银杏叶提取物对糖尿病大鼠肾脏保护作用的实验研究

【摘要】：糖尿病(Diabetes mellitus)是最为常见的严重代谢紊乱性疾病,其并发症在周围神经系统和中枢神经系统会引起一系列的功能和结构损害,除此之外,糖尿病肾病是糖尿病最为常见的血管并发症之一,细胞凋亡密切的参与了糖尿病肾病的发生。近年发现银杏叶提取物(extracts of ginkgo biloba leaves, EGb)有抑制肾小管上皮细胞凋亡的作用。EGb的主要活性成分有黄酮苷和银杏内酯。黄酮苷已被证实具有清除自由基、抗脂质过氧化等作用。也有文献报道EGb可以捕获自由基,抑制其诱发的细胞凋亡。目的 以雄性Wistar大鼠为研究对象,在链脲佐菌素(Streptozotocin)诱导的大鼠糖尿病模型上,从血液生化学、组织学以及分子生物学等方面探讨银杏叶提取物(extracts of ginkgo biloba leaves, EGb)对糖尿病大鼠肾脏的保护作用及其机制的研究。方法雄性Wistar大鼠腹腔注射链脲佐菌素(50mg.kg-1),4天后检测血糖,确认建立糖尿病模型成功,给予不同剂量EGb治疗3个月后,检测血糖及尿液生化指标,观察肾脏损伤情况；处死大鼠后,提取各组肾脏组织的RNA,通过RT-PCR (reverse transeriptase-polymerase chain reaction逆转录聚合酶链反应)检测Bax和Bcl-2基因在mRNA水平的表达,并利用免疫组化及western-blot等技术观察大鼠肾皮质Bcl-2和Bax的表达。结果 治疗后血糖检测显示Ins组显著低于M. GL (50mg.kg-1EGb)、GH (100mg.kg-1EGb)各组(P0.05); RT-PCR(逆转录聚合酶链反应)结果表明EGb治疗显著升高了肾脏Bax mRNA水平的表达(与M组相比,GL组P0.05,GH组P0.01)；降低了Bcl-2 mRNA水平的表达(与M组相比,GL组P0.05,GH组P0.01)。免疫组化结果,与正常组相比,糖尿病组大鼠肾皮质Bax表达明显上升(P0.01)、Bcl-2表达明显下降(P0.01)；而与模型组相比,GL、GH治疗组大鼠肾皮质Bcl-2表达明显上升(P0.05、P0.01),GL治疗组大鼠肾皮质Bax表达下降不明显(P0.05),GH治疗组大鼠肾皮质Bax表达明显下降(P0.05)。western-blot结果与此相似。结论 银杏叶提取物可能是通过升高糖尿病大鼠肾皮质Bcl-2的表达和抑制其Bax的表达,从而对糖尿病大鼠的肾损伤起到治疗作用。
【关键词】：银杏叶提取物 糖尿病 肾皮质 Bcl-2 Bax
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R285.5