| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-19页 |
| 1 植物磷信号调控途径 | 第10-15页 |
| 1.1 磷信号途径的PHR类转录因子 | 第10-11页 |
| 1.2 磷信号途径中microRNA | 第11-13页 |
| 1.3 SPX结构域的蛋白与磷信号途径 | 第13-14页 |
| 1.4 其他转录因子与磷信号途径 | 第14-15页 |
| 2 蔗糖合成途径 | 第15-16页 |
| 3 糖信号途径与磷信号途径的关系 | 第16-18页 |
| 4 本研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 蔗糖与磷信号的关系分析 | 第19-30页 |
| 1 材料和方法 | 第19-26页 |
| 1.1 材料 | 第19页 |
| 1.2 方法 | 第19-26页 |
| 1.2.1 水稻Osphr2突变体不同糖与磷处理 | 第19-20页 |
| 1.2.2 植物总RNA的提取 | 第20-21页 |
| 1.2.3 RNA反转录 | 第21-22页 |
| 1.2.4 磷信号OsIPS1定量PCR(qRT-PCR)分析 | 第22页 |
| 1.2.5 野生型水稻东京正常供磷(+P)和无磷(-P)处理 | 第22-23页 |
| 1.2.6 可溶性糖和蔗糖含量的测定(蒽酮-浓硫酸方法) | 第23-24页 |
| 1.2.7 有效磷在野生型HY和Ossut2突变体的测定 | 第24-26页 |
| 1.2.8 磷饥饿响应基因在野生型HY和Ossut2突变体的表达分析 | 第26页 |
| 2 结果 | 第26-29页 |
| 2.1 缺磷影响水稻中蔗糖含量的变化分析 | 第26-27页 |
| 2.2 蔗糖对磷饥饿响应基因OsIPS1的影响 | 第27-28页 |
| 2.3 Ossut2中有效磷含量和OsIPS1基因表达模式分析 | 第28-29页 |
| 3 讨论 | 第29-30页 |
| 第三章 蔗糖磷酸酶OsSPP1基因的功能分析 | 第30-49页 |
| 1 材料和方法 | 第30-43页 |
| 1.1 材料 | 第30页 |
| 1.2 方法 | 第30-43页 |
| 1.2.1 蔗糖磷酸酶OsSPP基因家族成员缺磷诱导筛选 | 第30-31页 |
| 1.2.2 OsSPP1启动子接自身基因融合Gus表达载体的构建 | 第31-36页 |
| 1.2.2.1 引物设计 | 第31-32页 |
| 1.2.2.2 提取水稻DNA | 第32页 |
| 1.2.2.3 扩增OsSPP1基因组片段 | 第32-33页 |
| 1.2.2.4 构建OsSPP1-p-g-GUS融合表达载体 | 第33-36页 |
| 1.2.3 获得OsSPP1-p-g-GUS转基因植株 | 第36-37页 |
| 1.2.4 OsSPP1-p-g-GUS转基因植株筛选 | 第37页 |
| 1.2.5 OsSPP1-p-g-GUS转基因材料做缺磷处理及GUS染色 | 第37-39页 |
| 1.2.6 OsSPP1在突变体Osphr2 qRT-PCR定量分析 | 第39页 |
| 1.2.6.1 缺磷处理 | 第39页 |
| 1.2.6.2 提取RNA,逆转录cDNA | 第39页 |
| 1.2.6.3 OsSPP1相对表达量分析 | 第39页 |
| 1.2.7 OsSPP1亚细胞定位分析 | 第39-43页 |
| 1.2.7.1 OsSPP1-C-GFP融合表达载体的构建 | 第39页 |
| 1.2.7.2 水稻日本晴的培养 | 第39-40页 |
| 1.2.7.3 质粒中提 | 第40-41页 |
| 1.2.7.4 原生质体制备与瞬时转化 | 第41-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-47页 |
| 2.1 蔗糖磷酸酶OsSPP基因家族成员缺磷诱导情况分析 | 第43-44页 |
| 2.2 OsSPP1蛋白组织表达分析 | 第44-46页 |
| 2.3 OsSPP1在突变体Osphr2中表达模式分析 | 第46页 |
| 2.4 OsSPP1亚细胞定位分析 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 Osspp1突变体功能分析 | 第49-57页 |
| 1 材料和方法 | 第49-51页 |
| 1.1 材料 | 第49页 |
| 1.2 方法 | 第49-51页 |
| 1.2.1 OsSPP1的T-DNA插入突变体筛选 | 第49-50页 |
| 1.2.1.1 鉴定引物设计 | 第49-50页 |
| 1.2.1.2 Osspp1的T-DNA插入突变体鉴定 | 第50页 |
| 1.2.2 Osspp1突变体糖含量和有效磷含量 | 第50-51页 |
| 1.2.2.1 可溶性糖和蔗糖含量的测定 | 第50页 |
| 1.2.2.2 有效磷含量测定 | 第50页 |
| 1.2.2.3 生物量测定 | 第50-51页 |
| 1.3 Osspp1突变体缺磷响应基因表达量分析 | 第51页 |
| 2 结果与分析 | 第51-56页 |
| 2.1 OsSPP1的T-DNA插入突变体的分析鉴定 | 第51-52页 |
| 2.2 Osspp1突变体可溶性糖,蔗糖以及有效磷含量分析 | 第52-53页 |
| 2.3 Osspp1突变体生物量分析 | 第53-54页 |
| 2.4 Osspp1突变体磷信号分析 | 第54-56页 |
| 3 讨论 | 第56-57页 |
| 第五章 总结 | 第57-60页 |
| 5.1 结论 | 第57-58页 |
| 5.2 展望 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-73页 |
| 致谢 | 第73-75页 |
