55-56页
 不足与展望第55-56页
参考文献第56-63页
致谢第63-64页
附录A:攻读学位期间所发表的学术论文目录第64页

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