| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略语 | 第13-14页 |
| 第一篇 文献综述 犬细小病毒病研究进展 | 第14-26页 |
| 1 犬细小病毒病概况 | 第14-15页 |
| ·起源和发展 | 第14页 |
| ·感染宿主范围 | 第14页 |
| ·流行现状 | 第14-15页 |
| ·临床症状 | 第15页 |
| 2 犬细小病毒病的病原特性 | 第15-17页 |
| ·形态特点和生物学特性 | 第15页 |
| ·培养特性 | 第15-16页 |
| ·基因组结构与编码蛋白 | 第16-17页 |
| ·抗原性 | 第17页 |
| 3 犬细小病毒病的诊断 | 第17-20页 |
| ·临床诊断 | 第17页 |
| ·病毒分离 | 第17-18页 |
| ·电镜检查 | 第18页 |
| ·免疫学检测方法 | 第18-19页 |
| ·分子生物学检测方法 | 第19-20页 |
| 4 犬细小病毒的防控 | 第20-22页 |
| ·弱毒疫苗 | 第20-21页 |
| ·灭活疫苗 | 第21页 |
| ·基因工程亚单位疫苗 | 第21页 |
| ·核酸疫苗 | 第21-22页 |
| 5 犬细小病毒病的治疗 | 第22-23页 |
| 参考文献 | 第23-26页 |
| 第二篇 试验研究 | 第26-80页 |
| 第一章 犬细小病毒的分离及其VP2基因分子特征分析 | 第26-44页 |
| 摘要 | 第26-27页 |
| 1 材料和方法 | 第27-33页 |
| ·细胞、毒株和动物 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·病料采集与处理 | 第27-28页 |
| ·病毒分离与培养 | 第28页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第28页 |
| ·动物发病试验 | 第28页 |
| ·病毒生物学特性分析 | 第28-29页 |
| ·VP2基因的扩增 | 第29-30页 |
| ·VP2基因的克隆 | 第30-31页 |
| ·VP2基因的序列分析 | 第31-32页 |
| ·VP2蛋白的立体结构分析 | 第32页 |
| ·VP2蛋白的诱导表达 | 第32页 |
| ·重组VP2蛋白的抗原性分析 | 第32-33页 |
| 2 结果 | 第33-38页 |
| ·病毒分离与培养 | 第33页 |
| ·病毒滴度的测定 | 第33-34页 |
| ·动物发病试验 | 第34页 |
| ·病毒生物学特性分析 | 第34-35页 |
| ·VP2基因的扩增与克隆 | 第35-36页 |
| ·VP2基因的序列分析 | 第36页 |
| ·VP2蛋白的立体结构分析 | 第36-37页 |
| ·VP2蛋白的诱导表达 | 第37-38页 |
| ·重组VP2蛋白的抗原性分析 | 第38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-42页 |
| Abstract | 第42-44页 |
| 第二章 分泌犬细小病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立 | 第44-56页 |
| 摘要 | 第44-45页 |
| 1 材料与方法 | 第45-49页 |
| ·细胞、病毒和动物 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·CPV抗原的纯化 | 第45页 |
| ·动物免疫 | 第45页 |
| ·细胞融合 | 第45-46页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第46页 |
| ·杂交瘤细胞株的筛选 | 第46页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的亚克隆 | 第46-47页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备 | 第47页 |
| ·单克隆抗体特异性鉴定 | 第47-48页 |
| ·单克隆抗体效价测定 | 第48页 |
| ·单克隆抗体亚类鉴定 | 第48页 |
| ·单克隆抗体抗原识别位点差异性分析 | 第48页 |
| ·单克隆抗体中和活性测定 | 第48-49页 |
| ·杂交瘤细胞株稳定性测定 | 第49页 |
| 2 结果 | 第49-53页 |
| ·CPV抗原的纯化 | 第49页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第49-50页 |
| ·单克隆抗体特异性鉴定 | 第50-52页 |
| ·单克隆抗体效价测定 | 第52页 |
| ·单克隆抗体亚类鉴定 | 第52页 |
| ·单克隆抗体抗原识别位点差异性分析 | 第52-53页 |
| ·单克隆抗体中和活性测定 | 第53页 |
| ·杂交瘤细胞株稳定性测定 | 第53页 |
| 3 讨论 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-55页 |
| Abstract | 第55-56页 |
| 第三章 犬细小病毒单克隆抗体夹心ELISA检测方法的建立 | 第56-68页 |
| 摘要 | 第56-57页 |
| 1 材料与方法 | 第57-60页 |
| ·病毒、抗体与动物 | 第57页 |
| ·主要试剂 | 第57页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备 | 第57页 |
| ·腹水的纯化 | 第57-58页 |
| ·单克隆抗体的标记 | 第58页 |
| ·单克隆抗体配对试验 | 第58页 |
| ·捕获抗体和酶标抗体工作浓度的优化 | 第58页 |
| ·夹心ELISA试验条件的优化 | 第58-59页 |
| ·夹心ELISA判定标准的确定 | 第59页 |
| ·特异性检验 | 第59页 |
| ·敏感性检验 | 第59页 |
| ·重复性检验 | 第59-60页 |
| ·临床样品检测 | 第60页 |
| 2 材料与方法 | 第60-64页 |
| ·单克隆抗体配对试验 | 第60页 |
| ·捕获抗体和酶标抗体工作浓度的优化 | 第60-61页 |
| ·夹心ELISA试验条件的优化 | 第61-63页 |
| ·夹心ELISA判定标准的确定 | 第63页 |
| ·特异性检验 | 第63页 |
| ·敏感性检验 | 第63-64页 |
| ·重复性检验 | 第64页 |
| ·临床样品检测 | 第64页 |
| 3 讨论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-67页 |
| Abstract | 第67-68页 |
| 第四章 犬细小病毒单克隆抗体胶体金免疫层析检测试纸条的制备 | 第68-80页 |
| 摘要 | 第68-69页 |
| 1 材料和方法 | 第69-73页 |
| ·单抗与病料 | 第69页 |
| ·主要试剂及耗材 | 第69页 |
| ·玻璃器皿的处理 | 第69页 |
| ·单克隆抗体纯化 | 第69页 |
| ·胶体金溶液的制备 | 第69-70页 |
| ·胶体金溶液的鉴定 | 第70页 |
| ·胶体金与抗体的标记 | 第70-71页 |
| ·试纸条的优化 | 第71页 |
| ·试纸条的组装 | 第71-72页 |
| ·试纸条特性鉴定 | 第72-73页 |
| ·临床样品检测 | 第73页 |
| 2 结果 | 第73-76页 |
| ·胶体金溶液的鉴定 | 第73-74页 |
| ·胶体金与抗体的标记 | 第74页 |
| ·试纸条的优化 | 第74-75页 |
| ·试纸条特性鉴定 | 第75-76页 |
| ·临床样品检测 | 第76页 |
| 3 讨论 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-79页 |
| Abstact | 第79-80页 |
| 全文总结 | 第80-82页 |
| 附录：常用试剂的配制 | 第82-86页 |
| 致谢 | 第86-88页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第88页 |
