| 摘要 | 第1-17页 |
| ABSTRACT | 第17-21页 |
| 符号与缩写 | 第21-22页 |
| 第一章 绪论 | 第22-48页 |
| ·转录因子概述 | 第22-38页 |
| ·转录因子的定义、作用机制及检测意义 | 第22页 |
| ·转录因子的传统检测方法 | 第22-23页 |
| ·转录因子的新型检测方法 | 第23-38页 |
| ·无外切酶辅助的识别探针构象转变法 | 第24-28页 |
| ·外切酶辅助的识别探针构象转变法 | 第28-30页 |
| ·外切酶切割辅助扩增法 | 第30-38页 |
| ·三螺旋DNA(Triplex DNA)的组成及其应用 | 第38-41页 |
| ·Triplex DNA的组成 | 第38页 |
| ·Triplex DNA的应用 | 第38-41页 |
| ·共区域化的原理及应用 | 第41-43页 |
| ·共区域化的原理 | 第41页 |
| ·共区域化的应用 | 第41-43页 |
| ·本论文的创新点以及研究内容 | 第43-44页 |
| ·创新点 | 第43页 |
| ·研究内容 | 第43-44页 |
| ·参考文献 | 第44-48页 |
| 第二章 Ag~+稳定的自组装triplex DNA分子开关用于转录因子的灵敏检测 | 第48-64页 |
| ·引言 | 第48-50页 |
| ·实验部分 | 第50-52页 |
| ·仪器 | 第50页 |
| ·材料与试剂 | 第50-51页 |
| ·实验步骤 | 第51-52页 |
| ·DNA的分装、储存及工作溶液的配制 | 第51页 |
| ·Ag~+-STDMS的构建及其与目标物NF-κB p50的结合反应、荧光强度的的测定 | 第51-52页 |
| ·triplex DNA及Ag~+-STDMS的UV熔解曲线的测定 | 第52页 |
| ·结果与讨论 | 第52-61页 |
| ·Ag~+-STDMS用于转录因子的灵敏检测的可行性研究 | 第52-54页 |
| ·反应条件的优化 | 第54-56页 |
| ·Ag~+浓度的优化 | 第54页 |
| ·BHQ-1-TFO长度的优化 | 第54-55页 |
| ·BHQ-1-TFO浓度的优化 | 第55-56页 |
| ·pH的优化 | 第56页 |
| ·检测方法的分析性能 | 第56-61页 |
| ·荧光强度对不同浓度目标物的响应以及线性范围的确定 | 第56-58页 |
| ·精密度和重现性的考察 | 第58页 |
| ·特异性考察 | 第58-59页 |
| ·实际样品测定 | 第59-61页 |
| ·结论 | 第61-62页 |
| ·参考文献 | 第62-64页 |
| 第三章 基于GO荧光开关的多功能G四倍体发夹探针用于转录因子的免标记、灵敏检测 | 第64-82页 |
| ·引言 | 第64-65页 |
| ·实验部分 | 第65-67页 |
| ·仪器装置 | 第65-66页 |
| ·材料与试剂 | 第66-67页 |
| ·实验步骤 | 第67-68页 |
| ·DNA的分装、储存及工作溶液的配制 | 第67页 |
| ·MGHP在GO表面的吸附、复合物的解离、NMM的插入及荧光测定 | 第67-68页 |
| ·反应过程的聚丙烯酰胺电泳表征 | 第68页 |
| ·结果与讨论 | 第68-79页 |
| ·基于GO荧光开关的MGHP用于转录因子的免标记灵敏检测的可行性研究 | 第68-71页 |
| ·实验条件的优化 | 第71-75页 |
| ·MGHP环部长度的优化 | 第71-72页 |
| ·MGHP末端信号载体长度的优化 | 第72页 |
| ·GO浓度的优化 | 第72-73页 |
| ·GO猝灭时间的优化 | 第73-74页 |
| ·目标物结合时间的优化 | 第74页 |
| ·NMM浓度的优化 | 第74-75页 |
| ·检测方法的分析性能 | 第75-79页 |
| ·线性范围的确定 | 第75页 |
| ·特异性考察 | 第75-76页 |
| ·精密度和重现性考察 | 第76页 |
| ·抑制效应考察 | 第76-77页 |
| ·实际样品的测定 | 第77-79页 |
| ·结论 | 第79-80页 |
| ·参考文献 | 第80-82页 |
| 第四章 共区域化识别激活的级联信号放大用于转录因子的高灵敏检测 | 第82-102页 |
| ·引言 | 第82-84页 |
| ·实验部分 | 第84-87页 |
| ·仪器装置 | 第84页 |
| ·材料与试剂 | 第84-86页 |
| ·实验步骤 | 第86-87页 |
| ·高压灭菌 | 第86页 |
| ·DNA的分装、储存及工作溶液的配制 | 第86页 |
| ·共区域化识别激活的级联信号放大及荧光测定 | 第86-87页 |
| ·结果与讨论 | 第87-98页 |
| ·共区域化识别激活的级联信号放大用于转录因子的高灵敏检测的可行性 | 第87-88页 |
| ·实验条件的优化 | 第88-94页 |
| ·链置换辅助序列的筛选 | 第88-91页 |
| ·目标物结合时间的优化 | 第91-92页 |
| ·指数滚环扩增(ERCA)时间的优化 | 第92-93页 |
| ·环状模板浓度的优化 | 第93页 |
| ·Phi29 DNA polymerase用量的优化 | 第93-94页 |
| ·检测方法的分析性能 | 第94-98页 |
| ·线性范围的确定 | 第94页 |
| ·特异性考察 | 第94-95页 |
| ·精密度和重现性考察 | 第95页 |
| ·抑制效应考察 | 第95-96页 |
| ·回收率测定 | 第96-97页 |
| ·实际样品的测定 | 第97-98页 |
| ·结论 | 第98-99页 |
| ·参考文献 | 第99-102页 |
| 第五章 协同的掩蔽效应和结合保护效应介导的级联信号放大用于转录因子的高灵敏检测 | 第102-120页 |
| ·引言 | 第102-104页 |
| ·实验部分 | 第104-107页 |
| ·仪器装置 | 第104页 |
| ·材料与试剂 | 第104-106页 |
| ·实验步骤 | 第106-107页 |
| ·高压灭菌 | 第106页 |
| ·DNA的分装、储存及工作溶液的配制 | 第106页 |
| ·协同的的掩蔽效应和结合保护效应介导的级联信号放大及荧光测定 | 第106-107页 |
| ·结果与讨论 | 第107-116页 |
| ·协同的的掩蔽效应和结合保护效应介导的级联信号放大高灵敏检测转录因子的可行性研究 | 第107-108页 |
| ·实验条件的优化 | 第108-111页 |
| ·掩蔽链的优化 | 第108-109页 |
| ·掩蔽时间的优化 | 第109-110页 |
| ·目标物结合时间的优化 | 第110页 |
| ·ERCA时间的优化 | 第110-111页 |
| ·检测方法的分析性能 | 第111-116页 |
| ·线性范围的确定 | 第111-112页 |
| ·特异性考察 | 第112-113页 |
| ·精密度和重现性考察 | 第113页 |
| ·抑制效应考察 | 第113-114页 |
| ·回收率测定 | 第114页 |
| ·实际样品的测定 | 第114-116页 |
| ·结论 | 第116-117页 |
| ·参考文献 | 第117-120页 |
| 致谢 | 第120-122页 |
| 博士期间发表论文 | 第122-123页 |
| 附件 | 第123-133页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第133页 |
