| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 英文缩写词表 | 第12-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-20页 |
| ·国内外研究现状综述 | 第15-17页 |
| ·淫羊藿苷对骨髓间充质干细胞、成骨细胞、破骨细胞的影响 | 第15-16页 |
| ·淫羊藿苷及其代谢物雌激素样作用的研究 | 第16页 |
| ·淫羊藿苷与 NO 信号途径的研究 | 第16-17页 |
| ·淫羊藿苷防治骨质疏松存在的问题 | 第17-18页 |
| ·展望 | 第18页 |
| ·本文构想 | 第18-20页 |
| 第2章 骨髓间充质干细胞的体外分离、培养与诱导分化 | 第20-26页 |
| ·材料和方法 | 第20-22页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·试剂配制 | 第21页 |
| ·骨髓间充质干细胞的分离与培养 | 第21-22页 |
| ·骨髓间充质干细胞的诱导分化 | 第22页 |
| ·结果 | 第22-23页 |
| ·形态学观察 | 第22-23页 |
| ·碱性磷酸酶染色 | 第23页 |
| ·矿化结节染色 | 第23页 |
| ·讨论 | 第23-26页 |
| 第3章 淫羊藿苷与其主要代谢产物淫羊藿次苷Ⅱ对骨髓间充质干细胞成骨性分化的影响 | 第26-36页 |
| ·材料与方法 | 第26-30页 |
| ·实验材料 | 第26页 |
| ·主要仪器 | 第26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·试剂配制 | 第27页 |
| ·骨髓间充质干细胞的分离与培养 | 第27页 |
| ·药物干预 | 第27-28页 |
| ·成骨性分化指标检测 | 第28-30页 |
| ·ALP 活性检测 | 第28页 |
| ·碱磷酶阳性克隆(CFU-FALP)分析 | 第28页 |
| ·骨钙素含量的测定 | 第28页 |
| ·钙盐沉积量的测定 | 第28页 |
| ·钙化结节分析 | 第28页 |
| ·RT-Real Time PCR 分析 | 第28-30页 |
| ·统计学分析 | 第30页 |
| ·结果 | 第30-34页 |
| ·ICA 和 ICS II 对 ALP 活性的影响 | 第30-31页 |
| ·ALP 组织化学染色结果 | 第31页 |
| ·对骨钙素分泌量的影响 | 第31-32页 |
| ·对钙化结节的影响 | 第32页 |
| ·对钙盐沉积量的影响 | 第32-33页 |
| ·Real Time RT-PCR 实验结果 | 第33-34页 |
| ·总 RNA 质量鉴定 | 第33页 |
| ·各基因相对表达量检测 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| 第4章 淫羊藿次苷Ⅱ对rBMSCs 成骨性分化过程中雌激素通路的影响 | 第36-46页 |
| ·材料 | 第36-37页 |
| ·实验动物 | 第36页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第36-37页 |
| ·方法 | 第37-39页 |
| ·大鼠骨髓间充质干细胞的培养 | 第37页 |
| ·大鼠骨髓间充质干细胞的前处理及药物干预 | 第37页 |
| ·ALP 活性测定 | 第37页 |
| ·骨钙素分泌量的测定 | 第37页 |
| ·钙盐沉积量的测定 | 第37页 |
| ·Real Time RT-PCR 分析 | 第37-38页 |
| ·Western-blot | 第38页 |
| ·统计学分析 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-45页 |
| ·ALP 活性分析 | 第39页 |
| ·骨钙素分泌量分析 | 第39-40页 |
| ·钙盐沉积量分析 | 第40-41页 |
| ·Real Time RT-PCR 分析 | 第41-42页 |
| ·成骨相关基因表达情况 | 第41页 |
| ·雌激素通路相关基因表达情况 | 第41-42页 |
| ·Western-blot 分析 | 第42-45页 |
| ·I 型胶原蛋白表达量分析 | 第42-43页 |
| ·ERα蛋白表达量分析 | 第43页 |
| ·PR 蛋白表达量分析 | 第43-44页 |
| ·PS-2 蛋白表达量分析 | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-46页 |
| 第5章 淫羊藿次苷Ⅱ对 rBMSCs 成骨性分化过程中 NO-cGMP-PKG 信号通路的影响 | 第46-55页 |
| ·材料 | 第46-47页 |
| ·实验动物 | 第46页 |
| ·主要仪器与试剂 | 第46-47页 |
| ·方法 | 第47-49页 |
| ·大鼠骨髓间充质干细胞的培养 | 第47页 |
| ·实验分组及药物干预 | 第47页 |
| ·ALP 活性分析 | 第47页 |
| ·骨钙素分泌量测定 | 第47页 |
| ·钙盐沉积量测定 | 第47-48页 |
| ·iNOS活性测定 | 第48页 |
| ·NO 生成量测定 | 第48页 |
| ·cGMP 生成量测定 | 第48页 |
| ·Real Time RT-PCR 测定 | 第48页 |
| ·Western-blot 分析 | 第48-49页 |
| ·统计学分析 | 第49页 |
| ·结果 | 第49-53页 |
| ·ALP 活性测定结果 | 第49页 |
| ·ICS II 及相关阻断剂对骨钙素的影响 | 第49-50页 |
| ·ICS II 及通路阻断剂对钙盐沉积量的影响 | 第50页 |
| ·ICS II和L-NAME对iNOS及NO表达的影响 | 第50-51页 |
| ·ICS II和ODQ对sGC及cGMP表达的影响 | 第51-52页 |
| ·ICS II和PDE5对cGMP及PKG表达的影响 | 第52-53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 结论 | 第55-56页 |
| 不足与展望 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 附录A:攻读学位期间所发表的学术论文目录 | 第64页 |