中文摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
1 引言 | 第11-21页 |
·双酰胺类杀虫剂的研究概况 | 第11-13页 |
·氯虫苯甲酰胺概述 | 第11页 |
·氟虫双酰胺的概述 | 第11-13页 |
·小菜蛾抗双酰胺类杀虫剂的研究进展 | 第13-14页 |
·小菜蛾的发生及危害 | 第13页 |
·小菜蛾对双酰胺类杀虫剂的抗药性研究现状 | 第13-14页 |
·小菜蛾对双酰胺类杀虫剂的抗药性机制研究现状 | 第14页 |
·昆虫抗药性基因表达差异分析方法 | 第14-19页 |
·cDNA代表性差异分析(cDNA RDA) | 第14-15页 |
·mRNA显示技术(DDRT) | 第15-16页 |
·基因表达系统分析(SAGE) | 第16页 |
·抑制性消减杂交(SSH) | 第16页 |
·cDNA微阵列(c DNA Microarray) | 第16-17页 |
·双向电泳技术(Two-dimensional gel electrophoresis) | 第17页 |
·高通量测序技术 | 第17页 |
·几种差异表达分析方法的比较 | 第17-19页 |
·选题目的和意义 | 第19-20页 |
·本研究的技术路线 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-36页 |
·供试药剂、试剂和主要仪器 | 第21-22页 |
·供试药剂与化学试剂 | 第21页 |
·主要分子试剂 | 第21-22页 |
·主要仪器 | 第22页 |
·供试昆虫与饲养 | 第22-24页 |
·供试昆虫 | 第22-23页 |
·试剂及培养基的配制 | 第23-24页 |
·毒力测定及抗性选育 | 第24页 |
·分子试验方法 | 第24-35页 |
·小菜蛾抗性品系与敏感品系的cDNA代表性差异分析 | 第24-32页 |
·小菜蛾RNA提取 | 第24-25页 |
·小菜蛾总RNA纯度检测—分光光度法 | 第25页 |
·小菜蛾总RNA完整性的鉴定—琼脂糖凝胶电泳 | 第25-26页 |
·小菜蛾mRNA的纯化 | 第26-27页 |
·小菜蛾双链cDNA的合成 | 第27-28页 |
·制备检测子及扩增子 | 第28-30页 |
·扩增cDNA | 第29页 |
·制备Driver | 第29页 |
·制备Tester | 第29-30页 |
·消减杂交 | 第30页 |
·差异片段的纯化、连接转化与测序 | 第30-32页 |
·小菜蛾基因突变的检测 | 第32-34页 |
·小菜蛾RNA提取、逆转录及PCR扩增 | 第32-34页 |
·不同品系小菜蛾对RyR的表达量 | 第34-35页 |
·荧光定量PCR的引物设计 | 第34页 |
·荧光定量PCR | 第34-35页 |
·数据处理与分析 | 第35-36页 |
3 结果与分析 | 第36-51页 |
·氯虫苯甲酰胺对三种小菜蛾品系/种群的毒力测定 | 第36页 |
·氯虫苯甲酰胺和氟虫双酰胺对小菜蛾抗性选育 | 第36-38页 |
·小菜蛾CDNA代表性差异分析 | 第38-44页 |
·RNA的提取和cDNA的合成 | 第38-39页 |
·cDNA RDA差异片段的获得 | 第39-40页 |
·差异性片段的测序结果 | 第40-42页 |
·差异性片段的核酸及蛋白质的比对结果 | 第42-44页 |
·小菜蛾鱼尼丁受体(PXRYR)C末端突变位点的克隆及检测 | 第44-47页 |
·基因克隆与序列比对 | 第44-47页 |
·RYR在不同品系/种群小菜蛾中的表达量 | 第47-51页 |
·扩增效率 | 第47-48页 |
·不同品系小菜蛾RyR基因的表达量 | 第48-51页 |
4 讨论 | 第51-54页 |
·CDNA RDA在获得小菜蛾差异性基因中的应用 | 第51页 |
·细胞色素P450基因的分析 | 第51-52页 |
·鱼尼丁受体基因突变频率检测 | 第52-53页 |
·不同品系RYR基因表达量的检测 | 第53页 |
·有待继续研究的问题 | 第53-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
·小菜蛾对氯虫苯甲酰胺和氟虫双酰胺抗性发展 | 第54页 |
·CDNA代表性差异分析 | 第54页 |
·RYR的基因突变检测 | 第54页 |
·不同品系RYR的基因表达量变化 | 第54-55页 |
本文创新之处 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读学位期间发表论文情况 | 第63页 |