| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 英文缩写索引 | 第14-15页 |
| 1 引言 | 第15-17页 |
| 2 材料和方法 | 第17-30页 |
| ·实验材料 | 第17-20页 |
| ·细胞系 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·主要实验仪器 | 第18-19页 |
| ·主要试剂的配置 | 第19-20页 |
| ·实验方法 | 第20-28页 |
| ·EC9706细胞的培养 | 第20-21页 |
| ·UCN-01的配置 | 第21-22页 |
| ·siRNA转染EC9706细胞 | 第22页 |
| ·RT-PCR检测mRNA表达 | 第22-23页 |
| ·细胞爬片的制备 | 第23-24页 |
| ·免疫细胞化学法 | 第24-25页 |
| ·Western Blot检测蛋白表达 | 第25-27页 |
| ·四唑盐(MTT)比色法检测细胞增殖 | 第27页 |
| ·原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡 | 第27-28页 |
| ·流式细胞术检测细胞凋亡 | 第28页 |
| ·统计学处理 | 第28-30页 |
| 3 结果 | 第30-40页 |
| ·siRNA转染效率检验 | 第30页 |
| ·PDK1 siRNA的筛选 | 第30页 |
| ·PDK1 siRNA、UCN-01对PDK1mRNA表达的影响 | 第30-32页 |
| ·PDK1 siRNA、UCN-01对PDK1蛋白表达及Akt蛋白磷酸化水平的影响 | 第32-36页 |
| ·免疫细胞化学结果 | 第32-33页 |
| ·Western Blot结果 | 第33-36页 |
| ·PDK1 siRNA、UCN-01对EC9706细胞增殖的影响 | 第36-37页 |
| ·PDK1 siRNA、UCN-01对EC9706细胞凋亡的影响 | 第37-40页 |
| ·原位末端标记法(TUNEL)结果 | 第37-38页 |
| ·流式细胞术结果 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-47页 |
| ·PDK1与肿瘤的关系 | 第40-41页 |
| ·PDK1 siRNA对EC9706细胞PDK1基因表达的影响 | 第41-42页 |
| ·UCN-01对EC9706细胞PDK1基因表达的影响 | 第42-43页 |
| ·PDK1 siRNA、UCN-01对Akt蛋白磷酸化水平的影响 | 第43-44页 |
| ·PDK1 siRNA、UCN-01对EC9706细胞增殖的影响 | 第44-45页 |
| ·PDK1 siRNA、UCN-01对EC9706细胞凋亡的影响 | 第45页 |
| ·结语 | 第45-47页 |
| 5 结论 | 第47-48页 |
| 附图 | 第48-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 综述部分 PDK1基因与肿瘤靶向治疗的研究进展 | 第59-76页 |
| 1 PDK1基因和蛋白的分子结构 | 第60页 |
| 2 PDK1与AGC激酶家族及其生物学功能 | 第60-63页 |
| ·PDK1介导的PI3K/Akt信号转导通路 | 第60-62页 |
| ·PDK1对p70-S6K的调节 | 第62页 |
| ·PDK1对PKC的调节 | 第62-63页 |
| ·PDK1缺失的小鼠 | 第63页 |
| 3 PDK1激酶活性的调节 | 第63-65页 |
| ·磷酸化调节 | 第64页 |
| ·胞内定位调节 | 第64-65页 |
| ·结合蛋白的作用 | 第65页 |
| 4 PDK1与肿瘤 | 第65-67页 |
| ·PDK1与乳腺癌 | 第66页 |
| ·PDK1与胶质母细胞瘤 | 第66-67页 |
| ·PDK1与结肠癌 | 第67页 |
| 5 靶向沉默PDK1基因的策略 | 第67-69页 |
| ·以PDK1为靶点的基因治疗 | 第67-68页 |
| ·PDK1抑制剂的开发及其在肿瘤治疗中的应用 | 第68-69页 |
| 6 小结与展望 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 附录部分 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 个人简历 | 第77页 |
