| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略符号 | 第11-12页 |
| 文献综述 | 第12-30页 |
| 1 家畜卵母细胞体外成熟研究进展 | 第12-15页 |
| ·卵母细胞来源与质量决定其发育能力 | 第12-13页 |
| ·卵母细胞与卵丘细胞的相互作用 | 第13-14页 |
| ·体外成熟培养环境影响卵母细胞内mRNA蓄积 | 第14-15页 |
| 2 家畜体细胞核移植技术研究进展 | 第15-20页 |
| ·体细胞核移植技术主要方法 | 第15-18页 |
| ·体细胞核移植过程中表观遗传重编程 | 第18-19页 |
| ·体细胞核移植技术应用 | 第19-20页 |
| 3 家畜胚胎体外培养研究进展 | 第20-22页 |
| ·家畜胚胎体外培养体系 | 第21页 |
| ·体外胚胎培养环境影响囊胚质量 | 第21-22页 |
| ·体外培养环境影响基因表达 | 第22页 |
| ·胚胎体外培养引起的产后巨胎症 | 第22页 |
| 4 本研究目的意义和主要内容 | 第22-24页 |
| ·绵羊体外受精与体细胞克隆技术存在的问题 | 第22-23页 |
| ·本研究的目的意义及研究内容 | 第23-24页 |
| 参考文献 | 第24-30页 |
| 第一章 绵羊体外受精胚胎生产技术的优化 | 第30-40页 |
| 1 材料与方法 | 第31-32页 |
| ·试剂来源与溶液配制 | 第31页 |
| ·发情绵羊血清的制备 | 第31页 |
| ·绵羊卵巢采集 | 第31页 |
| ·卵母细胞采集 | 第31-32页 |
| ·卵母细胞体外成熟 | 第32页 |
| ·体外受精 | 第32页 |
| ·胚胎体外培养 | 第32页 |
| ·数据处理与分析 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-35页 |
| ·采集方法对卵母细胞质量和数量的影响 | 第33-34页 |
| ·激素和血清对卵母细胞成熟率的影响 | 第34页 |
| ·培养体系对体外受精胚胎囊胚囊胚率的影响 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-37页 |
| ·采集方法对卵母细胞利用效率的影响 | 第35-36页 |
| ·成熟液中添加不同种类激素和血清对卵母细胞成熟率的影响 | 第36页 |
| ·培养体系对体外受精胚胎囊胚率的影响 | 第36-37页 |
| 4 本章小结 | 第37-38页 |
| 参考文献 | 第38-40页 |
| 第二章 绵羊胎儿与耳缘成纤维细胞系的建立 | 第40-48页 |
| 1 材料与方法 | 第40-43页 |
| ·试剂来源与溶液配制 | 第40页 |
| ·细胞系的建立 | 第40-41页 |
| ·细胞传代、冻存与复苏 | 第41-42页 |
| ·绵羊5代胎儿成纤维细胞分离纯化与生长曲线绘制 | 第42页 |
| ·绵羊胎儿成纤维细胞核型分析 | 第42-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-45页 |
| ·绵羊体细胞基础培养液的筛选 | 第43-44页 |
| ·绵羊胎儿与耳缘成纤维细胞系的建立与生长曲线绘制 | 第44-45页 |
| ·绵羊5代成纤维细胞核型分析 | 第45页 |
| 3 讨论 | 第45-46页 |
| ·不同基础培养液对绵羊成纤维细胞生长的影响 | 第45-46页 |
| ·绵羊胎儿与耳缘成纤维细胞生长曲线比较 | 第46页 |
| ·绵羊成纤维细胞核型分析 | 第46页 |
| 4 本章小结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-48页 |
| 第三章 核移植方法和维生素C影响绵羊克隆胚胎体外发育 | 第48-62页 |
| 1 材料与方法 | 第49-52页 |
| ·试剂来源与溶液配制 | 第49页 |
| ·绵羊卵母细胞体外成熟培养 | 第49页 |
| ·卵母细胞去核 | 第49-50页 |
| ·去核成功的检测 | 第50页 |
| ·供体细胞准备 | 第50页 |
| ·显微注射法构建重构胚 | 第50-51页 |
| ·无透明带融合法构建重构胚 | 第51页 |
| ·卵母细胞孤雌激活 | 第51页 |
| ·重构胚激活与体外培养 | 第51-52页 |
| ·数据处理与分析 | 第52页 |
| 2 结果与分析 | 第52-57页 |
| ·显微注射克隆法中融合方法和融合参数对重构胚融合效率的影响 | 第52-53页 |
| ·不同克隆胚胎构建方法对绵羊克隆胚胎发育效率的影响 | 第53-55页 |
| ·不同浓度维生素C对绵羊孤雌胚胎囊胚囊胚率的影响 | 第55页 |
| ·维生素C对绵羊孤雌囊胚细胞数的影响 | 第55-56页 |
| ·维生素C对绵羊体细胞克隆胚胎囊胚率的影响 | 第56-57页 |
| 3 讨论 | 第57-58页 |
| ·融合方法与融合参数对构建绵羊体细胞克隆胚胎效率的影响 | 第57页 |
| ·核移植方法对绵羊克隆胚胎囊胚率的影响 | 第57页 |
| ·维生素C对绵羊体细胞克隆胚胎发育的影响 | 第57-58页 |
| 4 本章小结 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-62页 |
| 全文结论 | 第62-64页 |
| 附录：仪器与设备 | 第64-66页 |
| 致谢 | 第66-68页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第68页 |
