前言 | 第4-6页 |
中文摘要 | 第6-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
中英文缩略词对照表 | 第16-18页 |
第1章 文献综述 | 第18-42页 |
1.1 哺乳动物精子发生过程 | 第18-19页 |
1.1.1 精原干细胞产生精母细胞 | 第18页 |
1.1.2 精母细胞产生圆形精子细胞 | 第18页 |
1.1.3 圆形精子细胞变形为成熟精子 | 第18-19页 |
1.2 精子发生过程中的基因表达调控概述 | 第19-20页 |
1.3 相关基因在转录水平对精子发生的调控 | 第20-23页 |
1.3.1 TBP (TATA binding protein,TATA序列结合蛋白) | 第20页 |
1.3.2 c AMP(环腺苷单核苷酸磷酸) | 第20-21页 |
1.3.3 ZF(Zinc Finger,锌指蛋白) | 第21-22页 |
1.3.4 HSP(heat shock protein) | 第22-23页 |
1.4 染色质结构的修饰、变化 | 第23-27页 |
1.4.1 甲基化 | 第24-25页 |
1.4.2 乙酰化/去乙酰化 | 第25页 |
1.4.3 泛素化 (Ubiquitination/Ubiquitylation,UPP) | 第25-26页 |
1.4.4 SUMO化(small ubiquitin-like modifier) | 第26-27页 |
1.4.5 磷酸化 | 第27页 |
1.5 锌指蛋白概述 | 第27-28页 |
1.6 锌指蛋白分类 | 第28-36页 |
1.6.1 根据锌指的氨基酸序列、功能分类 | 第28-29页 |
1.6.2 根据锌指的空间结构分类 | 第29页 |
1.6.3 根据锌指蛋白结构域的差异分类 | 第29页 |
1.6.4 典型的C2H2锌指蛋白家族 | 第29-30页 |
1.6.5 gag knuckle锌指蛋白群 | 第30-31页 |
1.6.6 TC锌指家族(treble clef finger) | 第31-34页 |
1.6.7 带状锌指家族 | 第34-36页 |
1.6.8 Zn2/cys6样锌指家族 | 第36页 |
1.6.9 TAZ2结构域样锌指家族 | 第36页 |
1.6.10 短锌离子结合环锌指蛋白家族 | 第36页 |
1.6.11 金属硫蛋白锌指家族 | 第36页 |
1.7 锌指蛋白的功能及作用 | 第36-38页 |
1.7.1 锌指蛋白介导的蛋白与DNA之间的相互作用 | 第37-38页 |
1.7.2 锌指蛋白介导的蛋白与RNA间的相互作用 | 第38页 |
1.7.3 锌指蛋白介导的蛋白质与蛋白质间的相互作用 | 第38页 |
1.7.4 锌指蛋白同脂质等生物大分子的相互作用 | 第38页 |
1.8 锌指蛋白在雄性生殖中的作用 | 第38-42页 |
1.8.1 Zfy-1/Zfy-2 锌指蛋白 | 第38-39页 |
1.8.2 Zfp29蛋白 | 第39页 |
1.8.3 Zfp35蛋白 | 第39页 |
1.8.4 TSGA锌指蛋白 | 第39页 |
1.8.5 Zfp37锌指蛋白 | 第39-40页 |
1.8.6 Egr4锌指蛋白 | 第40页 |
1.8.7 GATA结合蛋白 | 第40页 |
1.8.8 Zfp403 | 第40-42页 |
第2章 研究背景 | 第42-44页 |
第3章 材料与方法 | 第44-64页 |
3.1 实验材料 | 第44-53页 |
3.1.1 实验动物 | 第44页 |
3.1.2 主要试剂 | 第44-46页 |
3.1.3 主要抗体 | 第46-47页 |
3.1.4 主要引物 | 第47页 |
3.1.5 主要仪器 | 第47-49页 |
3.1.6 主要试剂配制 | 第49-53页 |
3.2 实验方法 | 第53-63页 |
3.2.1 小鼠基因型鉴定 | 第53-54页 |
3.2.2 组织RNA的抽提 | 第54页 |
3.2.3 逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时定量PCR(real-timequantitative PCR) | 第54-56页 |
3.2.4 荧光原位杂交 | 第56页 |
3.2.5 激素测定 | 第56-57页 |
3.2.6 Periodic Acid-Schiff(PAS)染色 | 第57页 |
3.2.7 评估生精小管周期的阶段 | 第57页 |
3.2.8 组织的石蜡切片、免疫组化、HE染色及免疫荧光染色 | 第57-58页 |
3.2.9 生物素示踪剂(Biotin tracer)分析 | 第58-59页 |
3.2.10 评估γ-H2AX染色阳性率 | 第59页 |
3.2.11 透射电子显微镜(Transmission electron microscope,TEM) | 第59页 |
3.2.12 Western-blots实验 | 第59-61页 |
3.2.13 牛血清白蛋白梯度沉降法(STA-PUT) | 第61-62页 |
3.2.14 小鼠睾丸内显微注射 | 第62-63页 |
3.3 统计学分析 | 第63-64页 |
第4章 结果 | 第64-88页 |
4.1 GGNBP2基因敲除小鼠模型的建立 | 第64-65页 |
4.2 GGNBP2基因在小鼠中的表达和定位 | 第65-66页 |
4.3 GGNBP2基因敲除导致小鼠无精症的发生 | 第66-73页 |
4.4 GGNBP2缺失引起小鼠精子分化障碍 | 第73-79页 |
4.5 GGNBP2的缺失导致精子细胞转化异常 | 第79-81页 |
4.6 1月龄的GGNBP2KO小鼠睾丸中粘附蛋白的异常表达 | 第81-82页 |
4.7 GGNBP2KO小鼠精原细胞和圆形精子细胞中与精子发生相关mRNA的表达变化 | 第82-88页 |
第5章 讨论 | 第88-94页 |
第6章 结论 | 第94-96页 |
参考文献 | 第96-114页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第114-116页 |
致谢 | 第116页 |