| 摘要 | 第6-7页 |
| 1 引言 | 第7-16页 |
| 1.1 花色苷的合成与调控 | 第7-11页 |
| 1.1.1 花色素的结构与种类 | 第7-8页 |
| 1.1.2 花色苷的合成途径 | 第8-9页 |
| 1.1.3 花色苷的基因调控 | 第9-11页 |
| 1.2 转录因子的结构与种类 | 第11页 |
| 1.3 MYB家族的特征与功能 | 第11-15页 |
| 1.3.1 MYB蛋白的结构 | 第12-13页 |
| 1.3.2 MYB蛋白的功能 | 第13-15页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第15-16页 |
| 2 欧李MYB基因的克隆及分析 | 第16-47页 |
| 2.1 试验材料 | 第16-17页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第16页 |
| 2.1.2 菌株、载体及主要生化试剂 | 第16页 |
| 2.1.3 试剂及培养基的配制 | 第16-17页 |
| 2.1.4 仪器与设备 | 第17页 |
| 2.2 试验方法 | 第17-22页 |
| 2.2.1 欧李果实总RNA的提取 | 第17-18页 |
| 2.2.2 第一链cDNA的合成 | 第18页 |
| 2.2.3 欧李MYB1O和MYB4基因序列片段PCR扩增 | 第18-21页 |
| 2.2.4 欧李MYB10、MYB4和MYB114基因CDS全长的电子克隆 | 第21-22页 |
| 2.2.5 基因的生物信息学分析 | 第22页 |
| 2.3 结果与分析 | 第22-46页 |
| 2.3.1 欧李果实总RNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.3.2 欧李MYB10基因的克隆和分析 | 第23-32页 |
| 2.3.3 欧李MYB4基因的克隆与分析 | 第32-39页 |
| 2.3.4 欧李MYB114基因的克隆与分析 | 第39-45页 |
| 2.3.5 进化树分析 | 第45-46页 |
| 2.4 讨论 | 第46-47页 |
| 3 欧李MYB基因的表达分析 | 第47-52页 |
| 3.1 试验材料、试剂及设备 | 第47页 |
| 3.1.1 植物材料的采集及处理 | 第47页 |
| 3.1.2 主要生化试剂 | 第47页 |
| 3.1.3 仪器与设备 | 第47页 |
| 3.2 试验方法 | 第47-49页 |
| 3.2.1 总RNA提取及检测 | 第47页 |
| 3.2.2 引物的设计与合成 | 第47-48页 |
| 3.2.3 cDNA第一链的合成 | 第48页 |
| 3.2.4 Real-time qPCR反应 | 第48-49页 |
| 3.3 结果与分析 | 第49-51页 |
| 3.4 讨论 | 第51-52页 |
| 4 欧李MYB基因表达载体的构建及烟草的遗传转化 | 第52-61页 |
| 4.1 试验材料 | 第52-53页 |
| 4.1.1 植物材料、菌株及载体 | 第52页 |
| 4.1.2 酶和试剂 | 第52页 |
| 4.1.3 溶液及培养基配制 | 第52-53页 |
| 4.2 试验方法 | 第53-57页 |
| 4.2.1 四个MYB基因植物表达载体的构建 | 第53-54页 |
| 4.2.2 植物表达载体转化农杆菌 | 第54-55页 |
| 4.2.3 农杆菌介导的烟草叶片瞬时表达 | 第55页 |
| 4.2.4 农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第55-56页 |
| 4.2.5 烟草DNA的提取 | 第56-57页 |
| 4.2.6 再生植株的PCR鉴定 | 第57页 |
| 4.3 结果与分析 | 第57-59页 |
| 4.3.1 表达载体的构建 | 第57页 |
| 4.3.2 烟草叶片瞬时表达 | 第57-58页 |
| 4.3.3 农杆菌菌介导的烟草遗传转化 | 第58页 |
| 4.3.4 再生植株的PCR鉴定 | 第58-59页 |
| 4.4 讨论 | 第59-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| Abstract | 第69页 |
| 致谢 | 第70页 |