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基于小反刍兽疫病毒疫苗株N蛋白的抗体检测间接ELISA方法的建立及初步应用

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
文献综述第11-17页
    第一章 小反刍兽疫概述第11-17页
        1.1 小反刍兽疫的流行特点及其危害第11页
        1.2 小反刍兽疫病毒第11-12页
            1.2.1 病毒基因组结构第11-12页
            1.2.2 遗传特性第12页
            1.2.3 理化特性第12页
        1.3 小反刍兽疫诊断第12-13页
            1.3.1 临床诊断第12-13页
            1.3.2 病理学诊断第13页
            1.3.3 实验室诊断第13页
        1.4 小反刍兽疫疫苗第13-15页
            1.4.1 PPR异源弱毒疫苗第13页
            1.4.2 PPR同源弱毒疫苗第13-14页
            1.4.3 基因疫苗第14-15页
        1.5 小反刍兽疫的防控第15-16页
            1.5.1 保护易感动物免受感染第15页
            1.5.2 控制传染源第15页
            1.5.3 切断传播途径第15页
            1.5.4 PPR的监测及扑灭措施第15-16页
        1.6 研究目的意义第16-17页
试验研究第17-32页
    第二章 小反刍兽疫病毒疫苗株N基因的克隆、原核表达及纯化第17-25页
        2.1 材料第17页
            2.1.1 病毒毒株、菌株和质粒第17页
            2.1.2 主要试剂第17页
            2.1.3 阳性血清第17页
        2.2 方法第17-20页
            2.2.1 引物的设计与合成第17-18页
            2.2.2 PPRV基因组RNA的提取及反转录第18页
            2.2.3 N基因的扩增及表达载体的构建第18-19页
            2.2.4 重组N蛋白的表达和表达条件的优化第19-20页
            2.2.5 重组N蛋白表达形式的确定及纯化和复性第20页
            2.2.6 重组N蛋白的Western blot分析第20页
        2.3 结果第20-23页
            2.3.1 PPRV N基因的克隆第20-21页
            2.3.2 pET-28a-N重组质粒的鉴定第21页
            2.3.3 重组蛋白的诱导表达及其表达条件的优化第21-22页
            2.3.4 重组N蛋白表达形式分析及纯化第22-23页
            2.3.5 重组N蛋白的Western blot分析第23页
        2.4 讨论第23-24页
        2.5 小结第24-25页
    第三章 小反刍兽疫病毒N蛋白抗体检测间接ELISA方法的建立与应用第25-32页
        3.1 材料第25页
            3.1.1 主要试剂第25页
            3.1.2 血清第25页
        3.2 方法第25-27页
            3.2.1 间接ELISA方法的建立第25-26页
            3.2.2 抗原、血清和酶标二抗最佳稀释浓度的确定第26页
            3.2.3 作用时间的优化第26-27页
            3.2.5 特异性试验第27页
            3.2.6 敏感性试验第27页
            3.2.7 重复性试验第27页
            3.2.8 临床样品检测第27页
        3.3 结果第27-31页
            3.3.1 抗原包被量及血清和酶标二抗最佳稀释度的确定第27-28页
            3.3.2 作用时间的优化第28-30页
            3.3.3 阴/阳性标准临界值的确定第30页
            3.3.4 间接ELISA的特异性、敏感性和重复性第30-31页
            3.3.5 临床样品检测第31页
        3.4 讨论第31页
        3.5 小结第31-32页
结论第32-33页
参考文献第33-36页
附录第36-40页
缩略表第40-41页
致谢第41-42页
作者简介第42页

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