| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 1 文献综述 | 第12-19页 |
| 1.1 硫代葡萄糖苷的研究进展 | 第12-16页 |
| 1.1.1 硫代葡萄糖苷的种类及分布 | 第12-13页 |
| 1.1.2 硫代葡萄糖苷的生物合成及调控 | 第13-15页 |
| 1.1.2.1 氨基酸侧链延长 | 第13-14页 |
| 1.1.2.2 核心结构形成 | 第14页 |
| 1.1.2.3 侧链二次修饰 | 第14-15页 |
| 1.1.2.4 MYB转录因子调控硫代葡萄糖苷合成 | 第15页 |
| 1.1.3 硫代葡萄糖苷的降解及其生物学功能 | 第15-16页 |
| 1.2 CYP83家族与硫代葡萄糖苷合成 | 第16页 |
| 1.3 小白菜中硫代葡萄糖苷的相关研究 | 第16-19页 |
| 1.3.1 小白菜及其硫代葡萄糖苷的含量与组分 | 第16-17页 |
| 1.3.2 小白菜遗传转化体系的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3.3 硫元素与小白菜硫代葡萄糖苷合成 | 第18-19页 |
| 2 小白菜CYP83A1和CYP83B1克隆及表达载体构建 | 第19-37页 |
| 2.1 材料与方法 | 第19-27页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1.1 材料 | 第19页 |
| 2.1.1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.1.3 试验主要仪器 | 第20页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第20-27页 |
| 2.1.2.1 总RNA提取及检测 | 第20-21页 |
| 2.1.2.2 反转录 | 第21页 |
| 2.1.2.3 PCR引物设计及扩增和纯化 | 第21-23页 |
| 2.1.2.4 表达载体质粒提取 | 第23-24页 |
| 2.1.2.5 双酶切及纯化 | 第24-25页 |
| 2.1.2.6 载体连接 | 第25页 |
| 2.1.2.7 连接产物转化 | 第25-26页 |
| 2.1.2.8 菌液鉴定以及测序分析 | 第26-27页 |
| 2.2 结果与分析 | 第27-35页 |
| 2.2.1 通过克隆获得目的基因序列 | 第27-28页 |
| 2.2.1.1 总RNA电泳检测结果 | 第27页 |
| 2.2.1.2 获得目的基因序列 | 第27-28页 |
| 2.2.2 构建相关序列的表达载体 | 第28-35页 |
| 2.2.2.1 双酶切目的基因片段及表达载体 | 第28-29页 |
| 2.2.2.2 连接载体与目的基因片段及转化大肠杆菌 | 第29-30页 |
| 2.2.2.3 比对分析菌液测序结果 | 第30-35页 |
| 2.3 讨论 | 第35-37页 |
| 3 小白菜遗传转化及植株鉴定与基因表达分析 | 第37-49页 |
| 3.1 材料与方法 | 第37-42页 |
| 3.1.1 试验材料 | 第37页 |
| 3.1.1.1 材料 | 第37页 |
| 3.1.1.2 主要试剂 | 第37页 |
| 3.1.1.3 试验主要仪器 | 第37页 |
| 3.1.2 试验方法 | 第37-42页 |
| 3.1.2.1 重组质粒 | 第37页 |
| 3.1.2.2 感受态细胞制备 | 第37-38页 |
| 3.1.2.3 农杆菌转化 | 第38-39页 |
| 3.1.2.4 外植体侵染和培养 | 第39-40页 |
| 3.1.2.5 基因组DNA提取 | 第40-41页 |
| 3.1.2.6 转基因植株鉴定 | 第41页 |
| 3.1.2.7 转基因植株基因表达量测定 | 第41-42页 |
| 3.2 结果与分析 | 第42-47页 |
| 3.2.1 农杆菌侵染菌液获得 | 第42-44页 |
| 3.2.2 小白菜外植体的培养和转化 | 第44-45页 |
| 3.2.3 小白菜转基因植株的鉴定 | 第45页 |
| 3.2.4 转基因小白菜相关基因表达量分析 | 第45-47页 |
| 3.3 讨论 | 第47-49页 |
| 4 外源硫素处理对小白菜硫代葡萄糖苷合成的影响 | 第49-62页 |
| 4.1 材料与方法 | 第49-51页 |
| 4.1.1 试验材料 | 第49页 |
| 4.1.1.1 材料 | 第49页 |
| 4.1.1.2 主要试剂 | 第49页 |
| 4.1.1.3 主要仪器 | 第49页 |
| 4.1.2 试验设计 | 第49-50页 |
| 4.1.2.1 小白菜基因表达量测定试验设计 | 第49-50页 |
| 4.1.2.2 小白菜代谢物质测定试验设计 | 第50页 |
| 4.1.3 试验方法 | 第50-51页 |
| 4.1.3.1 总RNA提取、检测及反转录 | 第50页 |
| 4.1.3.2 相关基因定量引物设计 | 第50页 |
| 4.1.3.3 基因表达 | 第50页 |
| 4.1.3.4 巯基化合物测定 | 第50-51页 |
| 4.1.3.5 糖和氨基酸含量测定 | 第51页 |
| 4.1.3.6 元素含量测定 | 第51页 |
| 4.1.3.7 数据分析 | 第51页 |
| 4.2 结果与分析 | 第51-60页 |
| 4.2.1 硫元素处理对小白菜硫代葡萄糖苷合成相关基因时空表达的影响 | 第51-55页 |
| 4.2.2 外源硫素处理对小白菜硫代葡萄糖苷合成相关代谢物含量的影响 | 第55-59页 |
| 4.2.2.1 葡萄糖 | 第55页 |
| 4.2.2.2 巯基化合物 | 第55-57页 |
| 4.2.2.3 氨基酸 | 第57-59页 |
| 4.2.3 外源硫素处理后对小白菜元素含量的影响 | 第59-60页 |
| 4.3 讨论 | 第60-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-73页 |
| 个人简介 | 第73-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
