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齐口裂腹鱼MHCⅡA基因的克隆、组织分布及其在胚胎和仔鱼中表达的初步研究

摘要第1-6页
Abstract第6-14页
第一章 文献综述第14-25页
 前言第14-15页
 1 鱼类的免疫系统第15-16页
   ·免疫器官第15页
   ·免疫细胞第15页
   ·体液免疫因子第15-16页
 2 主要组织相容性复合体第16-24页
   ·MHC基因的发现第16-17页
   ·MHC种类和功能第17页
   ·MHCⅠ类和MHCⅡ类分子结构第17-19页
   ·鱼类MHC基因特性第19-20页
     ·连锁情况第19页
     ·基因的位点数第19页
     ·基因的多态性第19-20页
   ·MHC与鱼类的抗病性第20-22页
   ·鱼类MHC基因的表达第22-24页
     ·MHC基因在胚胎发育和胚后发育过程中的表达第22-23页
     ·MHC基因表达的组织特异性第23页
     ·病原体刺激下MHC基因的表达变化第23-24页
 3 研究的目的和意义第24-25页
第二章 齐口裂腹鱼MHCⅡA基因的克隆和序列分析第25-45页
 1 试验材料第25-27页
   ·齐口裂腹鱼第25页
   ·主要试剂第25-26页
   ·主要仪器设备第26-27页
 2 试验方法第27-33页
   ·总RNA提取第27页
   ·总RNA质量检测第27-28页
   ·齐口裂腹鱼cDNA第一链合成第28页
   ·RACE扩增第28-31页
     ·齐口裂腹鱼MHCⅡA基因的cDNA中间片段扩增第28-29页
     ·RACE-Ready cDNA第一链合成第29-30页
     ·齐口裂腹鱼MHCⅡA基因的3'和5'RACE cDNA序列的扩增第30-31页
   ·PCR产物的纯化、克隆及测序第31-32页
     ·目的片段的回收第31页
     ·目的片段的克隆第31页
     ·测序第31-32页
   ·齐口裂腹鱼MHCⅡA基因cDNA全序列第32页
   ·齐口裂腹鱼MHCⅡA基因的多态性分析第32页
     ·齐口裂腹鱼MHCⅡA基因ORF序列的克隆第32页
     ·齐口裂腹鱼MHCⅡA基因的命名与多态性分析第32页
   ·生物信息学分析第32-33页
 3 结果与分析第33-42页
   ·组织总RNA质量第33-34页
   ·齐口裂腹鱼MHCⅡA基因的cDNA全序列第34-36页
   ·MHCⅡA基因的氨基酸序列与分析第36-37页
     ·理化性质第36页
     ·蛋白结构、功能预测第36-37页
     ·3D空间结构预测第37页
   ·齐口裂腹鱼MHCⅡA基因的多态性第37-41页
     ·齐口裂腹鱼MHCⅡA等位基因的命名第37-38页
     ·齐口裂腹鱼MHCⅡA基因的氨基酸变异第38页
     ·MHCⅡA基因的同源性第38-41页
   ·MHCⅡA基因的系统进化树构建与分析第41-42页
 4 讨论第42-44页
   ·齐口裂腹鱼MHCⅡA基因的序列特征第42-43页
   ·齐口裂腹鱼MHCⅡA基因ORF区的多态性第43-44页
 5 小结第44-45页
第三章 齐口裂腹鱼MHCⅡA基因的组织分布第45-51页
 1 实验材料第45-46页
   ·齐口裂腹鱼成鱼第45页
   ·主要试剂第45页
   ·主要仪器设备第45-46页
 2 试验方法第46-47页
   ·总RNA提取和质量检测第46页
   ·齐口裂腹鱼cDNA第一链合成第46页
   ·Real Time PCR第46-47页
     ·引物设计与检测第46-47页
     ·标准曲线制备与反应体系的筛选第47页
     ·实时荧光定量反应第47页
   ·数据分析第47页
 3 结果与分析第47-49页
 4 讨论第49-50页
 5 小结第50-51页
第四章 齐口裂腹鱼MHCⅡA基因胚胎期和胚后期的表达第51-60页
 1 试验材料第51-53页
   ·齐口裂腹鱼的胚胎和胚后仔鱼第51-53页
   ·主要试剂第53页
   ·主要仪器设备第53页
 2 试验方法第53-54页
 3 结果与分析第54-57页
   ·齐口裂腹鱼MHCⅡA基因在胚胎期的表达情况第54页
   ·齐口裂腹鱼MHCⅡA基因在仔鱼期的表达情况第54-57页
 4 讨论第57-58页
   ·MHCⅡA基因在齐口裂腹鱼胚胎中的表达第57-58页
   ·MHCⅡA基因在齐口裂腹鱼仔鱼中的表达第58页
 5 小结第58-60页
结论第60-61页
参考文献第61-71页
攻读硕士期间完成的专利第71-72页
致谢第72页

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