| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-18页 |
| ·东乡野生稻概述 | 第9-10页 |
| ·东乡野生稻抗寒性研究 | 第9-10页 |
| ·东乡野生稻抗旱性研究 | 第10页 |
| ·东乡野生稻抗病性研究 | 第10页 |
| ·东乡野生稻抗虫害研究 | 第10页 |
| ·植物抗寒研究 | 第10-12页 |
| ·植物响应寒冷的 ICE1-CBF(DREB1)-COR 信号转导途径 | 第11页 |
| ·ICE1-CBF(DREB1)-COR 途径的调控 | 第11-12页 |
| ·植物抗寒相关的功能性蛋白 | 第12页 |
| ·植物胚胎发育晚期丰富（LEA）蛋白的研究进展 | 第12-14页 |
| ·LEA 蛋白的分类及各族特征 | 第12-13页 |
| ·LEA 蛋白的表达调控及亚细胞定位 | 第13页 |
| ·LEA 蛋白在植物抗非生物胁迫方面的研究 | 第13-14页 |
| ·植物 ASR 基因的研究进展 | 第14-16页 |
| ·ASR 基因在植物中的发现与克隆 | 第14页 |
| ·ASR 基因结构及表达调控 | 第14-15页 |
| ·ASR 蛋白的结构及亚细胞定位 | 第15页 |
| ·ASR 蛋白在植物抗非生物胁迫方面的研究 | 第15-16页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第16-18页 |
| 第二章 东乡野生稻 ASR2 基因克隆及其生物信息学分析 | 第18-32页 |
| ·试验材料、试剂与仪器设备 | 第18-19页 |
| ·试验材料 | 第18页 |
| ·质粒及菌株 | 第18页 |
| ·试剂 | 第18页 |
| ·仪器 | 第18-19页 |
| ·试验方法 | 第19-21页 |
| ·冬季根及夏季根 cDNA 文库的转化 | 第19页 |
| ·冬季根及夏季根 cDNA 文库的筛选 | 第19-20页 |
| ·东乡野生稻 ASR2 蛋白的生物信息学分析 | 第20-21页 |
| ·结果与分析 | 第21-30页 |
| ·冬季根及夏季根 cDNA 文库的转化 | 第21页 |
| ·冬季根及夏季根 cDNA 文库的筛选 | 第21-22页 |
| ·ASR2 基因的鉴定 | 第22-23页 |
| ·东乡野生稻 ASR2 蛋白的生物信息学分析 | 第23-30页 |
| ·ASR2 蛋白的基本理化性质分析 | 第23-25页 |
| ·ASR2 蛋白信号肽分析 | 第25页 |
| ·ASR2 蛋白亚细胞定位预测 | 第25-27页 |
| ·ASR2 蛋白二级结构分析 | 第27-28页 |
| ·ASR2 蛋白的结构域的分析 | 第28页 |
| ·东乡野生稻 ASR2 蛋白与不同来源的 ASR 蛋白的多序列比对及进化树分析 | 第28-30页 |
| ·小结 | 第30-32页 |
| 第三章 ASR2 基因在东乡野生稻中的表达分析 | 第32-41页 |
| ·试验材料、试剂与仪器设备 | 第32-33页 |
| ·试验材料 | 第32页 |
| ·试验试剂及配方 | 第32-33页 |
| ·试验仪器 | 第33页 |
| ·试验方法 | 第33-36页 |
| ·东乡野生稻三叶期幼苗的培育 | 第33页 |
| ·东乡野生稻幼苗的非生物胁迫处理 | 第33-34页 |
| ·胁迫下东乡野生稻总 RNA 的提取 | 第34页 |
| ·DNase 去除 DNA | 第34-35页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第35页 |
| ·ASR2 基因在非生物胁迫下的东乡野生稻中表达的实时荧光 PCR 分析 | 第35-36页 |
| ·ASR2 基因在东乡野生稻不同生长时期中表达的实时荧光 PCR 分析 | 第36页 |
