致谢 | 第4-8页 |
缩略词Abbreviation | 第8-9页 |
摘要 | 第9-11页 |
1 文献综述 | 第11-18页 |
1.1 山茱萸植物的研究进展 | 第11-13页 |
1.1.1 山茱萸生物学特征及其价值 | 第11-12页 |
1.1.2 山茱萸植物研究现状 | 第12-13页 |
1.1.3 山茱萸植物应用存在的问题 | 第13页 |
1.2 遗传多样性中常用于标记的基因序列片段 | 第13-15页 |
1.2.1 nrDNA | 第14-15页 |
1.2.2 cpDNA | 第15页 |
1.3 DNA基因序列标记在植物中的应用 | 第15-16页 |
1.4 山茱萸植物的多糖研究概述 | 第16-18页 |
2 引言 | 第18-20页 |
2.1 研究的目的意义 | 第18-19页 |
2.2 主要的研究方法 | 第19-20页 |
3 材料与方法 | 第20-27页 |
3.1 实验材料 | 第20-23页 |
3.1.1 山茱萸内含物测定 | 第20页 |
3.1.1.1 试验材料 | 第20页 |
3.1.1.2 主要药品试剂 | 第20页 |
3.1.1.3 主要仪器设备 | 第20页 |
3.1.2 山茱萸基因序列标记 | 第20-23页 |
3.1.2.1 试验材料 | 第20-22页 |
3.1.2.2 主要药品试剂 | 第22页 |
3.1.2.3 主要仪器设备 | 第22页 |
3.1.2.4 主要试剂的配置 | 第22-23页 |
3.1.2.5 序列引物的设计 | 第23页 |
3.2 试验方法 | 第23-27页 |
3.2.1 山茱萸形态指标的测量 | 第23页 |
3.2.2 山茱萸内含物——多糖的提取测定 | 第23-24页 |
3.2.2.1 山茱萸多糖的提取 | 第23-24页 |
3.2.2.2 山茱萸多糖的测定 | 第24页 |
3.2.3 山茱萸总DNA的提取及检测 | 第24页 |
3.2.3.1 山茱萸总DNA的提取 | 第24页 |
3.2.3.2 山茱萸总DNA的检测 | 第24页 |
3.2.4 制备用于克隆山茱萸基因序列的DNA模板 | 第24-25页 |
3.2.5 山茱萸基因片段的PCR扩增 | 第25页 |
3.2.5.1 ITS基因片段的PCR扩增 | 第25页 |
3.2.5.2 cp DNA基因片段的PCR扩增 | 第25页 |
3.2.6 琼脂糖凝胶电泳及检测 | 第25-26页 |
3.2.6.1 制备琼脂糖电泳所需要的凝胶 | 第25-26页 |
3.2.6.2 基因扩增后的电泳检测及染色观察 | 第26页 |
3.2.7 山茱萸PCR扩增产物的纯化及测序 | 第26页 |
3.2.8 数据分析 | 第26-27页 |
3.2.8.1 山茱萸形态指标及内含物—多糖含量的数据分析 | 第26页 |
3.2.8.2 山茱萸ITS基因序列数据分析 | 第26页 |
3.2.8.3 山茱萸cp DNA基因序列数据分析 | 第26-27页 |
4 结果与分析 | 第27-43页 |
4.1 山茱萸种质资源形态学指标分析 | 第27-28页 |
4.2 山茱萸种质资源多糖差异分析 | 第28-30页 |
4.3 山茱萸植物的ITS序列研究 | 第30-42页 |
4.3.1 山茱萸植物的ITS序列的克隆 | 第30页 |
4.3.2 山茱萸ITS-PCR纯化产物测序结果 | 第30-31页 |
4.3.3 山茱萸ITS区序列特性 | 第31-36页 |
4.3.4 不同山茱萸单株ITS序列单倍型的分布及遗传多样性分析 | 第36-37页 |
4.3.5 山茱萸ITS在种内、种间的变异 | 第37-38页 |
4.3.6 基于ITS不同山茱萸群体间的遗传距离及系统发生分析 | 第38-40页 |
4.3.6.1 最大似然法(ML)系统发育分析 | 第38-39页 |
4.3.6.2 邻接法(NJ)系统发育分析 | 第39-40页 |
4.3.7 山茱萸种群间的遗传距离 | 第40-42页 |
4.4 山茱萸植物的cp DNA序列分析 | 第42-43页 |
4.4.1 山茱萸植物的cp DNA序列引物的筛选 | 第42页 |
4.4.2 山茱萸植物的cp DNA序列的克隆 | 第42-43页 |
4.4.3 山茱萸cp DNA-PCR纯化产物测序结果 | 第43页 |
4.4.4 山茱萸植物cp DNA片段序列特性 | 第43页 |
5 讨论与结论 | 第43-49页 |
5.1 讨论 | 第43-46页 |
5.1.1 山茱萸的序列及表型特征 | 第43-44页 |
5.1.2 山茱萸种群的遗传多样性 | 第44-45页 |
5.1.3 山茱萸种群的系统发育关系 | 第45页 |
5.1.4 ITS序列对不同产区山茱萸的鉴别 | 第45-46页 |
5.1.5 DNA的纯度及完整性 | 第46页 |
5.1.6 PCR反应 | 第46页 |
5.2 结论 | 第46-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
ABSTRACT | 第54-56页 |