| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 1. 文献综述 | 第11-19页 |
| 1.1 T-DNA整合特点 | 第12-13页 |
| 1.1.1 T-DNA修复模型 | 第12-13页 |
| 1.1.2 T-DNA整合对受体基因组的影响 | 第13页 |
| 1.2 T-DNA整合模式研究进展 | 第13-15页 |
| 1.3 热不对称交错式PCR | 第15-18页 |
| 1.3.1 TAIL-PCR原理 | 第15-16页 |
| 1.3.2 hiTAIL-PCR的优点 | 第16-17页 |
| 1.3.3 基因组步移 | 第17-18页 |
| 1.4 目的意义 | 第18-19页 |
| 2. 材料和方法 | 第19-28页 |
| 2.1 基因组DNA提取 | 第19页 |
| 2.2 转基因株系的纯合性检测 | 第19-22页 |
| 2.3 hiTAIL-PCR扩增 | 第22-24页 |
| 2.3.1 引物设计 | 第22-23页 |
| 2.3.2 hiTAIL-PCR第一轮扩增 | 第23页 |
| 2.3.3 hiTAIL-PCR第二轮扩增 | 第23页 |
| 2.3.4 hiTAIL-PCR第三轮扩增 | 第23-24页 |
| 2.3.5 凝胶电泳分离 | 第24页 |
| 2.4 特异片段的亚克隆及测序 | 第24-25页 |
| 2.4.1 亚克隆载体连接 | 第24页 |
| 2.4.2 感受态细胞制备 | 第24页 |
| 2.4.3 感受态细胞的转化 | 第24-25页 |
| 2.4.4 特异片段的亚克隆及测序 | 第25页 |
| 2.5 基因组序列比对 | 第25-26页 |
| 2.5.1 侧翼序列与表达载体比对 | 第25页 |
| 2.5.2 侧翼序列与玉米基因组比对 | 第25-26页 |
| 2.5.3 边界序列与填充序列分析 | 第26页 |
| 2.6 基因组步移 | 第26-28页 |
| 3. 结果与分析 | 第28-41页 |
| 3.1 转基因株系的纯合性 | 第28-29页 |
| 3.2 hiTAIL-PCR扩增的特异片段 | 第29-31页 |
| 3.3 T-DNA整合位点 | 第31-37页 |
| 3.3.1 pCAMBIA1390-Ubi-PhyB1-T-nos转化的T_7代株系 | 第31页 |
| 3.3.2 pTF101.1-Ubi-PhyAl-T-nos转化的T_6代株系 | 第31-32页 |
| 3.3.3 pTF101.1-Ubi-PhyA2-T-nos转化的T_3代株系 | 第32-33页 |
| 3.3.4 pTF101.1-Ubi-PhyB1-T-nos转化的T_0代阳性株1 | 第33-34页 |
| 3.3.5 pCAMBIA1390-Ubi-PhyA1-T-nos转化的T_7代株系 | 第34-36页 |
| 3.3.6 pTF101.1-Ubi-PhyB1-T-nos转化的T_0代阳性株2 | 第36-37页 |
| 3.4 整合位点侧翼的玉米基因组序列 | 第37-39页 |
| 3.5 边界序列在整合中的突变 | 第39-41页 |
| 4. 讨论 | 第41-43页 |
| 4.1 T-DNA整合模式 | 第41-42页 |
| 4.2 T-DNA整合对受体基因的影响 | 第42-43页 |
| 5. 参考文献 | 第43-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 附录 | 第49-55页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第55页 |
