| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-15页 |
| 1.1 啤酒酵母自溶的研究 | 第8-11页 |
| 1.1.1 酵母自溶的定义及其机制 | 第8页 |
| 1.1.2 酵母自溶对啤酒品质的影响 | 第8-9页 |
| 1.1.3 影响酵母自溶的因素 | 第9-10页 |
| 1.1.4 啤酒酵母自溶的工业控制 | 第10-11页 |
| 1.2 酵母细胞壁与细胞自溶的关系 | 第11-13页 |
| 1.2.1 酵母细胞壁的组成及功能 | 第11页 |
| 1.2.2 酵母细胞壁与自溶关系的相关研究 | 第11-12页 |
| 1.2.3 细胞壁代谢的关键基因 | 第12页 |
| 1.2.4 β-1,3-葡聚糖的合成 | 第12-13页 |
| 1.3 立体背景及意义 | 第13页 |
| 1.4 主要研究内容 | 第13-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-25页 |
| 2.1 材料 | 第15-17页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第15页 |
| 2.1.2 仪器与设备 | 第15-16页 |
| 2.1.3 培养基及试剂 | 第16-17页 |
| 2.2 主要实验方法 | 第17-22页 |
| 2.2.1 质粒的提取、PCR产物胶回收以及PCR产物纯化 | 第17页 |
| 2.2.2 基因敲除组件的构建 | 第17-19页 |
| 2.2.3 重组菌株的构建 | 第19-20页 |
| 2.2.4 转化子的PCR鉴定 | 第20页 |
| 2.2.5 qRT-PCR分析不同菌株相关基因的表达差异 | 第20-22页 |
| 2.3 主要分析方法 | 第22-25页 |
| 2.3.1 基础性能分析 | 第22-23页 |
| 2.3.2 细胞壁多糖含量分析 | 第23页 |
| 2.3.3 酵母模拟自溶分析 | 第23页 |
| 2.3.4 酵母抗胁迫压力分析 | 第23-24页 |
| 2.3.5 模拟液体发酵分析 | 第24-25页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第25-39页 |
| 3.1 酿酒酵母FKS基因家族的敲除 | 第25-26页 |
| 3.1.1 FKS1，FKS2、FKS1，FKS3和FKS2，FKS3基因双敲除菌株的构建 | 第25-26页 |
| 3.1.2 FKS1，FKS2，FKS3基因缺陷型菌株的构建 | 第26页 |
| 3.2 FKS家族基因敲除对酵母生长性能的影响 | 第26-32页 |
| 3.2.1 重组菌生长性能分析 | 第26-27页 |
| 3.2.2 重组菌形态分析 | 第27-30页 |
| 3.2.3 重组菌细胞壁多糖含量的分析 | 第30-32页 |
| 3.3 FKS家族基因敲除对酵母抗自溶能力的影响 | 第32-39页 |
| 3.3.1 重组菌环境压力胁迫分析 | 第32-33页 |
| 3.3.2 重组菌模拟自溶分析 | 第33-34页 |
| 3.3.3 重组菌自溶过程中扫描电镜分析 | 第34-35页 |
| 3.3.4 CWI途径中关键基因qRT-PCR分析 | 第35-36页 |
| 3.3.5 重组菌液体发酵实验 | 第36-39页 |
| 主要结论与展望 | 第39-40页 |
| 主要结论 | 第39页 |
| 展望 | 第39-40页 |
| 致谢 | 第40-42页 |
| 参考文献 | 第42-45页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第45-46页 |
| 附录: 附表1 氨基酸混合物的成分 | 第46页 |