| ·结果与分析 | 第36-40页 |
| ·东乡野生稻苗的非生物胁迫处理 | 第36-37页 |
| ·胁迫下东乡野生稻总 RNA 的提取 | 第37-38页 |
| ·ASR2 基因在非生物胁迫下的东乡野生稻中表达的实时荧光 PCR 分析 | 第38-40页 |
| ·ASR2 基因在东乡野生稻不同生长时期中表达的实时荧光 PCR 分析 | 第40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第四章 ASR2 蛋白的亚细胞定位 | 第41-50页 |
| ·试验材料、试剂与仪器设备 | 第41-42页 |
| ·试验材料 | 第41页 |
| ·质粒与菌株 | 第41页 |
| ·试验试剂 | 第41页 |
| ·试验仪器 | 第41-42页 |
| ·试验方法 | 第42-46页 |
| ·ASR2:GFP 融合蛋白植物表达载体的构建 | 第42-45页 |
| ·引物设计 | 第42页 |
| ·pSuper1300-GFP 质粒的提取 | 第42-43页 |
| ·东乡野生稻 ASR2 基因片段的制备 | 第43-44页 |
| ·pSuper1300-GFP 质粒和 ASR2 基因的双酶切及纯化 | 第44页 |
| ·pSuper1300-GFP 质粒和 ASR2 基因的酶连反应 | 第44-45页 |
| ·pSuper1300- ASR2-GFP 重组质粒的转化与筛选 | 第45页 |
| ·ASR2 蛋白的洋葱表皮瞬时表达 | 第45-46页 |
| ·洋葱表皮的制备 | 第45页 |
| ·农杆菌侵染洋葱表皮 | 第45-46页 |
| ·融合蛋白的亚细胞定位观察 | 第46页 |
| ·结果与分析 | 第46-49页 |
| ·ASR2:GFP 融合蛋白植物表达载体的构建 | 第46-47页 |
| ·ASR2 蛋白的亚细胞定位 | 第47-49页 |
| ·小结及讨论 | 第49-50页 |
| 第五章 ASR2 的原核表达及热稳定性研究 | 第50-63页 |
| ·质粒、菌株、试剂与仪器设备 | 第50-51页 |
| ·质粒与菌株 | 第50页 |
| ·试验试剂 | 第50页 |
| ·试验仪器 | 第50-51页 |
| ·试验方法 | 第51-57页 |
| ·pET28a(+)-ASR2 原核表达载体的构建 | 第51-54页 |
| ·引物设计 | 第52页 |
| ·东乡野生稻 ASR2 基因片段的制备 | 第52页 |
| ·pET-28a(+)质粒的提取 | 第52页 |
| ·pET-28a(+)质粒和 ASR2 基因的双酶切及纯化 | 第52-53页 |
| ·pET-28a(+)质粒和 ASR2 基因的酶连反应 | 第53页 |
| ·pET28a(+)-ASR2 重组质粒的转化与筛选 | 第53-54页 |
| ·ASR2 重组基因的原核表达 | 第54-55页 |
| ·SDS-PAGE 电泳检测 ASR2 融合蛋白 | 第55-56页 |
| ·ASR2 融合蛋白的非变性纯化 | 第56页 |
| ·ASR2 融合蛋白热稳定性研究 | 第56-57页 |
| ·ASR2 融合蛋白透析 | 第56-57页 |
| ·ASR2 融合蛋白含量的测定 | 第57页 |
| ·ASR2 融合蛋白的热变性 | 第57页 |
| ·结果与分析 | 第57-62页 |
| ·pET28a(+)-ASR2 原核表达载体的构建 | 第57-59页 |
| ·ASR2 重组基因的原核表达 | 第59页 |
| ·ASR2 融合蛋白的非变性纯化 | 第59-61页 |
| ·ASR2 融合蛋白热稳定性研究 | 第61-62页 |
| ·小结 | 第62-63页 |
| 第六章 全文总结与展望 | 第63-65页 |
| 参考文献 | 第65-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
